李文芳
- 作品数：8 被引量：28H指数：4
- 供职机构：四川大学轻纺与食品学院更多>>
- 发文基金：四川省科技支撑计划国家科技支撑计划四川省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 菌落原位杂交法筛选特定菌种的方法初探被引量：1
- 2013年
- 菌落原位杂交法是重组DNA技术中最常用的方法之一,但该方法存在着杂交背景复杂及杂交结果不稳定性等缺点,所以进一步优化杂交体系显得尤为迫切。本研究通过优化杂交体系,最终确定利用溶菌酶处理杂交膜和采用非严紧型洗脱方式洗膜,不仅使得杂交体系的杂交结信号清晰,而且杂交背景较干净。研究结果表明,在探针特异性好的基础上,采用优化的菌落原位杂交体系筛选特定菌种是可行的。
- 刘超兰王海英李文芳张文学赖登燡范鏖
- 关键词：寡核苷酸探针地高辛
- DGGE法初步解析浓香型白酒糟醅微生物群落结构被引量：6
- 2013年
- 对沱牌酒厂两个不同窖池的浓香型大曲发酵的黄水浸泡界面糟、中层糟和双轮底糟及蒸馏酒后粮糟样品所提取的总DNA进行细菌V7～V8区、真菌18S rDNA和古菌V3～V4区片段的PCR,后进行DGGE分析,同时对糟醅真菌DGGE图谱中主要优势条带进行克隆测序。结果表明,不同的窖池其糟醅细菌、古菌和真菌群落结构有一定差异,而相同窖池的糟醅细菌、古菌和真菌群落结构具有较大的相似性;浓香型大曲发酵糟醅双轮底糟的微生物种类最为丰富,其次是中层糟。
- 李家民邹永芳王海英张文学李文芳
- 关键词：糟醅真菌古菌DGGE
- DGGE法初步解析沱牌酒厂窖底泥微生物群落结构被引量：7
- 2013年
- 以沱牌酒厂窖龄为5年、10年和20年的不同窖底泥为研究对象,通过对窖底泥总DNA进行细菌16SrDNA V7-V8区、古菌16S rDNA V3-V4区和真菌18S rDNA片段PCR扩增,以及变性梯度电泳及软件分析等,发现窖泥微生物中以细菌和古菌较为丰富,真菌最乏。每种菌在聚类分析中是聚为一簇的,且最低相似值为0.45,其中细菌相似值高于0.6,表明3个年份的微生物群落结构相差均不是很大,尤其是真菌。
- 李家民邹永芳王海英张文学李文芳
- 关键词：窖泥古菌真菌DGGE
- 川皖地区浓香型白酒窖底泥微生物菌群的多样性分析被引量：3
- 2013年
- 以四川中部三大名优酒厂所取20年窖龄的窖底泥,以及在安徽某酒厂所取窖龄为20年的老熟、未老化和老化窖泥为研究对象。通过PCR-DGGE技术及Quantity One软件分析比对了各酒厂窖底泥的微生物群落结构。结果表明,与安徽某酒厂相比,四川3个酒厂的细菌群落结构极为相似,而各酒厂古菌菌群的差异较大;安徽某酒厂老化窖泥与其老熟及未老化窖泥相比,细菌和古菌菌群在数量和丰度上都有所降低,但是都有明显的优势菌存在。
- 李文芳王海英张文学邓宇
- 关键词：窖泥古菌群落DGGE
- 盐渍青菜真菌菌群结构DGGE分析及酵母菌分离鉴定被引量：5
- 2015年
- 盐渍青菜又称酸菜,是制作川菜及其调味品的一种非常重要的食品原料,对其菌群结构的研究与功能微生物的分离可以为工业化生产提供理论依据。采用变性梯度凝胶电泳技术(denatured gradient gel electrophoresis,DGGE)对不同盐渍青菜样品的真菌菌群结构进行了分析,结果表明,随着盐渍时间的延长,优势条带数量逐渐增多,真菌以酵母菌为主。4个主要的优势条带分别与假丝酵母属(Candida)、德巴氏酵母属(Debaryomyces)、接合酵母属(Zygosaccharomyces)的菌株相似。从盐渍青菜样品中分离得到10株酵母菌,通过分子生物学鉴定为汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、鲁氏接合酵母(Zygosaccharomyces rouxii)。PCR-DGGE技术对盐渍青菜菌群结构的解析不依赖培养,方法简便快捷,能够直观准确地分析盐渍青菜的真菌菌群结构。
- 尹礼国马伟玲李文芳杨婧梁会朋张其圣陈功吴正云张文学
- 关键词：酵母菌
- 一种筛选细菌新菌种的方法
- 本发明提供了一种筛选细菌新菌种的方法，其步骤如下：（1）富集培养样品中的细菌并对其进行分离纯化；（2）PCR纯化产物的16S rDNA、克隆、测序；（3）筛出与NCBI数据库中16SrDNA序列同源性低于97%的序列；（...
- 张文学黄丹刘超兰吴正云李文芳张劲罗青春
- 文献传递
- 盐渍白萝卜的真菌菌群结构DGGE分析及酵母菌分离鉴定
- 2015年
- 采用变性梯度凝胶电泳技术(denatured gradient gel electrophoresis,DGGE)对不同盐渍白萝卜样品的真菌菌群结构分析表明,Candida lactis-condensi、Candida versatilis、膜醭毕赤酵母(Pichia membranifaciens)、汉逊德巴氏酵母菌(Debaryomyces hansenii)为盐渍萝卜的优势菌。通过传统分离培养技术从样品中分离到17株酵母菌,通过分子生物学鉴定为Pichia sp.、膜醭毕赤酵母(Pichia membranefaciens)、德巴利酵母属(Debaryomyces sp.)。传统分离培养技术未分离到Candida lactis-condensi,Candida versatilis。DGGE技术能够快速高效、直观地反映盐渍白萝卜的菌群结构,结果合理。
- 尹礼国马伟玲李文芳魏劲松张其圣罗青春陈功吴正云张文学
- 关键词：酵母菌
- 用DGGE方法初步解析浓香型大曲微生物群落结构被引量：8
- 2012年
- 以沱牌酒厂地面曲和架子曲为研究对象,将地面曲和架子曲的曲皮和曲心微生物总DNA进行了细菌V3区、古菌V7～V8区和真菌18S rDNA片段扩增后,利用DGGE及Quantity Qne软件分析,同时对大曲真菌DGGE图谱中主要优势条带进行克隆测序。结果表明,曲内微生物群落结构主要因大曲的不同部位而有所差异,制曲方式占次要地位。从2种曲中均检测出了嗜热真菌丝衣霉状篮状菌(Talaromyces byssochlamydoides)及入窖粮糟中也存在孢圆酵母(Torulaspora)。
- 李家民王海英张文学李文芳邹永芳
- 关键词：大曲古菌真菌DGGE
