李茂宁
- 作品数：26 被引量：30H指数：3
- 供职机构：广西兽医研究所更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项广西壮族自治区科学研究与技术开发计划国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪增生性肠炎的研究进展
- 引起增生性肠炎的病原为胞内劳森菌，该病极大的增加了养猪成本。本文就该病近年来的研究成果及其进展做一综述。
- 谢丽华黄伟坚张宁李茂宁
- 关键词：猪病防治增生性肠炎发病机理病理变化
- 文献传递
- 一种快速区分猪圆环病毒2型和3型的二重PCR检测引物及试剂盒
- 本发明公开了一种快速区分猪圆环病毒2型和3型的二重PCR检测引物及试剂盒，本发明属于动物病毒学和分子生物学技术领域。该试剂盒包括SEQ ID1~4所示的引物序列，还包括了2×F8 Fastlong PCR MasterM...
- 卢冰霞秦毅斌何颖赵武刘磊段群棚陈忠伟李斌梁家幸闭炳芬苏乾莲蒋冬福周英宁侯韶毅李茂宁
- 文献传递
- 猪乙型脑炎研究进展
- 乙型脑炎是一种严重的人畜共患虫媒病毒性疾病。该病对人类危害巨大,同时也是危害养猪业的重大疫病之一.近年来,猪乙型脑炎的研究取得了很大的进展。本文综述了猪乙型脑炎的病原学、诊断方法、疫苗等的研究进展.
- 李茂宁赵武梁家幸陈云霞肖爱欢李斌刘芳何颖梁保忠姚瑞英黄安国蒋玉雯黄伟坚
- 关键词：乙型脑炎乙型脑炎病毒病原学致病机制流行病学疫苗
- 文献传递
- 广西猪乙型脑炎病毒的分离鉴定及血清流行病学调查研究
- 乙型脑炎( Japanese encephalitis， JE)由乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus， JEV)引起，是世界上特别是亚洲东部和东南部最重要的病毒性脑炎之一，死亡率高达20...
- 李茂宁
- 关键词：血清流行病学
- 文献传递
- 猪胞内劳森氏菌GXNN株4个抗原性候选基因抗原性分析被引量：3
- 2010年
- 参考GenBank上已发表的胞内劳森氏菌相关蛋白序列,设计了4对引物,分别扩增了4个抗原性候选基因(3个外膜蛋白基因和1个表面脂蛋白基因),并将4个抗原性候选基因构建好原核表达载体后进行原核表达、SDS-PAGE电泳和Western blotting分析。SDS-PAGE电泳检测初步确定重组融合蛋白pET32a-LI0902、pET32a-LI1022能够进行表达,分别得到53、37kDa的条带;Western blotting分析则初步确定pET32a-LI1022具有抗原性。研究结果首次验证胞内劳森氏菌外膜蛋白基因是否具有抗原性,为诊断试剂盒及基因工程疫苗的研制提供理论基础。
- 肖爱欢谢丽华廖承球兰家暖李茂宁侯韶毅陆仕勇黄伟坚
- 关键词：胞内劳森氏菌抗原性候选基因SDS-PAGE电泳BLOTTING
- 猪乙脑病毒RT-nested-PCR方法的建立与初步应用
- 根据GenBank上登录的JEV-E基因序列，设计了内外2对引物，以JEV疫苗株为模板，建立了检测猪乙型脑炎病毒的RT-nested-PCR方法。应用该方法对JEV疫苗株RNA进行扩增，获得与预期大小相符，长度为228b...
- 李茂宁姚瑞英黄安国蒋玉雯黄伟坚赵武李斌陈云霞梁家幸肖爱欢刘芳何颖梁保忠
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型核酸疫苗的小鼠免疫保护试验被引量：1
- 2010年
- 为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗在小鼠攻毒试验中的免疫保护效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,扩增出ORF2基因及其截短基因8个片段(A(ORF2)、B(51-100aa)、C(101-150aa)、D(181-235aa)、E(151-200aa)、F(51-150aa)、G(101-235aa)、H(51-235aa)),将其插入到pcDNA3.0载体中,构建出真核表达质粒,并将其转染至PK-15细胞,用间接免疫荧光试验检测其瞬时表达情况。将试验小鼠随机分成9组,其中免疫组7组,阴阳性对照各1组,将纯化的真核表达质粒对小鼠进行组合免疫;二免后,用经处理过的PCV-2 GXWZ-2株阳性病料悬液腹腔注射免疫组和非免疫对照组小鼠,阴性对照组用生理盐水腹腔注射;其后进行体重记录、病理切片制作及PCR检测。结果表明:共有6个真核表达质粒成功在PK-15细胞中表达。在攻毒后的3周内,阳性对照组小鼠PCR诊断均为阳性;免疫组中,部分组小鼠在攻毒后第1周或在第2周为阳性,到第3周时各免疫组小鼠全部为阴性;阴性对照组始终为阴性。免疫组在病理保护学方面明显优于非免疫对照组,非免疫对照组的体重增长速率略低于免疫组和阴性对照组。由此可见猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒试验中有明显的保护作用。
- 张宁侯韶毅韦英益李茂宁肖爱欢谢丽华刘芳高永锐卢桂娟陆有飞黄伟坚
- 关键词：重组质粒间接免疫荧光试验免疫保护效果
- 猪圆环病毒2型ORF2截短基因片段真核表达载体的构建及其DNA疫苗的免疫效果被引量：2
- 2009年
- 为研究猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2截短基因片段核酸疫苗的免疫效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,用PCR方法扩增出ORF2基因及其截短基因共8个片段[A(ORF2)、B(51～100 aa)、C(101～150 aa)、D(181～235 aa)、E(151～200 aa)、F(51～150 aa)、G(101～235 aa)、H(51～235 aa)],将其插入pcD-NA3.0载体中,成功构建了pcDNA-A、pcDNA-B、pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E、pcDNA-F、pcDNA-G、pcDNA-H。将纯化后的真核表达质粒转染PK-15细胞后,用间接免疫荧光试验检测各个质粒在细胞中的瞬时表达情况。分别用单独免疫和组合免疫的方法免疫小鼠,每只0.15 mg,用ELISA试剂盒检测小鼠血清中的抗体效价,并分析这两种方法的免疫效果。结果显示,6个片段较短的重组质粒(pcDNA-B、pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E、pcDNA-F、pcDNA-G)转染的细胞中均有明显且较亮的荧光出现,而2个片段较长的重组质粒(pcDNA-A、pcDNA-H)及空载体pcDNA3.0转染的细胞中没有荧光出现。在单独免疫组中,这8个片段的真核表达质粒都能刺激机体产生特异性抗体,其中片段较短的pcDNA-C、pcDNA-D、pcDNA-E的免疫效果比较理想;在组合免疫中,除pcDNA-C-F外,各个真核表达质粒都能产生较高水平且稳定的抗体,其中pcDNA-D-H、pcDNA-B-F的免疫效果最好。表明组合免疫要比单独免疫的效果好。
- 张宁李茂宁侯韶毅兰家暖谢丽华黄伟坚冯励韦英益刘芳李军
- 关键词：猪圆环病毒2型真核表达重组质粒免疫效果
- 广西猪乙型脑炎病毒的分离与鉴定
- 从广西各地猪场采集了猪脑组织、流产的仔猪死胎、种公猪精液、蚊子样品共142份进行检测,结果有34份为JEV阳性。从检测得到的34份阳性样品中选择了1份死胎猪脑组织和1份种公猪精液分别接种BHK-21细胞、乳鼠及鸡胚进行J...
- 李茂宁赵武秦毅斌卢冰霞李斌梁家幸肖爱欢何颖苏乾莲梁保忠覃勇张伟韦建华曹国敏黄伟坚
- 关键词：乙型脑炎病毒E基因
- 文献传递
- 2003～2008年广西猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株分子流行病学调查被引量：3
- 2009年
- GP5是猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）变异最大的结构蛋白，能够诱导机体产生中和抗体。2003～2008年从广西各县市采集PRRSV阳性病料，扩增得到的49株PRRSVORF5基因序列，并对序列进行比较和分析。49个毒株的ORF5分别属于美洲型的Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ亚群．推导氨基酸分析发现：在中和表位区域GXLZ-1、GXLZ-2由H^38→N^38、L^39→I^39，Ⅱ亚群所有毒株序列由L^39→I^39；在R^13和R^151毒力相关位点，GXGG-1变为Q^13，GXLZ-1和GXLZ-2变为K^151，其他毒株未发生突变，推测Ⅱ亚群广西毒株的毒力比Ⅰ、Ⅳ亚群的强；从2003—2005年和2006—2008年这2个时间段分析，在9aa、16aa、54aa、59aa、94aa、104aa、185aa出现了时间性的基因变异；遗传进化树分析发现，随着时间的推移，获得的广西毒株与CH-1a、MLV株亲缘关系逐渐发生偏离，2006年6月之后所获得毒株亲缘关系很近，相互之间同源性很高，且与国内PRRSV变异毒株JXA1高度同源，推断2006年后获得的毒株与变异株可能由同一毒株演化而来。
- 陈琼黄伟坚冯建远卢桂娟张宁何萍平秦毅斌李茂宁
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5
