李飞
- 作品数:6 被引量:6H指数:2
- 供职机构:泰安市中心医院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 组织型纤溶酶原激活剂突变体瑞替普酶的原核表达、活性鉴定及酶动力学
- 目的重组表达抗纤溶酶原激活剂抑制剂(PAI)作用的组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体(PA1 t-PA),经诱导表达、复性和纯化后进行生物学活性和酶动力学分析。方法构建pBV220-t-PA重组表达质粒,经DNA测序...
- 李飞朱美财占志马红雨蔡庆
- 关键词:组织型纤溶酶原激活物酶类
- 文献传递
- 组织型纤溶酶原激活剂突变体瑞替普酶的原核表达、活性鉴定及酶动力学
- 目的重组表达抗纤溶酶原激活剂抑制剂(PAI)作用的组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体(PA1 t-PA),经诱导表达、复性和纯化后进行生物学活性和酶动力学分析。方法构建pBV220-t-PA重组表达质粒,经DNA测序...
- 李飞朱美财占志马红雨蔡庆
- 关键词:组织型纤溶酶原激活物酶类
- 重组人抗PAI抑制作用的新型纤溶酶原激活剂突变体的表达与活性研究
- 血栓性急性心脑血管病是严重威胁人类健康的疾病。目前在治疗这类疾病方面已经取得了重大进展,溶栓治疗是其中最为重要的技术之一。据世界卫生组织统计,全世界每年死于该类疾病的患者大约有1600万人,我国每年患有这类疾病的人数也有...
- 李飞
- 关键词:纤溶酶原激活剂蛋白表达动力学常数
- 文献传递
- 溶栓剂的研发现状及其最新进展被引量:2
- 2013年
- 由冠状动脉血栓导致的血栓性疾病通常表现为急性心肌梗死(AMI)。AMI严重影响了人类的生命和健康,已成为威胁人类健康的第一杀手.据美国心脏统计委员会和卒中小组的报道,2005年有2400名美国人死于心脑血管病(CVD),2006年的整体初步分析,
- 李飞朱美财占志王冬雪
- 关键词:溶栓剂
- 组织型纤溶酶原激活剂突变体瑞替普酶的原核表达、活性鉴定及酶动力学被引量:3
- 2013年
- 目的重组表达抗纤溶酶原激活剂抑制剂(PAI)作用的组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体(PA1 t-PA),经诱导表达、复性和纯化后进行生物学活性和酶动力学分析。方法构建pBV220-t-PA重组表达质粒,经DNA测序确认后,转化至大肠杆菌DH5α,温控诱导表达,凝胶过滤法对包涵体蛋白进行初步纯化,复性后,过刺桐胰蛋白酶抑制剂亲和层析柱纯化,酶动力学分析其活性。结果经测序t-PA突变体的DNA序列正确,表达蛋白占总菌体蛋白的30%,经纯化后纯度>95%,比活性为4.2×108 IU.g-1,t-PA突变体与PAI-1反应后其活性未受到抑制。t-PA突变体酶的米氏常数Km为0.3298μmol·L-1,最大水解速度Vmax为0.0476μmo·lmin-1.g-1。结论 t-PA突变体能够明显抵抗PAI的抑制作用,并具有良好的生物活性。
- 李飞朱美财占志马红雨蔡庆
- 关键词:组织型纤溶酶原激活物酶类
- 抗PAI抑制作用的纤溶酶原激活剂突变体的活性研究
- 2014年
- 目的:重组表达抗PAI抑制作用的t-PA突变体,经诱导表达、复性、纯化后进行生物学活性和酶动力学分析。方法:构建pBV220-tpa重组表达质粒,经DNA测序确认后,转化至大肠杆菌DH5a,温控诱导表达,凝胶过滤法对包涵体蛋白进行初步纯化,复性后,过刺桐胰蛋白酶亲和层析柱纯化,酶动力学分析其活性。结果:测序证实,t-PA突变体的DNA序列正确,表达蛋白占总菌体蛋白的30%,经纯化后纯度达90%以上,比活性为7.0×108IU/mg,t-PA突变体与PAI-1反应后,其活性未受到抑制。t-PA突变体酶的米氏常数Km为0.5298,最大水解速度Vmax为0.0595。结论:经生物学活性测定,表达蛋白能够明显抵抗PAI的抑制作用,并具有良好的生物活性,该突变体有可能成为用量更少、疗效更佳的新型溶栓药物。
- 李飞李忠培占志王冬雪朱美财
- 关键词:组织型纤溶酶原激活剂突变体蛋白表达酶动力学