杜锐
- 作品数：11 被引量：7H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金西京医院学科助推计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程更多>>
- Twist在慢性肾脏病患者肾组织中的表达及意义
- 孙世仁王汉民杜锐何丽洁翟英于艳
- 腹膜纤维化相关转录因子SP1促进腹膜间皮细胞纤维化的研究
- 何丽洁娄未娟杜锐黄晨王汉明张鹏刘晓谓孙世仁
- 含蛋白转导域的SARA/SBD融合蛋白的原核表达、纯化及生物学活性鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的:SARA/SBD是纤维化形成过程中的负性调节因子。原核表达、纯化含反式激活蛋白(TAT)蛋白转导域(PTD)的TAT PTD-SARA/SBD融合蛋白,并鉴定其生物学活性。方法:将TAT PTD-SARA/SBD基因克隆入带His标签的原核表达载体pET-44a(+)中,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,表达产物经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化后,SDS-PAGE和Western印迹鉴定目的蛋白;用人腹膜间皮细胞系(HPMC),通过免疫细胞化学方法检测其穿膜能力,及与TGF-β1信号通路中Smad2因子的共定位情况。结果:用基因工程方法表达和纯化了TAT PTD-SARA/SBD融合蛋白,目的蛋白约占菌体总蛋白的20%左右,且以可溶形式表达,经Ni2+-NTA纯化后,所获蛋白纯度高于95%(HPLC归一法);功能学实验结果显示该蛋白能穿过胞膜,主要定位于胞核,且与Smad2因子具有核内共定位。结论:表达了TAT PTD-SARA/SBD融合蛋白,该蛋白具有生物学活性。
- 李曼黄晨张伟王增禄李晶杜锐孙世仁张鹏张英起
- 关键词：蛋白转导域原核表达纯化生物学活性
- microRNAs与肝病的研究
- 2007年
- 近年动植物中发现一类普遍存在的非编码小RNA—microRNAs(miRNAs)。作为人体内最大的一类基因表达调控因子,miRNAs参与发育、增殖、分化、凋亡等多种重要的生物学过程,并在许多疾病过程中扮演重要角色,包括病毒复制和肿瘤的发生。miRNAs作为一类新的分子靶标,应用于疾病诊断和治疗具有广阔的前景。本文就miRNAs与肝炎病毒复制和肝癌发生的最新研究进展作一综述。
- 刘杰杜锐樊代明
- 关键词：微RNAS肝炎病毒肝炎病毒病毒复制
- 早期生长反应因子1过表达促进肾小管上皮细胞转分化被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨早期生长反应因子1(Egr-1)在肾小管上皮细胞转分化中的作用。方法:(1)体外实验:用pcDNA3.1,pcDNA3.1/Egr-1转染肾小管上皮细胞株HK-2,qRT-PCR法、Western免疫印迹法检测Egr-1及转分化标志物E-cadherin、成纤维细胞特异性蛋白(Fsp-1)mRNA及蛋白水平的表达变化;用pcDNA3.1/Egr-1和siEgr-1或psilencer3.1共转染HK-2,Western免疫印迹法检测Egr-1、E-cadherin、Fsp-1蛋白水平的表达变化。(2)体内实验:建立大鼠慢性肾纤维化模型——5/6肾脏次全切除,造模成功后免疫组化法检测大鼠肾组织中Egr-1、E-cadherin、Fsp-1的表达。结果:(1)与转染空载体相比,HK-2细胞过表达Egr-1后,上皮细胞标志性蛋白E-cad-herin表达减弱,成纤维细胞标志性蛋白Fsp-1表达增强(P<0.05),提示出现肾小管上皮细胞转分化表型。而用小干扰RNA干扰掉Egr-1后,与空载体组及亲本细胞组相比,转分化表型得到逆转。(2)体内实验证实,与假手术组(SOR)相比,5/6肾脏次全切除肾组织中,转分化标志蛋白E-cadherin表达减弱、Fsp-1表达增加,同时肾小管上皮细胞Egr-1的表达明显升高,提示肾小管上皮细胞发生转分化,且其与Egr-1过表达密切相关。结论:Egr-1的过表达促进了肾小管上皮细胞转分化,参与肾间质纤维化的发生发展。
- 翟英孙世仁杜锐黄晨王汉民
- 关键词：E钙粘素
- miRNA-7负性调控MYH19抑制肾小管上皮细胞转分化
- 何丽洁孙世仁黄晨李翠香于艳杜锐李蓉张鹏刘晓渭王汉民
- 腹膜纤维化相关转录因子SRF促进腹膜间皮细胞纤维化的研究
- 目的:建立及验证腹膜间皮细胞纤维化模型,通过分析人腹膜间皮细胞系(HPMC)及其经高糖处理后1d,7d发生纤维化的腹膜间皮细胞系(HPMC-F1,HPMC-F7)细胞核内差异的活性转录因子,筛选及验证与腹膜纤维化相关的转...
- 何丽洁娄未娟杜锐王汉民孙世仁
- Twist过表达在人腹膜间皮细胞转分化中的作用被引量：3
- 2011年
- 目的探讨twist在人腹膜间皮细胞(HPMCs)转分化中的作用。方法取HPMCs细胞,分别用50mmol/L右旋葡萄糖(高糖组)和5.6mmol/L右旋葡萄糖(对照组)刺激48h,采用Western blotting检测twist、E-钙黏素(E-cadherin)、成纤维细胞特异性蛋白1(Fsp1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。另采用质粒pcDNA3.1-twist(pcDNA3.1-twist组)和空载体pcDNA3.1(空载体组)分别转染常规培养的HPMCs,使HPMCs过表达twist后,采用qRT-PCR、Western blotting方法检测twist、E-cadherin、Fsp1和α-SMA mRNA及蛋白的表达情况。再采用质粒twist小干扰RNA(阳性转染组)和空载体pcDNA3.1(空载体组)分别转染50mmol/LD-葡萄糖培养48h后的HPMCs细胞,另选择未转染质粒的细胞作为亲本细胞组,采用Western blotting检测twist下调后,E-cadher-in、Fsp1、α-SMA蛋白水平的表达情况。结果与对照组相比,高糖组twist、Fsp1和α-SMA蛋白表达明显增加,E-cadherin表达减弱(P<0.05)。与空载体组相比,HPMCs过表达twist后,pcDNA3.1-twist组E-cadherin mRNA及蛋白表达减弱,Fsp1和α-SMA mRNA及蛋白表达增强(P<0.05)。用小干扰RNA使twist沉默后,与亲本细胞组及空载体相比,E-cadherin蛋白表达增加,Fsp1和α-SMA蛋白表达减弱(P<0.05)。结论 Twist过表达促进了HPMCs的转分化。
- 李翠香孙世仁何丽洁杜锐娄未娟王汉民
- 关键词：TWIST转录因子钙黏着糖蛋白类肌动蛋白类
- 多种血液净化模式治疗急性砷化氢中毒的研究
- 目的 探讨不同血液净化方式对急性砷化氢中毒的治疗效果.方法 对6 例急性砷化氢中毒患者,男性2 例,女性4 例,年龄39-50 岁(平均43.5 岁),在对症支持治疗的同时,分别采用血浆置换、血液灌流、血浆吸附及连续性静...
- 黄晨张鹏刘宏宝李洋平于艳杜锐王汉民何丽洁李嵘仲雅李亚娟孙世仁
- 重组蛋白转导结构域-SARA融合蛋白生物学功能的初步研究被引量：1
- 2010年
- 目的初步研究重组蛋白转导结构域(Protein transduction domain,PTD)-SARA融合蛋白(PTD-SARA)抗肾脏纤维化的生物学功能。方法采用免疫细胞化学法检测重组PTD-SARA融合蛋白的穿膜作用;通过显微镜观察人肾小管上皮细胞HK2形态学变化,Western blot法测定上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和磷酸化Smad3蛋白水平,以比较PTD-SARA融合蛋白和SARA蛋白抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱发的肾小管上皮细胞向间质细胞转分化作用。结果重组PTD-SARA融合蛋白可高效地转入细胞胞质与胞核;PTD-SARA融合蛋白与SARA蛋白相比,能更显著地上调E-cadherin蛋白的表达,下调α-SMA和磷酸化Smad3蛋白的表达,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论与SARA蛋白相比,PTD-SARA融合蛋白可以高效地进入细胞胞质及胞核,并能明显地抑制TGF-β1诱发的肾小管上皮细胞向间质细胞转分化作用,为进一步研究重组PTD-SARA融合蛋白防治肾脏纤维化奠定了基础。
- 加慧卫黄晨李晶张英起孙世仁杜锐
- 关键词：SARA蛋白转导结构域融合蛋白质类纤维化
