王新
- 作品数：26 被引量：28H指数：3
- 供职机构：南通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金南通大学自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒
- 本发明公开了一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒，采用5’‑磷酸化单链寡聚脱氧核糖核苷酸(5’‑p‑ss‑DNA Oligo)和Argonaute mRNA联合下调基因表达，包括NgAgo基因的改造，表达质粒的构建，表达...
- 刘东石运伟董张及王新
- 文献传递
- FoxQ1在不同级别脑胶质瘤组织的表达和临床意义
- 2015年
- 目的:研究FoxQ1在不同级别脑胶质瘤组织中的表达和临床意义。方法:在组织水平,使用免疫组织化学法检测92例不同级别胶质瘤组织中FoxQ1的表达,并分析FoxQ1表达与临床病理参数及预后的关系。结果:FoxQ1在34例低级别星形细胞瘤(WHOⅠ~Ⅱ级)、35例间变性星形细胞瘤(WHOⅢ级)和23例胶质母细胞瘤(WHOⅣ级)组织中的阳性表达率分别为:14.70%、65.71%和91.30%,差异有统计学意义(χ2=35.85,P<0.01)。胶质瘤组织中FoxQ1表达与WHO分级相关(P<0.05)。经Kaplan-Meier法生存比较,FoxQ1的阳性表达者比阴性表达者生存期短(P<0.05)。多因素分析显示FoxQ1表达是胶质瘤患者独立的预后指标。结论:FoxQ1异常表达可能参与胶质瘤的发生发展和预后相关,并有望成为评估胶质瘤预后的有效指标。
- 蒋蔚王新
- 关键词：胶质瘤预后
- 生长激素促进斑马鱼尾鳍的再生
- 2019年
- 目的建立生长激素过表达的转基因斑马鱼,研究生长激素在斑马鱼尾鳍再生过程中的作用。方法利用Gateway技术构建表达质粒"pDestTol2CG2; ubi:GH-polyA",在一细胞期显微注射表达质粒和转座酶mRNA后,通过荧光显微镜和qPCR技术筛选鉴定GH过表达的转基因斑马鱼。将斑马鱼分为对照组(野生型)和生长激素过表达组,尾鳍横切后,记录分析斑马鱼尾鳍再生过程。结果转基因斑马鱼中心脏被绿色荧光蛋白标记。荧光定量PCR检测结果显示GH表达水平显著高于对照组(P<0.05)。斑马鱼尾鳍横断后,生长激素过表达组的再生速度显著提高(P<0.05)。结论建立稳定生长激素过表达的转基因斑马鱼品系,过表达生长激素能够提高斑马鱼尾鳍再生速度。
- 刘雪静王雪雯石运伟王新高煜刘东
- 关键词：生长激素
- 外周血miR-494及Let-7e在诊断急性缺血性脑卒中患者中的临床价值被引量：2
- 2016年
- 目的:通过检测急性缺血性脑卒中患者与正常对照组外周血中miR-494及Let-7e的表达水平,探讨其与急性缺血性脑卒中的关系。方法:收集67例急性缺血性脑卒中患者及50例非卒中正常健康人群,采用实时荧光定量PCR法(Quantitative Real-time PCR,QRT-PCR)检测血浆中miR-494及Let-7e表达水平,比较两组外周血中表达水平的差异。并对miR-494及Let-7e行ROC曲线分析,分析其对急性缺血性脑卒中的诊断价值。进一步将急性缺血性脑卒中患者分为预后不佳组(MRS 3-6)和预后良好组(MRS0-2),分析其在两组之间的差异。结果:急性缺血性脑卒中患者外周血中的miR-494(1.71±1.14)及Let-7e(1.43±0.93)的表达水平较正常对照组外周血明显升高(P<0.05)。miR-494及Let-7e ROC曲线下面积分别为0.777、0.756。预后不良组的miR-494(2.04±0.11 vs.1.46±0.05)及Let-7e(1.68±0.61 vs.1.24±0.27)表达水平均较预后良好组显著升高,两组之间有统计学差异(P<0.05)。结论:miR-494及Let-7e可能与急性缺血性脑卒中相关,对急性缺血性脑卒中患者的临床诊断和预后判断具有潜在的应用价值。
- 包元飞王新王玲玲
- 关键词：缺血性脑卒中LET实时荧光定量PCR法
- 医学本科生分子生物学实验教学体会被引量：8
- 2005年
- 为使本科生掌握分子生物学的基本技术,实验室进行了生物化学实验改革,对多个专业的本科生开设部分分子生物学实验,使学生增加了对新技术的认识和理解,提高了综合素质.
- 殷冬梅周亚军王新葛锦涛吴亦英倪衡建
- 关键词：分子生物学实验医学本科生教学体会生物化学实验室
- 遗传性耳聋诱导基因的突变筛选方法及突变检测试剂盒
- 本发明提供一种遗传性耳聋诱导基因的突变检测方法及突变检测试剂盒，检测试剂盒包括基因组DNA抽提体系和PCR反应体系，其中，所述基因组DNA抽提体系包括QIAmp Blood Kit；所述PCR反应体系包括PrimeSTA...
- 刘东巩杰钱佩佩王新
- 非肌性肌球蛋白Ⅱ-B调节斑马鱼咽弓的发育
- 2016年
- 目的探讨非肌性肌球蛋白Ⅱ(NMⅡ)家族基因在斑马鱼胚胎期咽弓的表达及其对咽弓发育的影响。方法通过斑马鱼胚胎整体原位杂交及冷冻切片技术(n=10),观察NMⅡ家族基因在斑马鱼胚胎期咽弓的表达情况。利用软骨的阿辛蓝染色方法,将野生型对照组(n=10)和blebbistatin处理组(每个浓度n=10)的斑马鱼胚胎进行比较,分析NMⅡ对斑马鱼胚胎期咽弓发育和形成的影响。结果受精后72 h(72hpf),NMⅡ-B在斑马鱼发育着的咽弓部位有特异性表达;120 hpf,NMⅡ-B在咽弓表达增加。Blebbistatin特异性抑制NMⅡ-B功能后,斑马鱼咽弓发生明显发育缺陷,部分软骨细胞出现显著形态改变;抑制咽弓形成的作用与blebbistatin浓度呈现剂量依赖效应。结论 NMⅡ-B通过影响咽弓软骨细胞从而调节斑马鱼胚胎期咽弓的发育。
- 王鸿奎王学谦王新袁玮刘东
- 关键词：发育斑马鱼
- 斑马鱼遗传操作进展被引量：2
- 2017年
- 斑马鱼已经成为在发育生物学与疾病模型研究中应用最广泛的实验动物之一,其中多种遗传操作方法和高分辨率活体成像技术对斑马鱼的应用起了重要推动作用。斑马鱼在功能基因组学研究上有许多优势,如可以快速便捷地鉴定脊椎动物新基因的功能。本文尝试以示意图来简要总结应用于斑马鱼的遗传操作方法和基本原理,包括ENU化学诱变筛选的基本原理和隐性突变3代筛选的流程,逆转录病毒介导的插入突变的原理及其隐性突变3代筛选的流程,转座子Sleeping Beauty(SB)和Tol2介导的基因捕获载体系统(Gene-breaking transposon,GBT)为基础的基因捕获突变的基本原理,Morpholino介导的基因下调和micro RNA下调技术,TILLING(Targeting induced local lesions in genomes)技术和CEL1分析的基本原理和实验流程,锌指核酸酶ZFN(Zinc finger nuclease)与TALEN(Transcription activator-like effector nuclease)、CRISPR/Cas9定向基因失活的基本原理,斑马鱼上广泛采用的转基因技术的几种类型等。
- 高煜刘家辉王新刘东
- 关键词：斑马鱼突变转基因转座子
- 斑马鱼Mut-001基因的克隆及胚胎早期发育过程中的表达
- 2015年
- 为了研究斑马鱼Mut-001基因的克隆及其在个体早期发育过程中的时空表达图谱,试验提取斑马鱼胚胎的总RNA制备地高辛标记的Mut-001 RNA反义探针,采用整体胚胎原位杂交(WISH)的方法研究Mut-001基因在斑马鱼早期发育过程中的表达。结果表明:试验成功克隆斑马鱼Mut-001基因并合成Mut-001基因探针,获得Mut-001基因在斑马鱼早期发育过程中的表达情况,Mut-001基因在1 000细胞期(受精后3小时,即3 hpf)、50%外包期(受精后5.3小时,即5.3 hpf)前普遍性表达;受精后14小时(14 hpf)开始在头部、肌节边界及躯干肌肉有特异性表达;受精后24小时(24 hpf)时这些部位表达更明显并在听囊、脊索出现特异性表达;受精后36小时(36 hpf)开始除了在头部和躯干肌肉持续特异性表达外,在胸鳍原基和心脏也开始特异性表达;受精后48小时(48 hpf)时上述部位持续特异性高表达。说明Mut-001基因在早期参与了中枢神经系统与肌肉的发生,在脑部、脊索、肌肉的发育中可能起到了重要作用。
- 吕峰王学谦李丽萍王新刘东
- 关键词：斑马鱼特异性表达
- Non-muscle Myosin Ⅱ-A调节斑马鱼胚胎发育过程中肠内分泌细胞的极化被引量：1
- 2015年
- 胃肠道上皮由包括肠内分泌细胞在内的多种细胞类型组成,其中肠内分泌细胞占胃肠道上皮细胞总量的1%左右。在哺乳动物胚胎发育过程中,肠内分泌细胞位于深层组织,因此很难观察和研究。到目前为止,参与调节肠内分泌细胞形成和更新的分子调控机制仍然很不清楚。Tg（nkx2.2a：m EGFP）转基因斑马鱼品系中GFP表达在发育过程中的肠内分泌细胞,并且在胚胎期斑马鱼通体透明,因此Tg（nkx2.2a：m EGFP）为研究胚胎发育过程中肠内分泌细胞的形成过程及其分子调控提供了良好的模型。该研究发现,斑马鱼肠内分泌细胞形成的关键阶段为受精后48-72 h（hour past fertilization,hpf）,而极化的关键时期为60-72 hpf。斑马鱼中Non-muscle Myosin II-A（NM II-A）对应的两个基因myh9a和myh9b在肠内分泌细胞极化关键阶段的肠上皮表达。在60-70 hpf,利用不同浓度的NM II功能特异性的抑制剂blebbistatin处理Tg（nkx2.2a：m EGFP）斑马鱼胚胎,结果显示：blebbistatin可抑制肠内分泌细胞的极化,并呈现剂量依赖性,随着blebbistatin浓度的增加极化细胞的比例越来越低;提示NM II-A调节斑马鱼胚胎发育过程中肠内分泌细胞的极化。
- 袁玮浦超Rupesh Puri石运伟王新李石营刘东
- 关键词：BLEBBISTATIN极化斑马鱼
