祁小桐
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新型生物活性接骨螺钉材料对成骨细胞生物学行为影响的体外研究
- 2014年
- 目的,研究用于制备新型生物活性接骨螺钉的纳米羟基磷灰石／聚酰胺66／玻璃纤维（nano—hydroxyapatite／polyamide66／glassfiber，n-HA／PA66／GF）对成骨细胞生物学行为的影响，为生物螺钉后期临床应用提供实验依据。方法,制备圆片状n-HA／PA66／GF及其浸提液；取小鼠成骨细胞与n-HA／PA66／GF浸提液共培养，采用直接接触实验观察细胞生长变化情况；MTT实验检测细胞增殖情况；流式细胞仪检测细胞凋亡率；ELISA法测定细胞骨钙素含量；Tran-swell小室实验观察细胞迁移能力；扫描电镜观察细胞黏附和生长情况；细胞免疫荧光检查细胞骨架及肌动蛋白纤维表达。结果,直接接触实验表明，n-HA／PA66／GF对成骨细胞无明显细胞毒性。MTT检测n-HA／PA66／GF浸提液与成骨细胞共培养2，4，6d后，吸光度（A）值分别为0.96±0.14，1.54±0.15，2.39±0.27。结果显示，成骨细胞数量随着培养时间延长而增多（P〈0.05）。流式细胞检测结果证实，n-HA／PA66／GF能使更多成骨细胞进入S期而对细胞凋亡率无明显影响，成骨细胞骨钙素分泌随着共培养时间延长而增多。Transwell实验显示，含浸提液和FBS的α-MEM培养基小室穿过半透膜的细胞数分别为（8.73±3.26）个／视野、（9.47±3.29）个／视野，差异无统计学意义（P〉0.05）。扫描电镜观察n-HA／PA66／GF表面的成骨细胞形态规整，紧紧黏附在材料表面，逐渐呈现复层生长。免疫荧光结果表明，材料浸提液对细胞骨架及肌动蛋白纤维的分布无明显影响。结论,新型生物螺钉n-HA／PA66／GF具有良好的成骨细胞相容性，对细胞生长、增殖、分泌、黏附、周期和骨钙素分泌等均有一定调节作用。
- 苏保蒋电明李吉东安洪邬均祁小桐
- 关键词：细胞生物学成骨细胞
- 内毒素预处理激活大鼠急性脊髓损伤Nrf2蛋白抑制Caspase-3的表达被引量：4
- 2011年
- 目的研究大鼠急性脊髓损伤及经内毒素预处理后损伤脊髓中转录因子Nrf2及凋亡蛋白Caspase-3的表达。方法 SD大鼠132只,随机数字表法分为假手术组、模型组和LPS预处理组。采用改良Allen’s打击法制作SD大鼠急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)模型,在术后1、3、5、7 d进行BBB(basso beattie and bresnahan)评分。在建模后6、12 h、1、3、5、7 d获取损伤段脊髓标本,HE染色观察其组织病理学变化;Nissl染色观察神经元中尼氏小体的变化;免疫组织化学染色定位观察损伤段脊髓中Nrf2和Caspase-3的表达变化规律;Western blot法分析损伤段脊髓中Nrf2表达的变化规律。结果模型组和预处理组术后1、3 d大鼠BBB评分都有明显降低,5、7 d时预处理组BBB评分高于模型组(P<0.05)。6、12、24 h时HE和Nissl染色显示模型组和预处理组脊髓有广泛性出血,大量红细胞渗出,间质性水肿严重,核固缩,神经元数目明显减少,细胞体积变小,尼氏体模糊、碎裂。假手术组大鼠脊髓组织低表达Nrf2及微量表达Caspase-3。3、5、7 d时,与模型组相比,预处理组形态学损伤明显减轻,Nrf2蛋白表达明显增强(P<0.01,P<0.05),凋亡蛋白Caspase-3表达明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论内毒素预处理大鼠在SCI后Nrf2蛋白表达明显增加,抑制凋亡信号Caspase-3的表达,减轻神经元的死亡与损伤,其可能与SCI的病理改变与转归密切相关。
- 李维朝蒋电明朱凤臣祁小桐黄英如
- 关键词：内毒素急性脊髓损伤半胱氨酸蛋白酶-3
- 低剂量脂多糖诱导PC12细胞中Nrf2的表达及其抗ROS作用的实验研究被引量：3
- 2011年
- 目的研究低剂量脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的PC12细胞中核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor-2,Nrf2)的表达及其抗活性氧(reactive oxygen species,ROS)的作用。方法分别以浓度为0.01、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1μg/μl的LPS刺激PC12细胞24 h,MTT法检测细胞活性确立对细胞没有毒性作用的最大安全剂量;采用此剂量刺激PC12细胞,RT-PCR、Western blot检测细胞内Nrf2 mRNA、总蛋白及细胞质、细胞核内Nrf2蛋白的表达;流式细胞仪检测LPS处理8 h细胞内ROS的平均荧光强度。结果 LPS浓度小于0.1μg/μl对细胞没有明显毒性作用(P>0.05);采用0.1μg/μl LPS刺激PC12细胞,24 h内细胞内Nrf2 mRNA及总蛋白表达逐渐升高,其中18 hmRNA及24 h mRNA和总蛋白与空白对照组比较差异显著(P<0.01),12 h内胞质Nrf2蛋白表达先降低后似有恢复趋势,6 h最低(P<0.01),胞核蛋白表达升高,各时相组与空白对照组比较差异显著(P<0.01),3 h达到峰值;0.1μg/μlLPS刺激的8 h,PC12细胞内ROS的平均荧光强度明显减弱(P<0.01)。结论低剂量LPS具有时间依赖性方式促进PC12细胞内Nrf2转录、翻译和核转位的作用,下调细胞内ROS表达水平,并可能藉此参与应激耐受。
- 朱凤臣蒋电明李维朝祁小桐
- 关键词：脂多糖PC12细胞NF-E2相关因子2
- 低剂量LPS对PC12细胞抗氧化能力的影响被引量：2
- 2011年
- 目的：探讨低剂量脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）对PC12细胞抗氧化能力的影响。方法：分别以浓度为0、0.01、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1μg/μl的LPS刺激PC12细胞24小时,MTT法检测细胞活性确立对细胞没有毒性作用的安全剂量;采用安全剂量刺激PC12细胞24小时,收集培养基上清和细胞,采用试剂盒检测上清中的总抗氧化能力（T-AOC）,细胞中超氧化物歧化酶（SOD）的表达,Western blot检测细胞内Bcl-2蛋白的表达;流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）、钙离子（Ca2＋）的平均荧光强度。结果：LPS浓度小于0.1μg/μl对细胞没有明显毒性作用（P〉0.05）;采用0、0.01、0.025、0.05、0.1μg/μlLPS分别刺激PC12细胞24小时,培养上清中T-AOC呈下降趋势,以0.05、0.1μg/μl组明显（P〈0.01）,细胞内SOD呈上升趋势（0.05μg/μl组,P〈0.05;0.1μg/μl组,P〈0.01）,细胞内Bcl-2表达逐渐升高（0.0250.1μg/μl组,P〈0.01）,细胞内ROS呈下降趋势（0.1μg/μl组,P〈0.01）,钙离子未见明显变化（P〉0.05）。结论：低剂量LPS处理PC12 24小时具有剂量依赖性增强细胞抗氧化能力,并可能藉此参与应激耐受。
- 朱凤臣蒋电明祁小桐李维朝
- 关键词：LPSPC12细胞抗氧化能力
- 姜黄素对大鼠急性脊髓损伤的保护作用及机制的初步研究被引量：9
- 2013年
- 目的研究姜黄素对急性脊髓损伤的保护作用及其可能机制。方法采用改良Allen’s打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型,将60只SD雌性大鼠随机平均分为假手术组、模型组、姜黄素低剂量组(40mg/kg,CUR-L组)、姜黄素高剂量组(100mg/kg,CUR-H组),每组各15只。术后7d采用脊髓损伤后后肢运动功能评分系统(BBB法)评测大鼠后肢运动功能;化学比色法检测大鼠脊髓组织中丙二醛(MDA)含量变化;蛋白质印迹(Western blot)及免疫组化检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)蛋白表达;苏木精-伊红(HE)染色观察脊髓组织的病理改变。结果与模型组相比,姜黄素组大鼠后肢功能明显改善;脊髓组织中MDA含量降低;Nrf2、γ-GCS蛋白的表达上调;脊髓组织病理损伤减轻。结论姜黄素对大鼠急性脊髓损伤有保护作用,其机制可能是通过激活Nrf2/抗氧化反应原件(ARE)通路从而上调γ-GCS蛋白表达来实现的。
- 祁小桐蒋电明朱凤臣李维朝黄英如
- 关键词：脊髓损伤姜黄素氧化应激
- 成人股骨上端部分参数测定被引量：2
- 2013年
- 背景:在髋部骨折治疗中,内植物的设计和匹配对实现力学的传导及获得长期稳定具有重要意义。然而由于人种的遗传,生活、工作环境等的影响,从而造成人种股骨参数各异。目的:测定重庆地区成年人股骨上端部分参数。方法:利用游标卡尺实体测量160例重庆地区股骨标本(左右各80例)的股骨头直径、股骨头长径、头颈轴长等5项相关参数,用浩辰CAD软件在影像资料上测量重庆地区成人股骨(男女各80例)上端内、外侧弧度及头颈轴线与股骨外侧皮质夹角。结果与结论:实体测量重庆地区股骨标本得出人股骨头直径为(45.26±3.17)mm;股骨头长径为(39.02±2.58)mm;头颈轴长为(93.23±5.43)mm;股骨颈最小上下颈为(31.28±2.18)mm;股骨颈最小前后径为(26.23±2.10)mm;测量成人股骨影像学资料得出的男性股骨上端内侧弧度为(0.267±0.024)π;男性股骨上端外侧弧度为(0.219±0.019)π;男性头颈轴线与股骨外侧皮质夹角为(130.92±2.31)°;女性股骨上端内侧弧度为(0.278±0.019)π;女性股骨上端外侧弧度为(0.219±0.019)π;女性头颈轴线与股骨外侧皮质夹角为(130.68±2.02)°。实体测量的股骨头直径、股骨头长径、股骨头颈轴长、股骨颈最小前后径和股骨颈最小上下径呈正相关,相关系数为0.246-0.588。软件测量的影像学数据中股骨上端内、外侧弧度无相关性(P>0.05);头颈轴线与股骨外侧皮质夹角和股骨上端内侧弧度呈负相关(r男=-0.446,r女=-0.509,P<0.05),而与股骨上端外侧弧度呈正相关(r男=0.259,r女=0.311,P<0.05)。测得的重庆地区成人股骨上端的部分参数为设计及改良出符合当地髋部骨折的内固定物提供参考依据。
- 巨鹏祁小桐刘晓虎安洪蒋电明
- 关键词：股骨上端髋部骨折
