朱凤臣
- 作品数：8 被引量：26H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Nrf2/ARE转导通路在中枢神经系统疾病中作用的研究进展被引量：1
- 2011年
- 转录因子红细胞系-2p45相关因子2(Nuclear factor erythroid-2p45-related factor 2,Nrf2)是细胞调节抗氧化应激反应的重要转录因子,其与抗氧化反应元件(Antioxidant response element,ARE)结合,调控第Ⅱ相解毒酶及抗氧化酶基因的表达,是机体抵抗内外氧化应激的关键保护性通路。中枢神经系统氧耗高,多不饱和脂肪酸含量丰富,对氧化应激极为敏感,Nrf2/ARE转导通路在中枢神经系统中作用的研究越来越受到重视。本文对Nrf2/ARE转导通路的调控机制及其在中枢神经系统疾病中作用的最新研究进展作一综述。
- 朱凤臣综述蒋电明审校
- 关键词：中枢神经系统氧化应激细胞保护
- 内毒素预处理激活大鼠急性脊髓损伤Nrf2蛋白抑制Caspase-3的表达被引量：4
- 2011年
- 目的研究大鼠急性脊髓损伤及经内毒素预处理后损伤脊髓中转录因子Nrf2及凋亡蛋白Caspase-3的表达。方法 SD大鼠132只,随机数字表法分为假手术组、模型组和LPS预处理组。采用改良Allen’s打击法制作SD大鼠急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)模型,在术后1、3、5、7 d进行BBB(basso beattie and bresnahan)评分。在建模后6、12 h、1、3、5、7 d获取损伤段脊髓标本,HE染色观察其组织病理学变化;Nissl染色观察神经元中尼氏小体的变化;免疫组织化学染色定位观察损伤段脊髓中Nrf2和Caspase-3的表达变化规律;Western blot法分析损伤段脊髓中Nrf2表达的变化规律。结果模型组和预处理组术后1、3 d大鼠BBB评分都有明显降低,5、7 d时预处理组BBB评分高于模型组(P<0.05)。6、12、24 h时HE和Nissl染色显示模型组和预处理组脊髓有广泛性出血,大量红细胞渗出,间质性水肿严重,核固缩,神经元数目明显减少,细胞体积变小,尼氏体模糊、碎裂。假手术组大鼠脊髓组织低表达Nrf2及微量表达Caspase-3。3、5、7 d时,与模型组相比,预处理组形态学损伤明显减轻,Nrf2蛋白表达明显增强(P<0.01,P<0.05),凋亡蛋白Caspase-3表达明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论内毒素预处理大鼠在SCI后Nrf2蛋白表达明显增加,抑制凋亡信号Caspase-3的表达,减轻神经元的死亡与损伤,其可能与SCI的病理改变与转归密切相关。
- 李维朝蒋电明朱凤臣祁小桐黄英如
- 关键词：内毒素急性脊髓损伤半胱氨酸蛋白酶-3
- Nrf2/ARE通路在低剂量LPS处理PC12细胞中的表达及其对脊髓损伤神经元的保护作用研究
- 脊髓损伤(SCI)是危害人类健康的严重疾病，随着社会经济的发展，发病率增长明显。SCI功能缺失主要是由于脊髓神经元轴突和神经元的靶联系信息中断及SCI诱发神经元病理性死亡及凋亡引起的。保护神经元、促进轴突再生是改善SCI...
- 朱凤臣
- 关键词：低剂量LPSPC12细胞脊髓损伤损伤神经元抗氧化机制
- 低剂量脂多糖诱导PC12细胞中Nrf2的表达及其抗ROS作用的实验研究被引量：3
- 2011年
- 目的研究低剂量脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的PC12细胞中核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor-2,Nrf2)的表达及其抗活性氧(reactive oxygen species,ROS)的作用。方法分别以浓度为0.01、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1μg/μl的LPS刺激PC12细胞24 h,MTT法检测细胞活性确立对细胞没有毒性作用的最大安全剂量;采用此剂量刺激PC12细胞,RT-PCR、Western blot检测细胞内Nrf2 mRNA、总蛋白及细胞质、细胞核内Nrf2蛋白的表达;流式细胞仪检测LPS处理8 h细胞内ROS的平均荧光强度。结果 LPS浓度小于0.1μg/μl对细胞没有明显毒性作用(P>0.05);采用0.1μg/μl LPS刺激PC12细胞,24 h内细胞内Nrf2 mRNA及总蛋白表达逐渐升高,其中18 hmRNA及24 h mRNA和总蛋白与空白对照组比较差异显著(P<0.01),12 h内胞质Nrf2蛋白表达先降低后似有恢复趋势,6 h最低(P<0.01),胞核蛋白表达升高,各时相组与空白对照组比较差异显著(P<0.01),3 h达到峰值;0.1μg/μlLPS刺激的8 h,PC12细胞内ROS的平均荧光强度明显减弱(P<0.01)。结论低剂量LPS具有时间依赖性方式促进PC12细胞内Nrf2转录、翻译和核转位的作用,下调细胞内ROS表达水平,并可能藉此参与应激耐受。
- 朱凤臣蒋电明李维朝祁小桐
- 关键词：脂多糖PC12细胞NF-E2相关因子2
- 低剂量LPS对PC12细胞抗氧化能力的影响被引量：2
- 2011年
- 目的：探讨低剂量脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）对PC12细胞抗氧化能力的影响。方法：分别以浓度为0、0.01、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1μg/μl的LPS刺激PC12细胞24小时,MTT法检测细胞活性确立对细胞没有毒性作用的安全剂量;采用安全剂量刺激PC12细胞24小时,收集培养基上清和细胞,采用试剂盒检测上清中的总抗氧化能力（T-AOC）,细胞中超氧化物歧化酶（SOD）的表达,Western blot检测细胞内Bcl-2蛋白的表达;流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）、钙离子（Ca2＋）的平均荧光强度。结果：LPS浓度小于0.1μg/μl对细胞没有明显毒性作用（P〉0.05）;采用0、0.01、0.025、0.05、0.1μg/μlLPS分别刺激PC12细胞24小时,培养上清中T-AOC呈下降趋势,以0.05、0.1μg/μl组明显（P〈0.01）,细胞内SOD呈上升趋势（0.05μg/μl组,P〈0.05;0.1μg/μl组,P〈0.01）,细胞内Bcl-2表达逐渐升高（0.0250.1μg/μl组,P〈0.01）,细胞内ROS呈下降趋势（0.1μg/μl组,P〈0.01）,钙离子未见明显变化（P〉0.05）。结论：低剂量LPS处理PC12 24小时具有剂量依赖性增强细胞抗氧化能力,并可能藉此参与应激耐受。
- 朱凤臣蒋电明祁小桐李维朝
- 关键词：LPSPC12细胞抗氧化能力
- 内毒素耐受的分子机制研究进展被引量：7
- 2010年
- 李维朝蒋电明朱凤臣祁晓桐
- 关键词：内毒素耐受分子机制全身炎症反应综合征革兰氏阴性细菌感染性休克内毒素刺激
- 姜黄素对大鼠急性脊髓损伤的保护作用及机制的初步研究被引量：9
- 2013年
- 目的研究姜黄素对急性脊髓损伤的保护作用及其可能机制。方法采用改良Allen’s打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型,将60只SD雌性大鼠随机平均分为假手术组、模型组、姜黄素低剂量组(40mg/kg,CUR-L组)、姜黄素高剂量组(100mg/kg,CUR-H组),每组各15只。术后7d采用脊髓损伤后后肢运动功能评分系统(BBB法)评测大鼠后肢运动功能;化学比色法检测大鼠脊髓组织中丙二醛(MDA)含量变化;蛋白质印迹(Western blot)及免疫组化检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)蛋白表达;苏木精-伊红(HE)染色观察脊髓组织的病理改变。结果与模型组相比,姜黄素组大鼠后肢功能明显改善;脊髓组织中MDA含量降低;Nrf2、γ-GCS蛋白的表达上调;脊髓组织病理损伤减轻。结论姜黄素对大鼠急性脊髓损伤有保护作用,其机制可能是通过激活Nrf2/抗氧化反应原件(ARE)通路从而上调γ-GCS蛋白表达来实现的。
- 祁小桐蒋电明朱凤臣李维朝黄英如
- 关键词：脊髓损伤姜黄素氧化应激
- 急性脊髓损伤合并内毒素攻击时脊髓内源性锌脂蛋白A20表达
- 2008年
- 目的:研究急性脊髓损伤合并内毒素攻击时小鼠脊髓组织中锌脂蛋白A20的表达规律。方法:将健康昆明种小白鼠225只(雌雄不拘,体重l8～24g)随机分为4组:正常对照组(N组,n=9),单纯尾静脉注射生理盐水0.1ml;脊髓损伤组(A组,n=72),按改良Allen′s法制作T10～T11节段脊髓损伤模型;内毒素组(B组,n=72),不进行脊髓损伤只行尾静脉注射内毒素(5mg/kg)0.1ml;脊髓损伤合并内毒素注射组(C组,n=72),制作脊髓损伤模型后再行尾静脉注射内毒素(5mg/kg)0.1ml。A、B、C组分别于处理后0.5、1、2、4、8、12、24、48h,N组于处理后48h,取T10～T11节段脊髓组织。以HE染色观察脊髓损伤程度,以免疫组化(IHC)、逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分别检测脊髓组织中A20蛋白及mRNA表达。结果:HE染色显示N组和B组各时相点脊髓组织无明显变化;A组打击后0.5h即出现染色质凝聚,染色变深,细胞核偏位、核固缩等现象,神经细胞肿胀,可见片状出血,炎性细胞浸润;至打击8h后可见到核仁消失、核碎裂、核溶解,鬼影细胞现象;C组较A组脊髓损伤更为明显,8h除可见核固缩、碎裂、溶解外,还可见到细胞自溶、空泡形成,并随损伤时间的延长而逐渐加重。IHC显示N组未见A20蛋白阳性表达,A、B组未见或仅有少量A20蛋白阳性表达,C组2h时少量表达,8h表达达高峰。RT-PCR示N组A20 mRNA呈微量表达;A组与N组比较表达升高,与B、C组比较表达高峰延迟,且在12～24h表达高于B、C组;B组在注射内毒素后0.5h,锌脂蛋白A20 mRNA较N组升高明显,1～2h为A20 mRNA表达的高峰期;C组锌脂蛋白A20 mRNA表达最明显,表达高峰在1～8h。结论:在脊髓损伤的早期就出现神经细胞变性死亡的进行性加重,同时伴有锌脂蛋白A20表达增高,合并内毒素注射时尤其明显,锌脂蛋白A20可能对于调控脊髓损伤的炎症反应具有重要意义。
- 朱凤臣蒋电明刘渤
- 关键词：脊髓损伤内毒素
