翟超
- 作品数：10 被引量：26H指数：3
- 供职机构：湖北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金全球变化研究国家重大科学研究计划湖北省教育厅青年基金更多>>
- 相关领域：生物学文化科学理学自然科学总论更多>>
- Massilia eurypsychrophila 709的鉴定、基因组测序及几种多糖水解酶产生情况分析
- 低温酶以其在工业生产中无需额外的能源提升反应体系的温度而受到关注,在造纸,纺织,洗涤及食品加工行业均有应用前景。本研究对中国南极科考队采自极地的136株细菌在低温条件下(20℃)进行底物平板法筛选,发现一株来自于南极阿斯...
- 刘璐汪声晨彭文舫翟超易犁
- 关键词：多糖水解酶基因鉴定基因组测序酶学性质
- 文献传递
- 人鼻病毒3C蛋白酶在大肠杆菌中的表达、纯化及活性分析
- 2018年
- 人鼻病毒3C蛋白酶具有高特异性,且在低温条件下具有较高酶活,目前已被商品化.在大肠杆菌中利用麦芽糖结合蛋白(MBP)作为融合标签可促进人鼻病毒3C蛋白酶的可溶性表达.将人鼻病毒3C蛋白酶的DNA编码序列克隆到pRK792载体上,然后导入到大肠杆菌BL21(DE3),进行诱导表达,获得MBP-LEVLFQGP-6x His-人鼻病毒3C蛋白酶融合蛋白,随后通过Ni柱亲和纯化获得目的蛋白.用该产物切割纯化的MBP-LEVLFQGP-6x His-木聚糖酶融合蛋白,可获得木聚糖酶并用底物平板检测其活性.实验结果表明人鼻病毒3C蛋白酶能够在大肠杆菌中表达,并且能特异性地在其底物识别序列进行切割,从而移除MBP标签,获得仅带有6x His的人鼻病毒3C蛋白酶.该酶可以特异性地去除木聚糖酶融合蛋白中的MBP标签,获得有活性的木聚糖酶.利用MBP标签能够促进人鼻病毒3C蛋白酶可溶性表达,且人鼻病毒3C蛋白酶的活性不受影响,有利于一些不稳定的蛋白在低温下的标签去除和纯化.
- 周瑜徐虎喻婵翟超
- 关键词：木聚糖酶
- 构建定向T载体用于基因克隆和表达被引量：10
- 2013年
- 传统的T载体克隆方法需要烦琐的后续步骤来筛选和鉴定重组子,并且无法实现目的基因的定向克隆。为了克服这些问题,本研究在pET-23a(+)的基础上构建了定向T载体pETG,首先通过定点诱变消除pET-23a(+)上的两个BfuⅠ位点得到PET-23aM;设计一对引物在5端各引入一个BfuⅠ位点,下游引物紧邻BfuⅠ位点引入13 bp的部分LacO序列,用该引物从pHBM2002上扩增Prrn-gfp表达盒,插入PET-23aM的NdeⅠ和XhoⅠ位点,得到定向T载体pETG。PCR扩增的目的基因通过下游引物引入7 bp剩余的LacO序列,该基因片段与BfuⅠ酶切制备的定向T载体连接、转化大肠杆菌DH10β感受态细胞,通过补加了X-gal的平板筛选蓝色重组子。质粒酶切和PCR鉴定表明蓝色菌落全部为定向插入的重组子,重组效率100%,利用本方法成功地定向克隆了103个人类肝蛋白编码基因cDNA,克隆过程无需复杂的步骤筛选鉴定重组子。随机选择了其中的8个基因的克隆进行表达,结果显示8个克隆均在大肠杆菌中获得成功表达。该结果表明定向T载体构建成功,并且该载体非常适合基因的克隆和表达。
- 钟星翟超陈亮余晓岚蒋思婧严红杨登想马立新
- 关键词：TA克隆PCR克隆蛋白质表达
- 聚赖氨酸-聚乙二醇-聚赖氨酸与DNA聚离子复合物胶束的研究被引量：2
- 2004年
- 将聚(Nε-苄氧羰基赖氨酸)-聚乙二醇-聚(Nε-苄氧羰基赖氨酸)(PLL(Z)-PEG-PLL(Z))中的氨基去保护得到两端为聚阳离子的嵌段共聚物聚赖氨酸-聚乙二醇-聚赖氨酸(PLL-PEG-PLL),并对其与DNA结合形成的聚集体的性质进行了研究.结果表明:PLL-PEG-PLL与DNA形成了聚离子复合物胶束;DNA与PLL通过静电作用形成核,PEG包裹在其外面,得到的聚离子复合物胶束为均相体系,即使在化学计量点也不会沉淀,保持着很好的流动性和稳定性,这一点对基因治疗是很重要的;而且随着PLL段的增加,包覆效果更好;聚离子复合物胶束使得DNA具有较强的核酶抗性;大小在10～35nm之间,呈球形;聚离子复合物胶束能够用于基因的传递,使基因在昆虫细胞系SF9中能够表达出蛋白质.
- 杨子刚周芬袁建军马立新翟超程时远
- 关键词：DNA复合物聚赖氨酸胶束聚乙二醇化学计量点
- 基于蛋白内质网滞留的YESS系统在蛋白酶高通量分子改造中的应用
- 蛋白酶作为一种生物催化剂,在生物体内几乎参与催化所有的物质转化过程,与生命活动密切相关。蛋白酶因其独特的催化能力也被广泛应用于工业生物催化和医疗应用等方面。然而天然存在的蛋白酶的活性,特异性以及稳定性并没有达到工业和医疗...
- 梅萌周瑜郑辉彭文舫翟超易犁
- 关键词：蛋白酶
- 文献传递
- 嵌段共聚物PLL-PEG-PLL/DNA复合物胶束被引量：5
- 2004年
- 对复合物胶束PLL PEG PLL/DNA的形态、大小、对核酶抗性和转染效果等进行了测试,结果表明:复合物胶束直径在10～35nm之间,有较强核酶抗性,对昆虫细胞的转染实验获得成功。这些结果对于基因治疗具有重要意义。
- 周芬杨子刚翟超马立新程时远
- 关键词：非病毒载体嵌段共聚物
- PLL-PEG-PLL三嵌段共聚物的制备及DNA包覆应用被引量：1
- 2005年
- 将PLL(Z)-PEG-PLL(Z)中的氨基去保护得到两端为聚阳离子的嵌段共聚物PLL-PEG-PLL,并对与DNA结合形成的聚集体的性质进行了研究.结果表明:PLL-PEG-PLL与DNA在水相中形成了聚离子复合物胶束;DNA与PLL通过静电作用形成核,PEG包裹在外面,得到的聚离子复合物胶束为均一体系,即使在化学计量点也不会沉淀,保持着很好的流动性和稳定性,这一点对基因治疗是很重要的;而且随着PLL段的增加,包覆效果更好;聚离子复合物胶束使得DNA具有较强的核酶抗性; 大小在10～35 nm之间,主要呈球形;聚离子复合物胶束能够用于基因的传递,使基因在细胞系SF9中表达出蛋白质.
- 杨子刚周芬袁建军马立新翟超程时远
- 关键词：聚赖氨酸嵌段共聚物DNA
- 中学生物学课程思政建设案例的探索
- 2022年
- 随着生物学科的发展和高考改革,中学生物课程受到越来越多的重视。根据普通高中生物学课程标准(2017版,2020年修订),本文挖掘了几个思政理念与生物学课程融合的典型案例,展示如何通过中学生物课程来培养青少年的“生命观念、科学思维、科学探究和社会责任”等核心素养,希望为中学生物学教学与课程思政的结合提供一些参考意见。
- 王飞孙凤翟超
- 关键词：中学生物课程
- 耐热羧肽酶Taq基因在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2014年
- 为了获取表达羧肽酶Taq毕赤酵母工程菌,通过密码子优化,依据毕赤酵母密码子偏爱性,在体外合成了栖热水生菌的耐热羧肽酶Taq基因。将该基因克隆到毕赤酵母表达载体p HBM905A上并引入6×His标签,构建了重组质粒p HBM905A-Cpase Taq。将该重组质粒转化毕赤酵母GS115,经1%甲醇诱导表达72 h,酶产量达0.1 mg/m L。对纯化的重组酶进行酶活性分析表明在75℃,p H为7.5时,该酶比酶活性为80 U/mg。本研究首次证明了羧肽酶Taq能在毕赤酵母中有效分泌表达,可以被大量制备,进而为多肽水解为氨基酸奠定工业基础。
- 余先红汪晓娟钟星唐微翟超陈晚苹马立新
- 关键词：密码子优化毕赤酵母纯化
- 研究生《基因工程原理》课程的教学改革初探被引量：7
- 2018年
- 基因工程是对遗传物质进行体外重组,并导入到受体细胞中,从而使生物体产生新表型的技术,它是生物学研究的前沿之一。《基因工程原理》主要讲解DNA、RNA和蛋白质等生物大分子的实验方法、基因克隆重组技术、基因表达及应用等,内容涉及到生命科学研究实验中常用的技术,因此《基因工程原理》是生物学专业研究生必需掌握的基础课程。在本文中,我们从教学内容和课件的准备、授课方法以及考核方法等几个方面对研究生《基因工程原理》课程的教学改革进行了初步的探索。
- 翟超杨艳燕
- 关键词：基因工程教学改革
