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一种猴头菇子实体植入马铃薯的营养全粉及其生产方法: 本发明提出了一种猴头菇子实体植入马铃薯的营养全粉及其生产方法，生产步骤为：猴头菇接种培养、马铃薯洗净、除杂、去除马铃薯皮层、马铃薯切片、灌装、灭菌、混合接种培养、低温刺激培养、干燥粉碎等工序即得到猴头菇植入马铃薯的营养全...; 钟星李皓盛希群杨登想林斯雨肖锋彦孙茹杰; 文献传递

熊果苷合成酶固定化条件研究: 2021年; 将转化至Escherichia coli BL21 Gold(DE3)中aglA基因的质粒表达葡萄糖苷酶用以催化生产α-熊果苷。再利用超声波破碎技术和镍离子层析柱提取并纯化转葡萄糖苷酶,并将其用海藻酸钠-明胶混合固定,使其可重复使用。确定最佳的固定化条件,即将3.0%海藻酸钠和3.0%明胶配制溶解于pH 7的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液的混合胶体,在高度45 cm左右进行滴定4℃预冷的300 g/L氯化钙溶液并固定化20 min。冲洗后进行50 min的-20℃钙化操作,获得直径为3.97 mm、质量为0.311 g的固定化珠。; 李皓盛希群刘静钟星; 关键词：固定化

抗KOD聚合酶单克隆抗体的制备(英文): 2010年; 单克隆抗体具有高度的均一性和专一性。抗KOD聚合酶单克隆抗体，可以特异性结合于KOD聚合酶，抑制PCR反应前常温状态下的多聚酶活性，显著提高PCR反应的特异性。为了提高KOD聚合酶PCR反应的特异性，以KOD聚合酶为抗原，制备了两株抗KOD聚合酶的单克隆抗体。以大肠杆菌表达的重组蛋白KOD聚合酶为抗原免疫BALB／c小鼠，然后将免疫小鼠的脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，通过HAT选择培养、ELISA检测和有限稀释法克隆，建立了2株能稳定分泌抗KOD聚合酶单克隆抗体的杂交瘤细胞，分别命名为1F5与3G6，对应的抗体亚型分别是IgGl和IgG2a。染色体计数结果分别是85～90和83～86。1F5与3G6的细胞上清和腹水的ELISA效价分别为1：2^8，1：2^9和1：2^11，1：2^11。间接免疫荧光证实制备的单克隆抗体的特异性良好。该结果为进一步建立高特异性的PCR方法奠定了良好的基础。; 余晓岚李玉王飞钟星陈亮马立新; 关键词：单克隆抗体 ELISA检测

构建定向T载体用于基因克隆和表达被引量：10: 2013年; 传统的T载体克隆方法需要烦琐的后续步骤来筛选和鉴定重组子,并且无法实现目的基因的定向克隆。为了克服这些问题,本研究在pET-23a(+)的基础上构建了定向T载体pETG,首先通过定点诱变消除pET-23a(+)上的两个BfuⅠ位点得到PET-23aM;设计一对引物在5端各引入一个BfuⅠ位点,下游引物紧邻BfuⅠ位点引入13 bp的部分LacO序列,用该引物从pHBM2002上扩增Prrn-gfp表达盒,插入PET-23aM的NdeⅠ和XhoⅠ位点,得到定向T载体pETG。PCR扩增的目的基因通过下游引物引入7 bp剩余的LacO序列,该基因片段与BfuⅠ酶切制备的定向T载体连接、转化大肠杆菌DH10β感受态细胞,通过补加了X-gal的平板筛选蓝色重组子。质粒酶切和PCR鉴定表明蓝色菌落全部为定向插入的重组子,重组效率100%,利用本方法成功地定向克隆了103个人类肝蛋白编码基因cDNA,克隆过程无需复杂的步骤筛选鉴定重组子。随机选择了其中的8个基因的克隆进行表达,结果显示8个克隆均在大肠杆菌中获得成功表达。该结果表明定向T载体构建成功,并且该载体非常适合基因的克隆和表达。; 钟星翟超陈亮余晓岚蒋思婧严红杨登想马立新; 关键词：TA克隆 PCR克隆蛋白质表达

一种猴头菇子实体植入马铃薯的营养全粉及其生产方法: 本发明提出了一种猴头菇子实体植入马铃薯的营养全粉及其生产方法，生产步骤为：猴头菇接种培养、马铃薯洗净、除杂、去除马铃薯皮层、马铃薯切片、灌装、灭菌、混合接种培养、低温刺激培养、干燥粉碎等工序即得到猴头菇植入马铃薯的营养全...; 钟星李皓盛希群杨登想林斯雨肖锋彦孙茹杰

中性蛋白酶在海藻酸钠和壳聚糖中的固定化研究被引量：2: 2016年; 以天然无毒海藻酸钠、壳聚糖为固定化载体材料,以戊二醛为交联剂,选用包埋交联法对中性蛋白酶进行固定化研究,并对固定化条件进行了优化,测定了固定化酶的部分酶学性质。通过单因素试验和正交试验确定了该固定化酶的最佳条件参数:壳聚糖浓度为2%,海藻酸钠浓度为2%,冰醋酸浓度为1%,CaCl2浓度为3%,戊二醛浓度为0.75%,固定化时间为18h,pH为8.0。,该条件下固定化酶酶活回收可达92.91%;固定化酶的最适pH为6.9,最适温度为51℃。相对于游离酶,固定化酶便于分离回收,同时增加了利用效率,有效的降低了生产成本,具备较好的经济效益和研究价值。; 李皓钟星张辉刘齐; 关键词：壳聚糖海藻酸钠中性蛋白酶固定化

CRISPR/dCas9系统在活细胞成像领域的研究进展: 2021年; 研究不同基因、染色体以及基因与染色体之间的时空关系在遗传学、发育生物学和生物医学等领域具有重要意义。CRISPR/Cas9基因编辑技术具有优异的靶向性,已经成为应用最广泛的基因编辑工具。近年来,研究人员基于Cas9的核酸酶失活突变体dCas9发展了一系列先进的活细胞成像技术,为染色质、基因组特定位点的高分辨成像提供了快速、方便的研究工具。文中从细胞递送方式、荧光信号优化以及正交多色成像3个方面对CRISPR/dCas9系统在活细胞成像中的研究进展进行了综述,并对该领域的发展趋势进行了展望。; 林斯雨钟星马立新乔洁刘奕

耐热羧肽酶Taq基因在毕赤酵母中的表达被引量：1: 2014年; 为了获取表达羧肽酶Taq毕赤酵母工程菌,通过密码子优化,依据毕赤酵母密码子偏爱性,在体外合成了栖热水生菌的耐热羧肽酶Taq基因。将该基因克隆到毕赤酵母表达载体p HBM905A上并引入6×His标签,构建了重组质粒p HBM905A-Cpase Taq。将该重组质粒转化毕赤酵母GS115,经1%甲醇诱导表达72 h,酶产量达0.1 mg/m L。对纯化的重组酶进行酶活性分析表明在75℃,p H为7.5时,该酶比酶活性为80 U/mg。本研究首次证明了羧肽酶Taq能在毕赤酵母中有效分泌表达,可以被大量制备,进而为多肽水解为氨基酸奠定工业基础。; 余先红汪晓娟钟星唐微翟超陈晚苹马立新; 关键词：密码子优化毕赤酵母纯化

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钟星