肖晓桃
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 酸性成纤维细胞因子基因体外转染肌卫星细胞被引量：1
- 2013年
- 背景:研究报道外源性酸性成纤维细胞生长因子既可调节肌卫星细胞增殖和分化,又具有预防运动终板退变及肌萎缩的作用。目的:通过酸性成纤维细胞因子基因转染大鼠骨骼肌卫星细胞,检测目的基因转染肌卫星细胞效果及基因表达情况,探讨建立有效预防运动终板退变及肌萎缩种子细胞可行性。方法:取Wistar成年大鼠后肢肌肉,差速贴壁培养法分离纯化肌卫星细胞,观察细胞生长特性并做免疫组织化学鉴定;取第2代细胞,LipofectamineTM2000Reagent转染试剂介导,将重组真核表达质粒pEGFP-N1-aFGF转染肌卫星细胞为实验组;阴性对照组转染空载质粒pEGFP-N1;空白对照组仅加入转染试剂。转染后24-72h和传代后分别用倒置荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白表达情况,计算转染效率。转染细胞行WesternBlot检测酸性成纤维细胞因子表达。提取转染后72h细胞总RNA,实时荧光定量PCR检测酸性成纤维细胞因子基因mRNA表达。结果与结论:分离纯化细胞经免疫组织化学鉴定为肌卫星细胞。荧光显微镜观察到细胞转染6h后即有绿色荧光发出,荧光强度和表达细胞总数在72h达到高峰,传代后仍可观察到绿色荧光蛋白表达。实时荧光定量PCR证实目的基因mRNA表达水平远远高于对照组,WesternBlot检测实验组有大量酸性成纤维细胞因子产生。提示酸性成纤维细胞基因转染肌卫星细胞可表达基因产物,有望作为基因工程种子细胞预防失神经支配后运动终板退变及肌萎缩。
- 杨绍安蔡进奎周初松肖晓桃肖莎邹晓英
- 关键词：酸性成纤维细胞生长因子基因肌卫星细胞转染运动终板失神经支配
- 不同长度聚乳酸膜小间隙缝合修复大鼠腓总神经损伤被引量：4
- 2016年
- 目的探讨不同长度小间隙缝合修复周围神经损伤的效果。方法2014年9月至2015年4月，SD大鼠40只，切断右侧腓总神经，按实验方法随机分为4组：采用聚乳酸膜缝合腓总神经断端，使神经断端间分别留有0、1、2、3mm间隙（分别为N、E1、E2、E3组）。术后观察大鼠踝关节及足趾背屈活动的恢复情况，记录恢复时间；术后6周观察再生神经解剖形态，测量双侧小腿前外侧肌群肌肉湿重，再生神经行苏木精-伊红（HE）染色、免疫组织化学检查等评价神经再生效果。结果N组平均25d恢复踝关节及足趾背屈运动，而E1、E2、E3组则分别为16、22及30d恢复踝关节及足趾背屈活动。术后6周各组大鼠小腿前外侧肌群肌肉湿重比结果由多到少为E1组（0．91±0．08）、E2组（0．83±0．09）、N（0．62±0．12）组、E3（0．54±0．11）组，差异有统计学意义（P〈0．05）。镜下见：E1组再生神经较光滑，神经远段直径基本正常；E2组再生神经欠光滑，神经远段直径稍变细；E3组再生神经明显膨大，神经远段明显变细；N组再生神经膨大，神经远段变细。HE染色、S-100蛋白免疫组化观察发现：E1组再生神经纤维排列有序整齐，神经纤维粗大，许旺细胞数量多，髓鞘清晰可见；E2组再生神经纤维排列较有序，神经纤维较粗大，许旺细胞数量较多，髓鞘较清晰：E3组再生神经纤维呈膨胀性生长，神经卷曲成团，排列明显紊乱，远段再生神经直径最小，且许旺细胞数目最少，髓鞘模糊不清；N组再生神经纤维较紊乱，神经纤维直径较细，许旺细胞数量少，髓鞘不明显。测量再生神经纤维数（根／mm2）由多到少为：E1组（343．7±24．5）、E2组（300．2±12．9）、N组（249．9±25．9）、E3组（170．7±34．9），组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论小间隙缝合法修复周围神经损伤效果优于无问隙缝
- 徐成毅杨绍安曹军杨潇肖晓桃张玉娴
- 关键词：腓总神经神经再生
