薛天阳
- 作品数:92 被引量:150H指数:6
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- 载体介导的RNA i技术对HL-60细胞端粒酶逆转录酶基因表达和细胞增殖的影响
- 2011年
- 目的探讨由载体介导的靶向端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的RNA i技术对人类髓系白血病HL-60细胞hTERT基因表达和细胞增殖的影响。方法用表达针对hTERT基因siRNA的质粒载体转染HL-60细胞,以转染后24、72、120 h细胞组作为3个实验组,以空质粒组、转染试剂组及空白对照组作为3个对照组,RT-PCR法检测HL-60细胞hTERT基因mRNA的表达,MTT法检测HL-60细胞增殖活性。结果转染后24、72、120 h组HL-60细胞hTERT基因mRNA相对表达水平分别为0.31±0.08、0.28±0.05、0.32±0.06,质粒组、转染试剂组、空白对照组分别为0.55±0.13、0.49±0.08、0.58±0.19,3个实验组HL-60细胞hTERT mRNA表达水平低于3个对照组,差异有显著性(P<0.05),3个实验组组间比较差异无显著性(P>0.05),3个对照组间表达水平比较差异无显著性(P>0.05);24、72、120 h实验组细胞增殖活性抑制率分别为(23.7±4.0)%、(35.1±5.9)%、(29.6±3.8)%,质粒组分别为(3.7±0.8)%、(2.1±0.5)%、(2.7±0.9)%,转染试剂组分别为(4.0±1.8)%、(2.6±1.3)%、(2.2±1.1)%,空白对照组均为0,3个实验组HL-60细胞增殖活性抑制率明显高于各对照组,差异有显著性(P<0.05),3个实验组及组间比较差异无显著性(P>0.05),3个对照组组间比较差异无显著性(P>0.05)。结论载体介导的靶向hTERT基因的RNA i技术能在体外抑制HL-60细胞hTERT基因的表达,细胞增殖活性受抑制。
- 高吉照徐鑫薛天阳许伟万才水
- 关键词:端粒酶逆转录酶RNA干扰基因表达增殖活性
- 不同剂量四氢叶酸钙对大剂量甲氨蝶呤化疗大鼠肠黏膜的保护作用被引量:4
- 2008年
- 目的探讨不同剂量四氢叶酸钙(CF)对大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)化疗大鼠肠黏膜的保护作用。方法6周龄Wistar大鼠60只随机分为5组,每组12只。A组:正常对照组,腹腔注射9g/L盐水;B组:1%CF解救组(即CF解救剂量为MTX总量的1%,下同);C组:2%CF解救组;D组:8%CF解救组;E组:空白对照组,不予CF解救。B~E组均腹腔注射MTX(120mg/kg),B~D组于腹腔注射MTX12h后肌注CF解救,1次/6h,共7次。于最后一次肌注CF18h后杀死大鼠,取其空肠标本观察形态,切片观察测定绒毛长度隐窝深度。结果A组肠壁厚弹性好,绒毛密集、排列整齐;B~E组肠壁充血水肿变薄,小肠绒毛变短,隐窝深度变浅。E组最重,B组次之。B~E组与A组比较有统计学差异(Pa<0.05);C、D与B、E组比较有统计学差异(Pa<0.05);C、D组比较无统计学差异(P>0.05)。结论MTX可致大鼠黏膜损害,CF解救可减轻其黏膜损害,过度降低CF解救剂量达不到解救目的。
- 崔永忠薛天阳许伟高吉照
- 关键词:甲氨蝶呤四氢叶酸钙WISTAR大鼠肠黏膜
- 急性淋巴细胞白血病小鼠甲氨蝶呤化疗后血及脑组织药物浓度的对比研究
- 2010年
- 目的 探索急性淋巴细胞白血病小鼠不同剂量甲氨蝶呤(MTX)化疗后血和脑组织药物浓度的关系.方法 4周龄清洁级普通昆明小鼠80只:建立急性淋巴细胞白血病小鼠模型,随机抽取20只小鼠经股骨取骨髓行骨髓细胞学检查作模型验证;依据MTX化疗剂量与标本采取时间点的不同将余60只急性淋巴细胞白血病小鼠分为六组,每组10只,分别为A、B、C、D、E、F组;各组均取0.5ml血液及0.4 g脑组织,血液离心,脑组织匀浆后离心,取上清用荧光偏振免疫方法 检测药物浓度.结果 A、B、C、D、E、F六组平均MTX血药浓度分别为(39.08±5.18)μmol/L、(15.86±1.02)μmol/L、(8.67±5.43)μmol/L、(68.29±5.19)μmol/L、(29.55±6.22)μmol/L、(13.98±1.12)μmol/L,组间比较差异有统计学意义(P〈0.05);各组脑组织平均MTX浓度依次为:(1.05±0.26)μmol/L、(0.61±0.25)μmol/L、(0.48±0.25)μmol/L、(2.07±0.35)μmol/L、(1.27±0.21)μmol/L、(0.59±0.69)μmol/L,组间比较差异有统计学意义(P〈0.05);六组血与脑组织药物浓度相关系数依次为:0.82、0.75、0.19、0.81、0.55、0.43.结论 急性淋巴细胞白血病小鼠经大剂量MTX(HD-MTX)方案化疗后,于0.5 h出现血及脑组织药物浓度峰值,5g/m^2较3g/m^2能更好地透过血脑屏障使脑组织药物浓度达到有效治疗浓度.
- 金明卫薛天阳许伟高吉照
- 关键词:白血病淋巴细胞急性甲氨蝶呤血药浓度
- 不同时间四氢叶酸解救大剂量甲氨蝶呤化疗大鼠肠黏膜损害的观察
- <正>目的:观察不同时间四氢叶酸解救大剂量甲氨蝶呤化疗大鼠肠粘膜组织形态学的改变,探讨四氢叶酸解救大剂量甲氨蝶呤化疗适宜时机。方法:应用H-E染色方法。6周龄Wister大鼠随机分五组,A组:腹腔注射生理盐水;B组:腹腔...
- 李清峰薛天阳许伟高吉照
- 文献传递
- 儿童人附红细胞体病1例报道并文献复习被引量:4
- 2013年
- 附红细胞体病(Eperythrozoonosis)是较少见的人畜共患病传染病,其系附红细胞体(Eperythrozoon)感染所致。研究表明该病原菌为条件致病菌[1],易感染抵抗力较低的人群,故儿童可能为该病原菌的易感人群,本文将我科收治的1例儿童人附红细胞体病进行报道,可为临床儿童附红细胞体病的诊断和治疗提供一定的参考和依据。1临床资料患儿,男,6岁,主因"间断发热2月伴肝脾肿大、肝功能异常"入院。患儿入院前2月前无明显诱因出现发热,体温最高达39.0℃,热前无寒战。
- 孙静薛天阳许伟高吉照
- 关键词:儿童附红细胞体病
- 四氢叶酸钙对大剂量甲氨蝶呤化疗大鼠肠黏膜保护作用的研究
- 2009年
- 目的探讨不同剂量和时间四氢叶酸钙(calcium5-formyltetrahydrofolate,CF)对大剂量甲氨蝶呤(high-dose methotrexate,HDMTX)化疗大鼠肠黏膜的保护作用。方法实验分两部分,均分5组,设正常对照组(A组,腹腔注射生理盐水),和空白对照组(B组,腹腔注射MTX,不予CF解救)。第一部分:不同剂量CF对HDMTX化疗大鼠肠黏膜的保护作用。C组:1%CF解救组;D组:2%CF解救组;E组:8%CF解救组(百分数为CF总量占MTX的百分比)。C、D、E组腹腔注射MTX,于注射后12h肌注CF,A、B组肌注生理盐水,6小时一次,共7次。第二部分:不同时间CF对HDMTX化疗入鼠肠黏膜的保护作用,C组:12h解救组;D组:24h解救组;E组:30h解救组。C、D、E组腹腔注射MTX。C、D、E组分别于腹腔注射HDMTX后12、24、30h予肌注CF,CF总剂量为MTX的5%;A、B组于腹腔注射后24h分别肌注生理盐水,各组均6小时一次,共7次。于腹腔注射后78h处死存活大鼠,取空肠标本观察形态,测定绒毛长度和隐窝深度。结果两部分均A组肠壁厚弹性好,绒毛密集、排列整齐,B、C、D、E组肠壁充血水肿变薄,和A组比较,小肠绒毛变短,隐窝深度变浅,差异有统计学意义(P<0.05);第一部分B、C组改变较D、E组更明显(P<0.05);C组与B组比较差异无统计学意义(P>0.05);D组与E组比较差异无统计学意义(P>0.05)。第二部分B、E组改变较C、D组更显著(P<0.05);B组与E组比较差异无统计学意义(P>0.05);C组与D组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论CF对HDMTX所致大鼠肠黏膜损害有保护作用;其保护作用存在剂量和时间依赖性。
- 高吉照薛天阳许伟崔永忠李清峰
- 关键词:甲氨蝶呤四氢叶酸钙肠黏膜
- 苦参碱联合顺铂对人横纹肌肉瘤RD细胞中X-连锁凋亡抑制蛋白表达的影响
- 李丽薛天阳
- 载体介导的RNA干扰技术对人类髓系白血病HL-60细胞端粒酶反转录酶基因、蛋白表达和凋亡的影响
- 2011年
- 目的探讨由载体介导的靶向端粒酶反转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)技术对白血病HL-60细胞hTERT基因、蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法用已经构建好的表达针对hTERT基因siRNA的质粒载体经转染试剂RNAi-Mate转染HL-60细胞;以转染后24 h、72 h、120 h细胞作为实验组,以空质粒、转染试剂及空白组作对照,采用反转录-PCR(RT-PCR)检测细胞hTERT基因mRNA表达,Western blot检测细胞hTERT蛋白表达,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡。结果转染后24 h、72 h、120 h实验组HL-60细胞hTERT基因mRNA相对表达水平分别为0.31±0.08、0.28±0.05、0.32±0.06,质粒组、转染试剂组、空白对照组分别为0.55±0.13、0.49±0.08、0.58±0.19;24 h、72 h、120 h实验组蛋白相对表达水平分别为0.47±0.09、0.32±0.07、0.51±0.08,质粒组、转染试剂组、空白对照组分别为0.75±0.11、0.76±0.15、0.73±0.14;24 h、72 h、120 h实验组,质粒组,转染试剂组,空白对照组凋亡率分别为(11.95±3.61)%、(14.61±2.97)%、(12.82±3.01)%、(4.25±2.16)%、(5.09±1.97)%、(3.76±1.84)%。24 h、72 h、120 h实验组hTERT mRNA、蛋白表达水平均低于各对照组(Pa<0.05),细胞凋亡率高于各对照组(Pa<0.05),hTERT mRNA、蛋白表达水平、细胞凋亡率实验组组间比较差异均无统计学意义(Pa>0.05);质粒组、转染试剂组hTERT mRNA、蛋白表达水平、细胞凋亡率与空白对照组比较差异均无统计学意义(Pa>0.05)。结论载体介导的靶向hTERT基因的RNAi技术能在体外抑制HL-60细胞hTERT基因和蛋白的表达,增加细胞凋亡。
- 高吉照徐鑫薛天阳许伟万才水
- 关键词:端粒酶反转录酶RNA干扰蛋白表达凋亡
- 苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖和凋亡的影响被引量:9
- 2012年
- 目的探讨苦参碱(matrine,Mat)对体外人横纹肌肉瘤RD细胞增殖和凋亡的影响,以及Mat诱导RD细胞凋亡的相关机制。方法采用MTT比色法检测终浓度为0.5、1.0、1.5和2.0 mg/mL Mat对RD细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测上述4种不同浓度Mat对RD细胞的凋亡作用;RT-PCR法检测终浓度为0.5、1.0和1.5 mg/mL Mat对RD细胞Cyclin D1及Survivin mRNA表达的影响。结果各浓度实验组RD细胞的增殖抑制率和凋亡率均高于未经Mat处理的对照组(均P<0.01),且随着药物浓度增加,细胞增殖抑制率逐渐增高,呈剂量依赖性。RT-PCR检测Cyclin D1及Survivin mRNA在各组RD细胞中均有表达,两者的表达水平在各浓度处理组中与对照组相比均有明显下降(P<0.01)。其中Cyclin D1在各浓度组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),而Survivin仅在0.5 mg/mL和1.5 mg/mL组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Mat能明显抑制RD细胞的增殖,并诱导其凋亡;其抗肿瘤机制可能与下调Survivin和Cyclin D1 mRNA的表达有关。
- 郭雷薛天阳许伟高吉照
- 关键词:苦参碱横纹肌肉瘤SURVIVINCYCLIND1
- PDTC逆转K562/AO_2细胞多药耐药性机制研究
- 2010年
- 目的研究核因子κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)逆转K562/AO2细胞耐药效应及其机制。方法采用MTT比色法分别检测K562/AO2细胞的耐药性、PDTC对K562/AO2细胞增殖的影响以及非细胞毒剂量PDTC、维拉帕米(Ver)预作用后K562/AO2细胞药物敏感性的变化,采用免疫细胞组织化学法、RT-PCR检测K562、K562/AO2细胞NF-κB、mdr-1 mRNA表达水平以及PDTC作用一定时间对其影响。结果①K562/AO2细胞对阿霉素(ADM)的耐药性是K562细胞的59倍;非细胞毒剂量PDTC预作用后,ADM对K562/AO2细胞的半数抑制浓度(IC50)显著降低,相对逆转耐药效率为93.03%,强于经典耐药逆转剂Ver的作用81.07%(P<0.01);②K562/AO2细胞NF-κB表达水平高于K562细胞(P<0.01);PDTC可有效抑制K562/AO2细胞NF-κB表达,伴随mdr-1 mRNA表达减少,呈时间依赖性。结论抑制NF-κB异常活化可部分逆转K562/AO细胞耐药性,其机制与mdr-1 mRNA转录表达减少有关。
- 杨婷婷薛天阳许伟
- 关键词:吡咯烷二硫代氨基甲酸盐核因子ΚB多药耐药MDR-1基因