计永莉
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 供职机构：兰州生物制品研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳中LPS样品制备方法的改进被引量：2
- 2007年
- 为了对革兰阴性细菌的LPS进行快速分析,观察LPS的产量、分子量分布,进行菌种筛选和抗原传代稳定性研究,实验中对热酚法、酶水解法、冷酚法三种制备LPS的方法进行了比较。结果证明,改进的水饱和冷酚LPS提取方法,需要时间短、经济、方便,只须几个细菌菌落就可以提取LPS进行SDS-PAGE电泳分析,说明该方法有很好的实用性。
- 杨朝晖计永莉周园王军赵志强
- 关键词：脂多糖SDS-PAGE抽提
- 鼠伤寒结合疫苗研制的初步探讨被引量：2
- 2006年
- 通过对鼠伤寒沙门菌LH株的发酵培养,热酚水法提取脂多糖LPS,1%乙酸沸水浴水解90m in脱毒,Super-dex 200柱层析,收集第一峰为鼠伤寒O-SP抗原;然后用CDAP对O-SP活化、ADH衍生后,在EDAC的缩合作用下,结合到破伤风类毒素TT上,制备出鼠伤寒结合疫苗;用含2.5μg多糖鼠伤寒结合疫苗免疫小鼠,以2.5μgO-SP多糖生理盐水溶液以及生理盐水溶液为对照组,间隔14天,免疫三针;以LPS为包被抗原,用间接ELISA法测定血清中抗鼠伤寒LPS IgG抗体。鼠伤寒结合疫苗三针免疫后,小鼠血清抗鼠伤寒LPS IgG抗体效价达到1:80以上的比例为84.2%,而总的几何平均滴度(GMT)达到796;说明制备的鼠伤寒结合疫苗有良好的免疫原性,而且鼠伤寒结合疫苗在小鼠和豚鼠体内有良好的安全性。
- 杨朝晖赵志强计永莉马庆华杜琳谢贵林
- 关键词：鼠伤寒沙门菌结合疫苗免疫原性
- 甲型副伤寒结合疫苗的制备及其免疫原性研究被引量：9
- 2006年
- 目的研制预防沙门菌属A组甲型副伤寒沙门菌感染的多糖蛋白结合疫苗。方法通过对甲型副伤寒沙门菌尼泊尔株NTP-6的发酵培养,热酚水法提取脂多糖(LPS),酸水解脱毒,纯化出有效的型特异O-SP抗原；然后用CDAP对O-SP活化、ADH衍生后,在EDAC的缩合作用下,结合到破伤风类毒素TT上,制备出甲型副伤寒结合疫苗。用含2．5μg多糖甲型副伤寒结合疫苗免疫小鼠,以LPS为包被抗原,用间接ELISA法测定血清抗甲型副伤寒LPS IgG抗体；并测定血清多糖抗体的补体介导杀菌活性；在小鼠和豚鼠体内观察甲型副伤寒结合疫苗的安全性。结果甲型副伤寒结合疫苗第2次免疫NIH后,小鼠血清抗甲型副伤寒LPS IgG抗体平均几何滴度(GMT)均较第1次有4倍以上升高,第3次免疫后,有明显的加强效应；抗体的补体介导杀菌活性效价达1：1280以上；小鼠和豚鼠体内甲型副伤寒结合疫苗安全性良好。结论成功建立了甲型副伤寒结合疫苗的制备工艺；制备的甲型副伤寒结合疫苗有良好的免疫原性,并具有明显的加强效应；刺激的血清多糖抗体有较高的补体介导杀菌活性效价；安全性达到人用生物制品相关要求。
- 赵志强杨朝晖计永莉杜琳谢贵林
- 关键词：甲型副伤寒沙门菌结合疫苗免疫原性
- 液相色谱-ELISA测定结合疫苗中游离蛋白含量可行性的初步探讨被引量：1
- 2008年
- 用适宜分离范围的色谱柱,预先确定细菌多糖蛋白结合疫苗载体蛋白的洗脱峰出峰时间;然后将细菌多糖-蛋白结合疫苗用相同条件进行分离,分部收集各洗脱峰并直接包被酶标板,与适宜浓度的载体蛋白特异抗体反应后,加入酶标二抗测定各洗脱峰样品中载体蛋白的吸光值;把载体蛋白出峰后的吸光值总和计为游离载体蛋白质吸光值;以游离载体蛋白吸光值占所有洗脱峰吸光值的比例计算游离载体蛋白含量。以伤寒Vi结合疫苗(载体蛋白rEPA)和甲型副伤寒结合疫苗(载体蛋白为TT)作为实验材料探讨方法的可行性。结果说明,该方法具有较好的特异性和敏感度。
- 谭小梅杨朝晖周园赵志强张萍刘月萍计永莉杜琳谢贵林
- 关键词：结合疫苗ELISA液相色谱
