邓菊
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：广州医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- MiR-499促进MSCs心肌样细胞分化及其机制的初步探讨被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨miR-499体外是否能诱导大鼠骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化,并验证其是否通过靶作用于结肠腺瘤样息肉(APC)调控WNT信号通路发挥作用。方法:在MSCs中过表达miR-499后,Q-RT-PCR检测心肌特异性基因GATA4、Nkx2.5、cTnI及miR-499及其靶基因APC的表达情况,双荧光素酶报告系统验证靶基因APC。结果:niR-499、GATA4、Nk2.5、cTnI表达明显上调(P<0.05),但APC表达无明显差异(P=0.3);双荧光素酶报告系统结果显示与转染空载体组比较荧光素酶活性无明显变化(P=0.37);结论:miR-499可促进MSCs向心肌样细胞分化,但不通过靶作用于APC发挥促分化作用。
- 邓菊区彩文张建武吴智业刘启才陈敏生
- 关键词：MICRORNA骨髓间充质干细胞心肌样细胞WNT信号转导通路
- 小分子水凝胶对大鼠骨髓间充质干细胞心肌分化过程中早期分化基因表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨小分子水凝胶对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)心肌分化过程中早期分化基因Desmin和α-actin的表达影响。方法:流式细胞仪检测鉴定P9 MSCs细胞表面标记物,分别应用10μmol/L5-aza(5-aza组)、小分子水凝胶+5-aza(水凝胶组)对第9代MSCs进行联合诱导24 h,诱导4周后,QRTPCR和Westem-blot ting法检测Desmin、α-actin mRNA及蛋白的表达。结果:第9代MSCs CD44阳性表达、CD34阴性表达;诱导4周后,5-aza组细胞难以形成球状细胞团,细胞容易脱落,凋亡及死亡细胞较多;水凝胶组细胞死亡少,数量较诱导前增多,细胞之间的分支连接紧密,有聚集生长的趋势,形成球状细胞团块,个别细胞内形成类肌管状结构。5-aza组和水凝胶组心肌早期分化基因Desmin、α-actin均有阳性表达,水凝胶组mRNA及蛋白表达水平均较5-aza组明显增强(P<0.05)。结论:小分子水凝胶可作为细胞的三维培养支架,有利于MSCs生长,具有促进5-aza诱导的MSCs向心肌样细胞分化的作用。
- 区彩文张建武陈国钦邓菊吴智业陈敏生
- 关键词：骨髓间充质干细胞DESMINΑ-ACTIN
- 白藜芦醇对压力负荷性心脏收缩功能及钙调控蛋白的表达
- 2014年
- 目的:建立压力负荷性心衰大鼠模型,观察白藜芦醇对心肌收缩功能的保护作用及对心肌钙调控蛋白表达的影响。方法:以腹主动脉缩窄法建立大鼠压力过负荷心肌肥大模型,术后4周给予白藜芦醇[4 mg/(kg·d)]治疗4周和6周,用IE 33彩超仪无创测量左室室壁厚度以及射血功能相关指标;实时定量PCR法检测左心室组织匀浆中CaMKⅡ、PLB、NCX_1、SERCA_2、RYR_2的mRNA的表达。结果:术后4周,与假手术组相比,腹主动脉缩窄大鼠左室室壁厚度、射血分数(EF)及收缩系数(FS)明显增高(P<0.05)。术后8周和10周,即药物干预后4周和6周,与假手术组相比,单纯手术组EF及FS明显降低(P<0.05);白藜芦醇干预组EF和FS较单纯手术组明显升高(P<0.05),且与假手术组比无显著差别。另外,与假手术组比较,单纯手术组CaMKⅡ、PLB、NCX_1的mRNA表达均明显增高(P<0.05),而SERCA_2、RYR_2的mRNA表迭明显降低(P<0.05);经白藜芦醇干预4周和六周后,CaMKⅡ、PLB、NCX_1的mRNA表达明显下调(P<0.05);SERCA_2、RYR_2的mRNA表达则明显回升(P<0.05)。结论:白藜芦醇可显著改善压力负荷所致的心脏收缩功能损害,阻止心脏向失代偿阶段演变,其作用可能与调控心肌细胞中多种钙调节蛋白表达有关。
- 吴智业卢俊江唐诗彦王兰青赵路宁邓菊董颀陈敏生
- 关键词：心脏收缩功能白藜芦醇钙调控蛋白
- 小分子水凝胶携带miR-499转染的MSCs移植治疗大鼠急性心肌梗死的实验研究
- 研究目的
1.探讨miR-499对诱导MSCs向心肌细胞分化的作用。
2.观察小分子水凝胶携带过表达miR-499的MSCs移植对AMI大鼠心脏功能的影响以及植入MSCs存活、滞留、分化等情况。
研究方...
- 邓菊
- 关键词：MICRORNA心肌分化心肌梗死心肌组织工程
- 文献传递
- 小分子水凝胶结合腺病毒介导的肝细胞生长因子基因修饰对大鼠骨髓间充质干细胞生物学特性的影响
- 2013年
- 目的 观察小分子水凝胶（SMH）结合腺病毒（Ad）介导的肝细胞生长因子（HGF）基因修饰对大鼠骨髓间充质干细胞（MSC）生物学特性的影响.方法 取第9代MSC株进行实验,分为普通培养下MSC对照组（MSC组）、普通培养下转染Ad-HGF的MSC组（Ad-HGF＋MSC组）、在SMH中培养的转染Ad-HGF的MSC组（SMH＋Ad-HGF＋MSC组）、在SMH中培养的MSC组（SMH＋MSC组）.将Ad-HGF转染MSC,48 h后流式细胞仪检测转染率.采用实时定量PCR检测MSC组、Ad-HGF＋MSC组、SMH＋Ad-HGF＋MSC组细胞转染48 h后的mRNA水平.采用ELISA法测定Ad-HGF＋MSC、MSC、Ad-EGFP＋MSC、SMH＋Ad-HGF＋MSC组细胞上清液中HGF蛋白的含量,持续至转染后23 d.普通显微镜观察比较MSC组、SMH＋MSC组、Ad-HGF＋MSC组、SMH＋Ad-HGF＋MSC组细胞在转染继续培养7d后的形态.MTT法检测各组细胞1～7d的生长情况,绘制生长曲线.流式细胞仪检测转染2周后各组细胞表面标志物和细胞周期.各组细胞在5-aza诱导24 h后继续培养3周,免疫荧光化学检测细胞向心肌样细胞分化的能力情况.结果 Ad-HGF转染MSC 48 h后,转染率为74.7％.转染后48 h,MSC组Ct值为14.99;SMH＋Ad-HGF＋MSC组Ct值为8.38;Ad-HGF＋MSC组Ct值为8.51;转染两组均出现明确的HGF基因表达.Ad-HGF＋MSC组、SMH＋Ad-HGF＋MSC两组上清中均有HGF蛋白分泌,Ad-HGF＋MSC组转染后48 h含量达最高峰,为121 μg/L,持续至23 d.SMH＋Ad-HGF＋MSC组HGF含量高峰在第3天,达118μg/L,持续至23 d.MSC组、Ad-HGF＋MSC组细胞均呈成纤维细胞样生长,而转染或未转染Ad-HGF的MSC细胞在SMH水凝胶中三维培养时,细胞多为棒状,一些成球形,细胞之间的分支连接紧密,有聚集生长的趋势.Ad-HGF＋MSC组与MSC组细胞生长曲线相似,各时间点吸光度A值差异无统计学意义,生长趋势吻合.SMH＋MSC组与SMH＋Ad-HGF＋MSC组细胞生长速度前4d与MSC、Ad-HGF＋MSC组比较,吸光度A值差异均无统计学意义;4d后细胞的吸光度A
- 区彩文陈国钦张建武邓菊吴智业陈敏生
- 关键词：腺病毒肝细胞生长因子间质干细胞
