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阮二垒: 作品数：10 被引量：29H指数：4; 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>; 发文基金：广东省科技攻关计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

合作作者

鹅细小病毒NS2基因的克隆和序列分析被引量：1: 2009年; 参照GenBank发表的GPVB株全基因序列,设计并合成一对引物,通过PCR技术扩增出GPVS1株NS2基因,目的片段长约1.4kb,将目的片段克隆到pMD18-T载体后进行序列测定和分析,结果表明:GPVS1株NS2基因全长1356bp,编码451个氨基酸,与国外已发表的GPVB株相比核苷酸序列同源性为98.89%,推导氨基酸序列同源性为98.89%。; 阮二垒陈芳艳陈瑞爱王林川杨丽云; 关键词：鹅细小病毒 NS2基因克隆

番鸭细小病毒NS2基因的克隆和序列分析被引量：1: 2010年; 本研究参考GenBank发表的MDPVFM株全基因序列,设计并合成一对引物,通过PCR技术扩增出MDPVS1株NS2基因,目的片段长约1.3 kb,将目的片段克隆到pMD18-T载体后进行序列测定和分析,结果表明,MDPVS1株NS2基因全长1357 bp,编码451个氨基酸,与国外已发表的MDPVFM株相比核苷酸序列同源性为99.26%,推导氨基酸序列同源性为98.23%。; 阮二垒杨丽云陈芳艳陈瑞爱王林川季艳菊; 关键词：番鸭细小病毒 NS2基因克隆

血清9型鸭疫里默氏杆菌在华南地区的分离鉴定被引量：1: 2010年; 本研究于2009年7月～2010年4月针对广东、广西、福建等养鸭密集地区进行鸭疫里默氏杆菌(RA)流行病学调查,并分离到5个RA分离株。经形态特征、生化特性和血清学鉴定表明,5个分离株与血清9型RA相似。对16S rRNA部分基因进行序列测定,并与GenBank中登录的菌株16S rRNA基因序列进行比对及系统进化分析显示:该5株分离株与报道的RA H-1785、H-2199、H-2565和P-2123的16S rRNA序列相似性较高,同源性达99.1%～99.7%,进一步证实这5个分离株为血清9型RA。; 冯金牛陈芳艳区德庆阮二垒杨丽云黎丁滔陈瑞爱唐秀英王林川; 关键词：鸭疫里默氏杆菌血清型系统进化分析

雏番鸭细小病毒病的研究进展被引量：5: 2009年; 本文对雏番鸭细小病毒病的临床症状、危害、病原学、疾病的诊断和防制等方面的研究进展进行了综述,重点介绍了该病的特征和病原的生物学特性,并对番鸭细小病毒新的研究方向做出了展望。; 阮二垒陈芳艳陈瑞爱王林川; 关键词：雏番鸭细小病毒病细小病毒

鹅细小病毒荧光定量PCR检测方法的建立及全基因克隆与序列分析: 鹅细小病毒是细小病毒科、细小病毒属的成员，主要感染1月龄内雏鹅和雏番鸭，以急性肠炎及肝、肾、心实质脏器炎症为特征的烈性传染病。该病危害程度与日龄密切相关，10日龄内雏鹅发病率和死亡率可达100％。在易感群中的致死率高达7...; 阮二垒; 关键词：鹅细小病毒荧光定量PCR检测

鹅细小病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立: 2010年; 阮二垒杨丽云陈芳艳陈瑞爱冯金牛黎丁滔王林川; 关键词：鹅细小病毒 PCR检测方法荧光定量败血性传染病细小病毒病小肠黏膜

鸭疫里氏杆菌的分离与16 S rRNA的鉴定被引量：8: 2010年; 从疑似患有鸭疫里氏杆菌病的病死鸭群中采取的肝脏、心脏、脑等病料中分离病原,进行生化鉴定,自6只病死鸭的12份病料中分离鉴定出6株鸭疫里氏杆菌。根据鸭疫里氏杆菌16 S rRNA基因的保守序列设计特异引物,对6株鸭疫里氏杆菌进行PCR扩增,均能扩增出680 bp的特异条带;从凝胶中回收DNA目的条带并测序,测序结果与GenBank中鸭疫里氏杆菌相应序列相似率达到99.99%。; 冯金牛阮二垒杨丽云黎丁滔陈瑞爱王林川; 关键词：鸭疫里氏杆菌生化鉴定 RRNA PCR

一株肉鸽新城疫强毒的分离鉴定被引量：8: 2010年; 用SPF鸡胚从病死鸽的内脏组织中分离到一株新城疫病毒(命名为GD-09株),该病毒能使鸡红细胞发生凝集,且这种凝集能被鸡新城疫标准阳性血清所抑制。经测定,其鸡胚平均死亡时间(MDT)、1日龄雏鸡脑内接种的致病指数(ICPI)分别为57.6 h、1.74,表明该新城疫病毒为强毒。通过分析其融合蛋白(F)发现,F蛋白多肽裂解位点为112RRQRRF117,符合NDV强毒株裂解位点氨基酸序列。F基因分型及氨基酸同源性比较发现,GD-09株属于基因Ⅵ型,与La sota、F48E9、B1、V4等传统毒株同源性较低,与鸽源NDV同源性较高。; 杨丽云阮二垒陈芳艳王林川; 关键词：F基因

番鸭细小病毒NS2原核表达载体的构建被引量：2: 2010年; 根据已发表的番鸭细小病毒(MDPV)核苷酸序列设计并合成1对引物,对MDPV非结构蛋白NS2基因进行扩增。所获得的PCR产物与预期片段大小相符,约1.4 kb。将该片段直接与pMD18-T载体连接,转化入感受态大肠杆菌DH5α中增殖。在对所提质粒进行快速鉴定、PCR扩增及BamHI酶切线性化初步鉴定的基础上,经限制性内切酶BamHI和SalI进行双酶切鉴定。将克隆产物pMD18-T-NS2与原核表达载体pET-32a分别用BamHI和SalI双酶切后,回收目的片段进行定向连接,并转化入感受态大肠杆菌DH5α中。对所获得的重组质粒分别经BamHI单酶切、BamHI和SalI双酶切,证实含有目的基因,且基因插入方向正确,成功构建了含有MDPV NS2非结构蛋白基因的原核表达载体,为高效原核表达及研制更为有效的基因工程疫苗打下了基础。; 阮二垒杨丽云陈芳艳陈瑞爱王林川; 关键词：番鸭细小病毒 NS2基因原核表达

鸭疫里默氏杆菌16 S rRNA PCR快速检测方法的建立被引量：4: 2010年; 根据GenBank中的鸭疫里默氏杆菌（RA）1-19型16 S rRNA基因序列,分别与大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、巴氏杆菌的16 S rRNA基因序列对比,设计特异性引物,建立了基于鸭疫里默氏杆菌16 SrRNA的PCR检测方法。结果表明,用该方法对鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、巴氏杆菌进行检测,只有鸭疫里默氏杆菌的DNA能扩增出680 bp的特异条带,其他细菌的DNA不能扩增出任何条带;测序结果与GenBank中鸭疫里默氏杆菌相应序列完全一致;同时分别将鸭疫里默氏杆菌基因组DNA和菌液10倍稀释进行PCR扩增,对鸭疫里默氏杆菌DNA的最小检出量为1.907×10^-5g/L,对鸭疫里默氏杆菌菌液的最小检出量为1.5×10^4CFU/mL。证实,建立的基于鸭疫里默氏杆菌16 S rRNA的PCR检测方法具有快速、灵敏、特异的优点,可用于鸭疫里默氏杆菌感染的检测、分子流行病学调查和分离菌株的快速鉴定。; 冯金牛陈芳艳阮二垒杨丽云黎丁滔陈瑞爱区德庆唐秀英王林川; 关键词：鸭疫里默氏杆菌 RRNA基因聚合酶链反应