陈兵华
- 作品数:6 被引量:6H指数:1
- 供职机构:温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 氟他胺联合去雄激素环境诱导雄激素非依赖性前列腺癌细胞模型的建立
- 目的建立雄激素非依赖性前列腺癌细胞模型。方法将雄激素依赖的父代前列腺癌LNCaP细胞去雄激素培养5代后,加入终浓度为1.0×10mol/L的氟他胺培养20代,再提高氟他胺浓度到5.0×10mol/L,培养35代,并以此L...
- 陶志华许刚陈兵华毛易捷何晶晶吴伟林晓梅陈占国沈默周武
- 关键词:雄激素非依赖细胞株氟他胺前列腺癌
- 文献传递
- 氟他胺联合去雄激素环境诱导的雄激素非依赖性前列腺癌细胞模型的建立被引量:6
- 2009年
- 采用氟他胺联合去雄激素环境联合诱导培养的方法在体外建立一株雄激素非依赖性前列腺癌细胞系。倒置显微镜下观察细胞形态学变化;采用CCK-8法测定细胞生长率;流式细胞技术检测细胞周期和Bcl-2、Bax的表达变化。结果显示,第1~20代实验组细胞形态瘦长,第30代后细胞大部分呈扁平状,同时呈聚集生长,而对照组细胞形态始终呈长梭形;不同代数的实验组LNCaP细胞在氟他胺浓度为5.0×10-6mol/L的去雄激素培养液中的细胞生长率总体呈上升趋势;氟他胺和去雄激素环境对实验组LNCaP细胞的细胞周期均无明显影响,而对照组LNCaP细胞的生长受氟他胺和去雄激素环境影响而受到抑制;实验组第60代LNCaP细胞Bcl-2平均荧光强度明显高于对照组,而Bax平均荧光强度与对照组间无显著差异。结果表明LNCaP细胞在氟他胺和去雄激素环境下能形成雄激素非依赖性前列腺癌细胞,这为其发病机制的研究提供了合适的实验对象。
- 许刚毛易捷陈兵华何晶晶陶志华林晓梅陈占国沈默
- 关键词:雄激素非依赖性氟他胺前列腺癌
- 氟他胺联合去雄激素环境诱导雄激素非依赖性前列腺癌细胞模型的建立
- 目的建立雄激素非依赖性前列腺癌细胞模型。方法将雄激素依赖的父代前列腺癌LNCaP细胞去雄激素培养5代后,加入终浓度为1.0×10-7mol/L的氟他胺培养20代,再提高氟他胺浓度到5.0×10-6mol/L,培养35代,...
- 陶志华许刚陈兵华毛易捷何晶晶吴伟林晓梅陈占国周武沈默
- 文献传递
- 氟他胺联合去雄激素环境诱导雄激素非依赖性前列腺癌细胞模型的建立
- 陶志华周武许刚陈兵华毛易捷何晶晶吴伟林晓梅陈占国沈默
- PCA3基因启动子多态性快速分型的DHPLC法建立
- 2010年
- 目的建立DHPLC技术分析PCa特异性PCA3基因启动子多态性的技术平台。方法在PCA3基因启动子区域设计1对引物,以本室先前已经建立的11种(C2T6、C2T5、C3T5、C2T5/C2T6、C3T5/C3T4、C3T5/C4T5、C3T5/C2T5、C3T5/C2T6、C3T5/C1T8、C2T5/C3T4、C2T6/C2T7)已知多态性的PCA3基因启动子的克隆质粒为标准品,通过优化DHPLC检测体系,建立其多态性克隆质粒的标准图谱。采用完全随机设计,从200例病理确诊为PCa患者中选取147例,对其PCA3基因启动子的扩增产物进行DHPLC分析,比较各标本洗脱峰与标准克隆质粒的DHPLC图谱,以判断临床标本PCA3基因多态性类型,并对这些基因型再行克隆测序予以验证。结果通过克隆质粒优化DHPLC检测体系,最适检测体系为:含44.3%A洗脱液(0.1mol/L TEAA、0.025%ACN)和55.7%B洗脱液(0.1mol/L TEAA、25%ACN)的起始洗脱梯度,含35.3%A洗脱液和64.7%B洗脱液的终止洗脱梯度,柱温53℃,流速:0.9ml/min,在该条件下DHPLC用8种杂合型克隆质粒(C2T5/C2T6、C3T5/C3T4、C3T5/C4T5、C3T5/C2T5、C3T5/C2T6、C3T5/C1T8、C2T5/C3T4、C2T6/C2T7)进行重复性验证,结果显示,同一多态性色谱峰中2峰的出峰时间之差的批间CV值在0%~6.67%之间。11种克隆质粒多态性标本仅通过1~2次洗脱,就能根据峰型和各峰的出峰时间将其区分开。147例PCa患者中,144例DHPLC检测结果和克隆测序结果一致(Kappa=1,P=0.000),并出现3种新的峰型,经克隆测序验证为3种新的多态性(C3T5/C1T6、C2T5/C1T8、C3T5/C2T7)。结论成功建立的DHPLC分析PCA3基因启动子多态性的技术方法,可对PCA3基因启动子多态性进行基因型别鉴定。该方法具快速、准确、经济、高通量、重复性好、自动化等特点,为进一步研究PCa基因多态性提供了技术平台。
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- 关键词:前列腺肿瘤
- 氟他胺联合去雄激素环境诱导雄激素非依赖性前列腺癌细胞模型的建立
- 目的建立雄激素非依赖性前列腺癌细胞模型。方法将雄激素依赖的父代前列腺癌LNCaP细胞去雄激素培养5代后,加入终浓度为1.0×10-7mol/L的氟他胺培养20代,再提高氟他胺浓度到5.0×10-6mol/L,培养35代,...
- 陶志华许刚陈兵华毛易捷何晶晶吴伟林晓梅陈占国沈默周武
- 文献传递