顾其芳
- 作品数：39 被引量：293H指数：11
- 供职机构：上海市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：上海市卫生局青年科研基金上海市自然科学基金上海市公共卫生重点学科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 六种血清型沙门菌PFGE指纹图谱研究被引量：4
- 2007年
- 目的用PFGE方法绘制不同血清型的沙门菌指纹图谱,并且进行同源性分析。方法首先将从食品中检测出6中不同血清型的沙门菌菌株制成琼脂模块,再提取菌株的DNA,用限制性内切酶XbaⅠ对细菌DNA进行酶切,用Bio-radCHEPMAPPER绘制出菌株的PFGE指纹图谱,最后用QuantityOneTM图像分析软件进行同源性分析。结果所有的菌株的同源性均用相似性系数(矩阵)和百分数表示。结论用PFGE绘制菌株的指纹图再用QuantityOneTM图像分析软件进行分析,是确定食源性致病菌沙门菌同源性的一种有效的方法。
- 王颖顾其芳刘诚周培君张美英
- 关键词：沙门氏菌属脉冲场同源盒细菌学技术
- 沙门菌分离、筛检和确认流程技术关键点分析被引量：2
- 2020年
- 目的基于标准方法构建多维组合流程,分析和评价沙门菌常规检测的技术关键点。方法构建沙门菌选择性增菌液和平板构成的检测流程,使用标准菌株检测4种选择性增菌液的回收率,验证3类5种沙门菌选择性平板的典型特征。通过实样比较不同选择性增菌液和平板组合在沙门菌检测过程中疑似菌落甄别、筛检效率和敏感性差异。结果罗伯特增菌液(RV)、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)和亚硒酸盐煌绿增菌液(SBG)回收效能与亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)相差1个稀释度,前3种增菌液适合非伤寒沙门菌的增殖,SC适合伤寒和副伤寒沙门菌的增殖。双糖管筛选法符合预期参比菌株表型。除沙门菌显色平板(CAS)外,其他选择性平板的菌株验证均可能产生菌落小和硫化氢(H2S)阴性不典型菌落;84件肉制品和水产品样品中确认阳性25件(29.76%),检出42株沙门菌。RV、TTB、SBG、SC联合CAS和木糖赖氨酸脱氧胆酸盐平板(XLD)筛检沙门菌的敏感性分别为88%、84%、72%和0;RV和TTB、RV和SBG、TTB和SBG的组合敏感性分别为100%、92%和88%。3种增菌液与任一选择性平板组合的分离敏感性为48%~68%。双糖管筛检疑似菌落的特异性和阳性预测值较高。42株沙门菌经系统生化、质谱和血清学鉴定确认。结论经验证的双增菌液和双平板的组合能有效提高食品沙门菌检测的敏感性。梯度增菌、菌落识别和初筛效率是沙门菌检测技术的关键点。
- 刘玥张红芝顾其芳刘诚朱颖莹许学斌
- 关键词：沙门菌增菌液筛检
- 肉制品中沙门菌实时荧光定量聚合酶链反应标准质粒的构建被引量：5
- 2017年
- 目的制备用于检测肉制品中沙门菌实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)的标准质粒。方法设计针对沙门菌inv A基因的引物,扩增特异片段,转入质粒载体中构建重组质粒。将构建的重组质粒作为标准品,进行优化后的实时荧光定量PCR,建立标准曲线,并考察该标准品灵敏性及稳定性。结果成功构建含有沙门菌inv A基因的质粒标准品,用其建立的标准曲线循环阈值(Ct值)与模板的拷贝数呈良好线性关系(r2=0.9979),最低可以检出10拷贝/反应。该标准质粒经验证具有良好的稳定性。用该质粒标准品检测肉制品中的沙门菌,经2 h增菌后,可在7 h内完成对样品的检测。结论所构建的质粒标准品可用于荧光定量PCR检测肉制品中的沙门菌,为考量实验质量提供参考依据。
- 於颖顾其芳陈敏张红芝
- 关键词：荧光定量聚合酶链反应沙门菌肉制品
- 三种金黄色葡萄球菌选择性分离培养基的检测效果比较被引量：8
- 2018年
- 【目的】比较三种金黄色葡萄球菌选择性分离培养基的检测效果。【方法】分别使用BairdParker培养基(BP)、兔血浆纤维蛋白原培养基(RPF)和科玛嘉葡萄球菌显色培养基(CHROMagar^(TM) Staph aureus)对标准菌株、食品分离株以及食品样品进行对比检测。【结果】三种选择性培养基对金黄色葡萄球菌的回收率均达到95%以上;RPF和CHROMagar^(TM) Staph aureus培养基的检测效率明显高于BP培养基;且两种培养基敏感性、特异性均优于传统的BP培养基。【结论】应用RPF和CHROMagar^(TM) Staph aureus培养基检测食品中金黄色葡萄球菌,较传统的BP培养基具有更好的检测效果,建议将RPF和CHROMagar^(TM) Staph aureus培养基作为可靠的分离检测培养基应用于食品中金黄色葡萄球菌的分离检测。
- 顾其芳张红芝朱颖莹鲁珺琰於颖刘诚刘玥陈敏
- 关键词：金黄色葡萄球菌
- SNAP^(TM)检测系统用于筛选牛奶中黄曲霉毒素M_1探讨被引量：2
- 2004年
- [目的 ] 评估SNAPTM检测系统用于筛选牛奶中黄曲霉毒素M1(AFM1)的可行性。 [方法 ] 用SNAPTM检测系统检测 10种模拟样品、市场销售的 8个品牌 8大品种的 45件牛奶样品 ,从SNAPTM检测系统的检出限、适用检测样品的种类、质量控制三方面进行研究。 [结果 ] SNAPTM检测系统能筛选出黄曲霉毒素M1浓度≥ 0 .3 μg/kg的样品 ;实测 45件牛奶样品 ,有 5件不能直接得出结果 ,但稀释后可得出结果。 [结论 ] 牛奶中总固形物是影响SNAPTM检测系统的主要原因 ,每批样品检测时通过加内标 (用 0 .3 μg/kg和 0 .5 μg/kg两点 )的方法能保证检测结果的可靠性。
- 陈敏王颖顾其芳张美英周培君
- 关键词：牛奶黄曲霉毒素M1食品卫生
- 金黄色葡萄球菌食品分离株肠毒素基因及耐药性研究被引量：11
- 2018年
- 目的了解2015年2月-2017年9月上海市金黄色葡萄球菌食品分离株肠毒素基因分布规律及耐药情况。方法采用酶联免疫法(ELISA)检测金黄色葡萄球菌的5种毒力基因sea^see,同时用CLSI推荐的微量肉汤稀释法进行药敏试验,定量测定最低抑菌浓度(MIC)。结果 106株金黄色葡萄球菌食品分离株中有68株检出肠毒素基因,肠毒素基因携带率为64.2%,同时携带2种毒素基因的菌株占7.4%(5/68)。微量肉汤稀释法检出91株金黄色葡萄球菌耐药株,76.9%(70/91)为2重以上的多重耐药菌,呈现21种耐药表型谱,耐药性最强的菌株对6种抗生素产生耐药性。结论上海地区金黄色葡萄球菌食品分离株产肠毒素能力较强且多重耐药性严重,应加强食源性金黄色葡萄球菌的监测,为临床合理使用抗生素和开展食品安全风险评估提供科学依据。
- 顾其芳张红芝刘玥刘诚潘淼陈敏
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素耐药性食源性致病菌
- 李斯特菌食物中毒的流行现况及其对策被引量：7
- 2000年
- 王颖李洁陈敏顾其芳
- 关键词：食物中毒李斯特菌病死率细菌
- 食品中沙门菌快速检测方法的探索被引量：2
- 2006年
- 目的:建立食品中沙门菌的快速检测方法。方法:以传统方法(即国标法:GB4789.4-2003)和新建立的方法(以下简称改良法)对600件各类食品进行沙门菌的检测,比较两种检测方法的时效性、假阳性率、假阴性率和敏感度。结果:使用改良法检测食品中的沙门菌比传统方法快至少47 h。改良法达到了传统方法的敏感度。改良法使用的生化鉴定试剂比传统法少得多。检测食品中的沙门菌,改良法的阳性率为8.8%,高于传统法的7.3%。结论:新建立的快速方法能缩短检测时间,节省培养基和生化试剂,尤其是节省了大量的工作量,使用该新方法有利于环境保护,能大大提高工作效率。
- 王颖顾其芳刘诚张美英周培君
- 关键词：食品沙门菌MINI敏感度
- 上海市零售梭子蟹中副溶血性弧菌的污染状况及风险评估被引量：14
- 2010年
- 目的研究上海市场零售梭子蟹中副溶血性弧菌的污染状况,并对副溶血性弧菌可能引发的公共卫生风险进行初步评估。方法采用最可能数(MPN)法检测上海和宁波市售梭子蟹中副溶血性弧菌的带菌量,采用膳食回顾性调查方法对上海居民梭子蟹消费量进行调查,采用RiskRanger软件对梭子蟹中副溶血性弧菌进行半定量风险评估。结果上海和宁波市零售梭子蟹中副溶血性弧菌阳性率分别为60.5%和13.3%,阳性试样平均菌量分别为0.75MPN/g和5.50MPN/g。膳食调查结果显示,上海居民梭子蟹人均日摄入量为2.95g/d。风险评估结果显示,风险评分为36分,梭子蟹食用者每人每天的发病概率为8.22×10-9,每年上海地区预期发生42.5例副溶血性弧菌感染病例。通过改变评估模型中某些风险的选择,如采取良好的控制措施,风险可降低至原来的1/10。结论上海市售梭子蟹副溶血性弧菌污染状况较为严重,可能对人群健康造成较高的风险,未来有必要进一步加强监测。
- 高围溦刘弘刘诚顾其芳孙双福吴春峰
- 关键词：副溶血性弧菌风险评估梭子蟹
- 德尔卑沙门菌PFGE分型探索被引量：1
- 2006年
- [目的]用脉冲凝胶电泳方法绘制德尔卑沙门菌的DNA指纹图谱,为研究德尔卑沙门菌的同源性提供分子生物学技术依据。[方法]从本实验室在各类食品中分离到的12株德尔卑沙门菌中提取DNA,经过限制性内切酶Xba1的切割,再用脉冲凝胶电泳仪进行DNA分子分型,并使用Quantity OneTM软件对其同源性进行分析比较。[结果]实验得到10株菌的DNA指纹图谱,与2003年D1号菌株遗传基因密切相关的菌株占22%;与2004年D15号菌株遗传基因密切相关的菌株占44%;2005年的4株菌中有3株之间的遗传基因密切相关;2006年的4株菌,分别为2株之间的遗传基因密切相关。[结论]脉冲凝胶电泳方法是分析引起食源性疾病的致病菌的同源性的有效方法。
- 王颖顾其芳陈敏刘诚张美英周培君
- 关键词：德尔卑沙门菌脉冲凝胶电泳同源性
