高珊
- 作品数：28 被引量：58H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技重大专项国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学航空宇航科学技术更多>>
- 人Man2c1转基因小鼠外周血中性粒细胞和CD8^+T细胞的调节被引量：1
- 2007年
- 目的以转hMan2c1基因小鼠为模型,分析hMan2c1基因在转基因小鼠脾脏的蛋白表达和活性,研究hMan2c1基因对于机体免疫系统的影响。方法Western blot方法检测hMan2c1基因在脾脏的蛋白表达并检测小鼠脾脏α-甘露糖苷酶活性;血常规分析外周血中各种血细胞的比例;以BSA作为抗原观察机体的免疫应答;流式细胞技术观察外周血中CD4+、CD8+、B、NK细胞的数量。结果Western blot结果显示,与野生型小鼠比较,hMan2c1基因在转基因小鼠脾脏组织有明显的表达,α-甘露糖苷酶活性明显增高,中性粒细胞明显升高。BSA刺激后,转基因小鼠外周血免疫细胞中的CD8+T淋巴细胞明显高于野生型小鼠。结论hMan2c1基因在小鼠脾脏表达引起α-甘露糖苷酶活性显著升高,并进一步影响淋巴细胞的生成,增加中性粒细胞和CD8+T淋巴细胞对免疫原的应答。
- 刘红霞苏卫向志光邸冉高珊朱立平张连峰
- 关键词：小鼠转基因免疫
- 人心肌肌钙蛋白C两种突变转基因小鼠模型建立与对比分析被引量：2
- 2014年
- 目的为建立心肌组织特异性表达人cTnCD145E和cTnCG159D突变基因转基因小鼠,为对比分析两种不同心肌病的发生发展建立模型。方法利用定点突变技术分别制备人cTnC基因的cTnCD145E和cTnCG159D两个突变体,随后插入心肌特异性表达启动子α-MHC下游构建人cTnCD145E和cTnCG159D基因转基因载体。通过显微注射法建立转基因C57BL/6小鼠。利用心脏超声和病理观察对比分析不同年龄转基因小鼠心脏的结构与功能。结果建立了心肌组织高表达人cTnCD145E和cTnCG159D突变基因转基因小鼠,cTnCD145E和cTnCG159D转基因小鼠随年龄增加,有分别向HCM和DCM发展的趋势,12月龄时,cTnCD145E转基因小鼠收缩末期和舒张末期左室容积(left ventricle end-diastolic volume and end-systolic volume,EDV and ESV)与同窝阴性小鼠相比下降,射血分数(ejection fraction,EF)和收缩末期左心室后壁厚度(left ventricle end-systolic posterior wall thickness,ESPWT)增加,而cTnCG159D转基因小鼠EDV和ESV与同窝阴性小鼠相比上升,EF和ESPWT减少。结论心肌组织特异性表达人cTnCD145E突变基因转基因小鼠表现肥厚型心肌病病理表型,而心肌组织特异性表达人cTnCG159D突变基因转基因小鼠表现扩张型心肌病病理表型,二者可作为对比研究由不同发病机制导致的心肌病模型。
- 高珊陈伟刘宁葛文萍高翔吕丹张连峰董伟
- 关键词：肥厚型心肌病扩张型心肌病转基因小鼠心脏超声
- EFS40冷冻管法对小鼠胚胎冷冻效果的探索
- 2010年
- 关文怡曹授俊高珊刘牧赵德明
- 关键词：小鼠胚胎冷冻效果哺乳动物胚胎冷冻保存冷冻方法早期胚胎
- 犬的现代繁殖技术被引量：2
- 2008年
- 综述讨论了国内外犬的现代繁殖技术——人工辅助生育(ART)研究的各个方面,包括:人工授精(AI)、卵细胞的体外培养(IVC)和体外受精(IVF),胚胎移植(ET)、产前基因诊断(PGD)和克隆(Cloning)等一系列技术问题,以及犬繁殖技术研究方面目前存在的问题及应用前景。
- 黄馨孟金萍高珊张建军刘牧
- 关键词：人工授精
- 布氏田鼠的研究概况和其分类学名称变化被引量：4
- 2013年
- 布氏田鼠Lasiopodomys brandtii(Radde,1861)分布广泛,分三个亚种。本文简介了布氏田鼠的研究进展,包括:生态、形态、生理、遗传以及实验动物化研究等。此外,布氏田鼠的中、英文名称和其分类学地位,因历史原因和研究方法不同,一直存在分歧和争议。本文介绍了布氏田鼠在我国各时期的名称和分类学变动情况。
- 刘牧施海霞高珊宋铭晶
- 关键词：布氏田鼠实验动物化分类学
- C57BL/6J等近交系小鼠精子冷冻研究进展被引量：2
- 2010年
- 小鼠精子冷冻方法虽成功建立多年,但C57BL/6J等近交系小鼠的精子在冻融后的成活率和受精率远远低于封闭群和杂交小鼠的精子。C57BL/6J等近交系小鼠的精子冷冻方法已成为当前大量增加转基因小鼠保种的一个瓶颈,同时成为国内、外近来研究的热点。本文系统介绍了近年国外为改进C57BL/6J等近交系小鼠精子冷冻保存所的做努力和探索。研究包括:各种冷冻保存方法;新培养基的改良;各种冷冻试剂组合;冷冻对小鼠精子质膜伤害机理的研究及其保护方法;以及提高冻融后精子获能和提高授精能力等领域。
- 刘牧张一云高珊刘维俊
- 关键词：C57BL/6J小鼠近交系小鼠精子冷冻保存
- 阿尔茨海默病模型小鼠自主活动能力的分析被引量：9
- 2010年
- 目的研究阿尔茨海默病APP/PS双转基因小鼠自主行为的改变和作为阿尔茨海默病行为特征的可行性。方法对APPswe/PSΔE9双转基因小鼠和野生鼠分别在4月龄、6月龄、8月龄进行旷场自主行为实验,并与Morris水迷宫分析进行比较,利用SPSS16.0软件统计分析。结果在4月龄、6月龄转基因小鼠的学习记忆能力、以及自主性探究性行为与野生鼠比较有明显的差异。表现为:模型鼠学习记忆能力减弱,兴奋性增高,自主活动增加。这些表现与临床患者的症状有许多相似性,8月龄时,差异减小。结论APPswe/PSΔE9双转基因小鼠的自主行为学表现为烦躁不安,自主活动增加,与阿尔茨海默病患者的临床表现有许多相似之处,可作为小鼠模型判别的行为标志之一,在阿尔茨海默病的病因病机研究和药物研发等方面具有一定的应用价值。
- 袁树民张晓娟张海涛高翔高珊张连峰秦川
- 关键词：阿尔茨海默病MORRIS水迷宫
- 胚胎发育期和冷冻保护剂剂量对Nakagata小鼠胚胎冷冻效果的影响被引量：3
- 2007年
- 目的利用不同剂量的冷冻保护剂,对ICR和Km小鼠不同发育期的胚胎进行冷冻和解冻实验。探讨Nakagata小鼠胚胎玻璃化冷冻管方法,使用不同剂量的冷冻保护剂等因素对冷冻效果的影响。方法2细胞期胚胎在KSOM微滴培养液内分别培养到2细胞4、细胞和8细胞期胚胎,分别加入50μL,100μL,200μL的DAP213冷冻保护剂,利用Nakagata方法冷冻,解冻以及观测解冻后培养至囊胚期胚胎的冷冻效果。结果冷冻保护剂DAP213剂量和ICR,KM小鼠胚胎不同细胞发育期对冷冻效果具有显著的交互影响(P<0.01)。相对而言,冷冻保护剂剂量对结果的影响(P>0.05)低于胚胎细胞发育期对冷冻效果的影响(P<0.01)。结论冷冻保护剂的剂量和胚胎细胞发育期均会影响冷冻实验的结果。胚胎的细胞发育期对冷冻效果的影响更大。对2细胞期,4细胞期和8细胞期的胚胎进行冷冻。8细胞期胚胎的冷冻效果最好,4细胞期胚胎冷冻效果最差。利用Nakagata冷冻管方法建立小鼠胚胎冷冻库,100μL冷冻保护剂效果较好。不同小鼠的品系也可影响冷冻结果。
- 高珊张建军薛孝先张文明孙井江孟金萍黄馨刘牧
- 关键词：胚胎冷冻冷冻保护剂
- 利用dCas9-FokⅠ编辑大鼠Dnmt1基因被引量：1
- 2016年
- CRISPR/Cas9的发现为多种生物的基因编辑提供了强有力的工具。然而,该系统在提供靶向性基因修饰的同时,会产生一些不需要的突变,即脱靶现象。为提高CRISPR/Cas9的特异性,我们将野生型Fok I核酸内切酶的功能结构域与催化功能区失活的Cas9蛋白(dCas9)进行融合,形成融合蛋白用于降低脱靶效应。FokⅠ是一种依赖于二聚化才能行使内切酶活性的核酸酶,在本研究中,通过将FokⅠ功能结构融合到dCas9的N端,构建表达质粒p ST1374-dCas9-FokⅠ。我们前期研究中,发现一个sgRNA在介导Cas9编辑Dnmt1基因建立条件敲除大鼠时,存在显著的脱靶现象。以此为基础,我们利用dCas9-FokⅠ/sgRNA系统编辑大鼠Dnmt1基因,研究该系统是否能够进行基因编辑以及是否能够提高基因编辑特异性。将转录好的dCas9-FokⅠmRNA和sgRNA显微注射到SD大鼠的受精卵中,用于产生基因编辑大鼠。通过显微注射以及胚胎移植,最终获得43只F0代大鼠,其中两只在靶点位置包含突变,突变效率达4.5%。对脱靶情况进行分析,结果显示,无脱靶现象存在。综上,表明dCas9-FokⅠ/sgRNA可以应用于编辑大鼠基因,并能显著提高特异性。尽管dCas9-FokⅠ/sgRNA系统相比于Cas9/sgRNA系统,基因编辑效率有所下降,但是该技术的发展为基因治疗提供了可供选择的潜在工具。
- 张旭于磊陈炜高珊潘硕张连峰马元武
- 关键词：DNMT1
- Tg-visfatin×ob/ob小鼠表型特征与内脂素表达被引量：1
- 2013年
- 目的研究Tg-visfatin×ob/ob小鼠的表型特征并探讨内脂素的作用。方法将visfatin转基因小鼠与ob(+/-)小鼠杂交,获取visfatin转基因ob/ob小鼠(Tg-visfatin×ob/ob),以ob/ob小鼠为对照,测定两种小鼠1～9月龄的体重变化,分别在3、5、9月龄测定其腹腔糖耐受和胰岛素耐受情况,并对其从9月龄～11月龄的死亡率进行统计。结果两种小鼠在1～9月龄的体重差异无显著性。腹腔糖耐受和胰岛素耐受实验显示,与ob/ob小鼠相比,3月龄时,Tg-visfatin×ob/ob小鼠的糖耐受受损及胰岛素耐受情况得以改善;5月龄时,Tg-visfatin×ob/ob小鼠仅糖耐受受损得以改善;9月龄时,Tg-visfatin×ob/ob小鼠具有更严重的糖耐受受损及胰岛素耐受。统计结果显示,从9月龄到11月龄之间,Tg-visfatin×ob/ob小鼠的死亡率比ob/ob小鼠提高了44.4%。结论 visfatin体内的高表达对ob/ob小鼠糖耐受和胰岛素耐受有影响,作用效果随着小鼠的年龄不同而变化,在早期起到代偿性的缓解ob/ob小鼠的糖耐受和胰岛素耐受的作用,到后期表现为失代偿性的加重了ob/ob小鼠的糖耐受和胰岛素耐受,并增加了小鼠的死亡率。
- 关菲菲全雄志高珊张晓娟葛文平张连峰
- 关键词：胰岛素耐受
