黄震宇
- 作品数：8 被引量：4H指数：2
- 供职机构：上海市肿瘤研究所更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人免疫球蛋白轻链恒区基因的体外扩增及其在大肠杆菌中的分泌表达
- 1992年
- 本文应用聚合酶链反应(PCR)技术体外大量扩增人免疫球蛋白轻链恒区基因(人C_k基因),并将该基因克隆至分泌型表达载体pINⅢ-ompA2,转入大肠杆菌中表达。应用水休克法抽提大肠杆菌的周质蛋白,经SDS-PAGE电泳,免疫印迹法分析,结果表明人恒区基因在大肠杆菌中得到表达,并能分泌至细菌的周质空间。约50％的表达蛋白其ompA信号肽已被切除。
- 吴文书刘健孙学逊黄震宇张文祥郭虹纷
- 关键词：免疫球蛋白
- 小鼠抗人小细胞肺癌单抗轻链可变区基因的体外扩增、克隆及序列分析被引量：2
- 1992年
- 本文通过一对分别位于小鼠免疫球蛋白轻链可变区基因 FR1骨架区和 FR4骨架区的通用引物,利用 PCR 技术首次从小鼠抗人小细胞肺癌2F7杂交瘤细胞染色体组总 DNA 中直接扩增出相应的免疫球蛋白轻链可变区基因,扩增出的基因片段经引物上引进的两个限制性内切酶位点直接克隆到装有人免疫球蛋白轻链恒区的克隆载体 pGEM-7Zf(+)-V_kPCR 中的 EcoR1和 BglⅡ内切酶位点之间.通过对其进行顺序分析,结果表明我们克隆得到了免疫球蛋白轻链可变区基因,其长度为318bp.
- 吴文书李岱宗刘健黄震宇张文祥洪锦心
- 关键词：杂交瘤通用引物
- 抗人小细胞肺癌T细胞受体嵌合基因的克隆
- 1997年
- 目的克隆人小细胞肺癌抗体／Ｔ细胞受体嵌合基因。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术将人小细胞肺癌单克隆抗体的变区ＶＨ、ＶＫ与Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）恒区Ｃα、Ｃβ进行拼接，构建成ＶＨＣβ、ＶＫＣα嵌合ＴＣＲ，并分别克隆至ｐＭＡＭ、ｐＸＴ１真核表达载体。结果应用ＰＣＲ中重叠延伸剪接（ＳＯＥ）方法，能简化基因拼接步骤；该嵌合基因的克隆有助于对肿瘤免疫治疗新途径的探索。
- 曹晓运朱明洁张中华王斌黄震宇李斯德
- 关键词：T细胞聚合酶链反应肺肿瘤嵌合基因
- 应用免疫PCR法检测肺癌细胞株方法的建立
- 1998年
- 肺癌是全球范围内发病率最高的恶性肿瘤之一。流行病学资料显示，肺癌患者占世界肿瘤患者的１１．８％，而目前临床诊断中约有１０％“肺部块影”通过常规Ｘ线、ＣＴ、支气管镜、痰涂片等检查仍不能明确诊断。免疫－ＰＣＲ法是９０年代兴起的一种新的抗体依赖性的抗原检测...
- 林琳黄震宇张中华杨瑶琴胡晶莹朱明洁许凯黎
- 关键词：免疫-PCR抗原检测肺癌细胞株
- 抗人小细胞肺癌嵌合T细胞受体基因的构建
- 1995年
- 众所周知，T细胞受体(TCR)识别抗原与抗体识别抗原是不同的。前者识别的是抗原——主要组织相容性抗原的复合物，受MHC限制，而后者则是识别天然状态下的抗原，亲和力较强。考虑到TCR可变区部位与抗体可变区部位有众多相似之处，即其均由两条二硫键相连的多肽组成，TCR由阿尔法(α)、贝塔(β）链组成，
- 黄震宇王斌刘健李斯德
- 关键词：TCRT细胞受体基因小细胞肺癌组织相容性抗原嵌合二硫键
- 抗人小细胞肺癌单克隆抗体的重链变区基因的体外扩增、克隆和序列分析被引量：2
- 1993年
- 本文从抗人小细胞肺癌单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总RNA,合成第一链cDNA,直接用PCR技术(polymerase chain reaction)扩增出351bp的重链变区基因(V_H),克隆至pUCV_(NP)-PCR载体上,经筛选得一批插入片段为351bp的阳性克隆,经核苷酸序列分析研究,证实已获得了该单克隆抗体的重链可变区基因。
- 刘健吴文书王斌潘志美田培坤黄震宇洪锦心
- 关键词：聚合酶链反应嵌合抗体
- 链霉亲和素-蛋白A融合蛋白基因在大肠杆菌中的表达
- 1997年
- 将合链霉亲和亲-蛋白A（Streptavidin－proteinA）融合蛋白基因的表达质粒pTSAPA导入大肠杆菌BL21（DE3），成功地表达了该融合蛋白，经SIJS－PAGE及免疫印迹等方法证实该蛋白既具有IgG的结合活性，又具生物素结合活性。
- 黄震宇林琳张中华李斯德
- 关键词：蛋白A融合蛋白基因基因表达
- PCR技术在单克隆抗体cDNA的筛选及标记同位素探针上的应用被引量：1
- 1992年
- 以往对cDNA克隆鉴定过程中,经斑点杂交筛选出的克隆数较多,在进一步的鉴定中不可避免地要进行质粒扩增、抽提、纯化酶解、片段分离等许多步骤。本文对这一步的鉴定采用了PCR技术,这样便可省去酶解及片段分离等繁琐步骤。且由于扩增片段纯净,故可直接用于Southern blot鉴定及DNA序列分析。 本文另一新的探索是利用PCR法标记探针,尤其是小片段DNA探针,其不同于常用的缺口平移和随机引物延伸标记。由于它在扩增过程中只有位于两个引物间的片段才能标上同位素,所以标记后的探针量大、比放射性强,加之PCR合成仪的出现,使此法更加高效、简便安全。
- 黄震宇朱伟民洪锦心
- 关键词：PCR单克隆抗体
