王斌
- 作品数：12 被引量：5H指数：2
- 供职机构：上海市肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人─鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因在小鼠骨髓瘤细胞中的表达
- 1994年
- 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法获得小鼠抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因（ｃＤＮＡ），构建成含人──鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因质粒（ｐＳＶ＿２△Ｈｇｐｔ２Ｆ＿７Ｖ＿ＨＨｕγ＿３）ＤＮＡ通过电脉冲介导基因转移的方法，转染小鼠骨髓瘤细胞Ｊ５５８Ｌ，并经选择培养基筛选出含有构建质粒基因的克隆，进一步按ＥＬＩＳＡ方法测定细胞表面和培养上清液中嵌合重链抗体的表达效率，最终选出表达抗体效率较高的单克隆细胞株为５Ｃ＿２，１２Ｂ＿９，２９Ｃ＿６。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法检测证明，阳性克隆细胞总ＲＮＡ经电泳后在１８Ｓ附近处与鼠抗人小细胞肺癌单抗的重链变区ｃＤＮＡ探针有明显的阳性杂交带出现。细胞抽提蛋白经ＳＤＳ──ＰＡＧＥ电泳分离显示在正常人ＩｇＧ重链分子相当的位置有一清晰条带出现，分子量约为５８ＫＤ，免疫印迹方法同样检测出此条带特异他与兔抗人ＩｇＧ（重链特异）抗体反应，证实人──鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因在小鼠骨髓癌细胞中表达成功。
- 郭虹汾刘健潘志美王斌田培坤李斯德
- 关键词：嵌合抗体基因转移肺肿瘤
- 用单克隆抗体筛选小细胞肺癌相关抗原基因
- 1995年
- 用分子生物学技术克隆肿瘤相关抗原基因对认识肿瘤抗原本质、深入研究肿瘤抗原的结构和功能、研究肿瘤多肽疫苗有重要意义。我们已获得一组抗人小细胞肺癌单克隆抗体，并在体外证实该抗体所识别的抗原在靶细胞有较好的特异性和较高分布密度，是多肽性抗原决定簇。在此基础上，以抗体为探针，筛选小细胞肺癌基因库，目的在于寻找编码抗体所识别抗原的肿瘤相关基因。
- 李斯德曹晓波王斌张倩莫忠根
- 关键词：小细胞肺癌肿瘤相关抗原肿瘤抗原基因多肽疫苗原基
- 抗人小细胞肺癌嵌合T细胞受体基因的构建
- 1995年
- 众所周知，T细胞受体(TCR)识别抗原与抗体识别抗原是不同的。前者识别的是抗原——主要组织相容性抗原的复合物，受MHC限制，而后者则是识别天然状态下的抗原，亲和力较强。考虑到TCR可变区部位与抗体可变区部位有众多相似之处，即其均由两条二硫键相连的多肽组成，TCR由阿尔法(α)、贝塔(β）链组成，
- 黄震宇王斌刘健李斯德
- 关键词：TCRT细胞受体基因小细胞肺癌组织相容性抗原嵌合二硫键
- 抗人小细胞肺癌单克隆抗体的重链变区基因的体外扩增、克隆和序列分析被引量：2
- 1993年
- 本文从抗人小细胞肺癌单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总RNA,合成第一链cDNA,直接用PCR技术(polymerase chain reaction)扩增出351bp的重链变区基因(V_H),克隆至pUCV_(NP)-PCR载体上,经筛选得一批插入片段为351bp的阳性克隆,经核苷酸序列分析研究,证实已获得了该单克隆抗体的重链可变区基因。
- 刘健吴文书王斌潘志美田培坤黄震宇洪锦心
- 关键词：聚合酶链反应嵌合抗体
- 一种简便的适用于特异扩增单抗可变区基因的杂交瘤细胞的RNA制备方法
- 1993年
- 在分子生物学实验中,欲合成cDNA必先制备高纯度、未降解的RNA。目前较为常用的有氯化铯超速离心,但因该法操作时间长需要昂贵的实验试剂和设备,给实验带来较大的不便。
- 刘健潘志美王斌洪锦心
- 关键词：杂交瘤细胞株RNA
- 抗人小细胞肺癌单克隆抗体基因文库的构建被引量：1
- 1994年
- 本文通过对压井循环过程的分析，建立了常规压井循环应满足了基本关系，并通过结基本关系的分析，提出了实际压井循环排量应取压井循环允许的最大排量，并给出了求取实际压井循环排量的方法和实例，最后对循环排气时的环空安全问题提出了考查办法。
- 田培坤王斌
- 关键词：小细胞肺癌单克隆抗体基因
- 抗人小细胞肺癌单克隆抗体基因文库的筛选
- 1994年
- 在引气浮选中，影响除油效率的因素主要是油粒直径、气泡直径和油粒表面的化学性质。加入表面活性剂、聚合物及无机物凝聚剂，可以降低气泡直径、增大油粒直径、降低油粒表面的电位，从而提高除油效率。
- 田培坤王斌
- 关键词：小细胞肺癌单克隆抗体基因
- 抗人小细胞肺癌T细胞受体嵌合基因的克隆
- 1997年
- 目的克隆人小细胞肺癌抗体／Ｔ细胞受体嵌合基因。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术将人小细胞肺癌单克隆抗体的变区ＶＨ、ＶＫ与Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）恒区Ｃα、Ｃβ进行拼接，构建成ＶＨＣβ、ＶＫＣα嵌合ＴＣＲ，并分别克隆至ｐＭＡＭ、ｐＸＴ１真核表达载体。结果应用ＰＣＲ中重叠延伸剪接（ＳＯＥ）方法，能简化基因拼接步骤；该嵌合基因的克隆有助于对肿瘤免疫治疗新途径的探索。
- 曹晓运朱明洁张中华王斌黄震宇李斯德
- 关键词：T细胞聚合酶链反应肺肿瘤嵌合基因
- 聚合酶链反应法扩增免疫球蛋白变区基因
- 1993年
- 用异硫氰酸胍抽提抗人小细胞肺癌单克隆抗体杂交瘤细胞株2F7的总RNA,用逆转录酶合成第一链cDNA,用PCR技术扩增出351 bp的重链变区基因(V_H)和324bp轻链变区基因(V_L),分别克隆至pUCV_(NP)-PCR和pWR13载体上,经筛选和DNA序列分析研究,证实已获得了该单克隆抗体的变区基因.
- 刘健王斌潘志美田培坤张文祥
- 关键词：聚合酶链反应免疫球蛋白杂交瘤
- 噬菌体展示的抗汉病毒ScFv基因的构建及应用于细胞内免疫的基础研究
- 1994年
- 细胞内免疫(Intracellular Immunization)是一种将抗体基因导入细胞内阻断病毒组装的一项新技术。为探索抗汉坦病毒细胞内免疫的可行性,我们用SOE(Splice by overlapping extention)
- 程卫青白雪帆杨为松徐海峰尚高峰张文祥程华旭王斌李思德
- 关键词：细胞内免疫噬菌体展示抗汉坦病毒OVERLAPPINGLINKERSCFV
