丁晨晖
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:中国农业大学生物学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 小鼠四倍体半克隆胚胎发育研究被引量:2
- 2005年
- 半克隆(Semi-Cloned)胚胎是通过注射体细胞核到未去核的卵母细胞中产生的。在半克隆胚胎中,体细胞被用来作为精子的替代物。然而,由于异常的染色体分离,构建的半克隆胚胎在激活后形成了非整倍体而导致胚胎发育受到严重影响,不能发育到期。本研究通过抑制小鼠半克隆胚胎在激活过程中染色体数目减半,避免非整倍体胚胎形成,研究四倍体半克隆(TetraploidSemi-cloned,TSC)胚胎的发育和体细胞核的掺入对胚胎发育的影响。结果显示,TSC胚胎的体外发育率显著高于二倍体半克隆胚胎,与正常受精卵及孤雌激活对照无显著性差异,但TSC胚胎的细胞数在桑椹胚和囊胚期比正常二倍体受精胚胎和孤雌激活胚胎少。通过Oct-4染色发现,TSC胚胎囊胚期内细胞团(InnerCellMass,ICM)细胞很少或者没有。移植63个四倍体半克隆胚胎到3只假孕母鼠体内,得到20个胎盘,但没有得到胎儿。组蛋白乙酰化和DNA甲基化检测显示,部分TSC胚胎在囊胚期没有形成正常受精胚胎在ICM和滋养外胚层(Trophectoderm,TE)之间的差异分布。TSC胚胎的基因表达不依赖于细胞分裂次数而依赖于发育时间。虽然TSC胚胎避免了二倍体半克隆胚胎形成非整倍体现象,但由于TSC胚胎没有ICM细胞或ICM细胞很少,所以只能形成胎盘而不能形成胎儿。本实验第一次较为全面地研究了TSC胚胎的发育,同时也为研究体细胞核再程序化、基因打靶技术提供了一种新的途径。
- 丁晨晖焦丽红陈欣洁王二耀于洋赵春丽侯晓军李雪梅季维智王柳
- 关键词:四倍体胚胎发育非整倍体
- MG132处理对克隆胚胎的影响
- <正>体细胞核被移植入去核卵母细胞后,会在卵母细胞胞浆的刺激下发生重编程,从终末分化的细胞转化为去分化细胞。细胞质对发育有着很重要的影响,现已证明小鼠卵母细胞中高水平的成熟促进因子(MPF)在供体细胞核重编程中发挥重要作...
- 丁晨晖王二耀于元松陈欣洁焦丽红王柳周琪
- 文献传递
- 两性小鼠核移植胚胎干细胞系的建立及其在胚胎干细胞多能性评估中的研究
- 2008年
- 治疗性克隆的安全性与风险性是阻碍治疗性克隆发展的关键环节之一.由于受到社会伦理问题的限制,人胚胎干细胞的多能性检测只能通过畸胎瘤的方式鉴定,与传统的小鼠生殖系嵌合鉴定方式不同.但是两种多能性检测方式之间的区别还不清楚.本研究利用遗传突变两性小鼠心肌成纤维细胞作为核移植供体细胞,构建核移植胚胎,经过体外培养获得克隆囊胚,建立核移植胚胎干细胞系.对胚胎干细胞系的鉴定结果表明,两性小鼠核移植胚胎干细胞系表达所有小鼠胚胎干细胞系多能性及特异的分子标记,如碱性磷酸酶活性,Oct4,Nanog,SSEA-1等,干细胞注射到免疫缺陷小鼠(SCID)体内能够形成含有三胚层分化附属物的畸胎瘤组织,证明两性小鼠核移植胚胎干细胞系具有多能性.但通过囊胚注射的方式获得的二倍体嵌合小鼠经过交配不能获得生殖系嵌合的小鼠,因而两性小鼠核移植胚胎干细胞系并不具有全能性,说明体内形成三胚层分化附属物的畸胎瘤组织并不能替代传统的生殖系嵌合,提示在人治疗性克隆胚胎干细胞系多能性鉴定中,仍然需要更多、更严格的标准,进而最大程度地降低治疗性克隆临床应用的风险性.
- 范勇佟曼赵春丽丁晨晖郝捷吕卓代相鹏海棠李雪梅姚汝强于洋李赞东王柳ALICE Jouneau周琪
- 关键词:体细胞核移植胚胎干细胞治疗性克隆