任大明 作品数:226 被引量:984 H指数:15 供职机构: 复旦大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 上海市教育委员会重点学科基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 环境科学与工程 更多>>
抗人端粒酶逆转录酶单链抗体基因在烟草中的表达 被引量:2 2006年 构建了含抗人端粒酶逆转录酶单链抗体基因ScFv-hTERT的植物表达载体p1304-SH,通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草.转基因烟草植株叶片总DNA的PCR,Southern b lot检测结果表明,ScFv-hTERT基因已整合进了转基因烟草植株基因组中;RT-PCR,SDS-PAGE分析证实目的基因已在烟草叶片中成功表达,竞争性ELISA的结果表明,表达的重组抗体与其抗原有良好的结合活性. 董皓林 李威 朱向莹 林娟 唐克轩 任大明关键词:转基因烟草 活性检测 淋球菌重组与减毒鼠伤寒沙门氏菌活疫苗口服免疫的初步研究 被引量:3 1998年 在克隆淋球菌膜抗原CppB基因并在大肠杆菌和减毒鼠伤寒沙门氏菌中获得高效表达的基础上,用表达CppB-LacZ融合蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌口服免疫Balb/c小鼠。ELISA检测表明被免疫小鼠血清中特异性抗体滴度可达1:160,并诱发了DTH反应,说明产生了特异的免疫反应。重组菌可在肠道中较持久地寄生,对小鼠未见有明显的毒副反应。 吴卫 林元凯 江琪 任大明 谢匡成 温文倩关键词:淋球菌 减毒 伤寒沙门氏菌 活疫苗 天蚕抗菌肽B基因嵌合表达载体的构建及其对桑树和烟草的转化研究 被引量:11 1992年 致瘤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)是一种天然的植物转化系统。根据其Ti质粒(Tumor Inducing plasmid)转移整合的分子机制,已构建了一系列外源基因的嵌合表达载体,并在一些植物中表达这些外源基因。 谢毅等按照植物偏爱的遗传密码子编码,已人工合成了天蚕抗菌肽B基因。此抗菌肽B是一种具有广谱性很强的体内外杀菌作用的昆虫免疫多肽。 吴成仓 徐静斐 曹勇伟 任大明关键词:天蚕 桑树 烟草 家蚕基因组中具有自主复制功能的高度重复序列的克隆 被引量:2 1992年 自从Struhl(1979)等第一次从酵母中分离到ARS以来,许多研究者已从链孢霉、毛霉、衣藻、烟草、玉米、大豆、果蝇、非洲爪蟾线粒体等来源的DNA分子中分离到ARS。通过对一些ARS的分子结构和DNA序列分析,并与电镜观察到的DNA复制起始点相比较,试图从ARS的结构和功能上来探讨真核生物DNA复制机理。同时希望利用ARS复制自主性与染色体上功能单位着丝粒、端粒和基因来构建人工微染色体,作为真核生物基因工程载体。 吴成仓 徐静斐 曹勇伟 任大明关键词:家蚕 基因 克隆 丙肝病毒E2基因植物表达载体的构建及对烟草的转化 2007年 丙型肝炎病毒(HCV)是导致全世界1.8亿患者急慢性肝炎的主要原因,目前还没有可利用的疫苗和有效的治疗措施。人的HCV包膜蛋白是HCV原型疫苗的吸引人的部分,目前在遗传工程领域的发展允许利用植物作为工厂生产外源蛋白。在这一研究中,构建了丙型肝炎病毒E2基因的植物表达载体,通过农杆菌介导转化烟草。经PCR和Southern blot检测,目的基因已整合到转基因植株的基因组中。为抗HCV植物疫苗的研究奠定的基础。 李凤梅 张弢 任大明关键词:E2基因 转基因 烟草 粪肠球菌中具有启动功能的DNA片段的捕获及鉴定 2006年 PCR扩增来自质粒pUC119的β-内酰胺酶基因(bla)作报告基因,克隆进质粒pNZ8037上的能被Nisin诱导的启动子PnisA下游,构建了粪肠球菌启动功能片段探测载体pNZ-bla.利用该探测载体从粪肠球菌染色体总DNA中克隆到了能在粪肠球菌中表达的一系列具有启动功能的DNA片段,将包含克隆片段的pNZ-P-bla6质粒电击转化粪肠球菌,培养转化子并检测其抗氨苄强度,结果表明其抗氨苄强度大于Nisin诱导的含pNZ-bla质粒的粪肠球菌.表明克隆的功能片段启动能力强于PnisA.在pNZ-P-bla6的启动功能片段下游Sau3AⅠ和EcoRⅠ之间接上绿色荧光蛋白基因作为标记,构建表达绿色荧光蛋白的质粒载体pNZ-P-gfp并导入粪肠球菌中,共聚焦显微镜下可以观察到绿色荧光蛋白的表达. 黄路标 张伯生 任大明关键词:乳酸菌 粪肠球菌 启动子 克隆载体 GFP 重组人白细胞介素-3在大肠杆菌中表达及纯化研究 被引量:1 1995年 将化学合成的人白细胞介素-3(hIL-3)基因与表达质粒pKK223-3重组并转化大肠杆菌JM105,重组菌在摇瓶中发酵并诱导表达,表达产量达菌体蛋白质总量的53%以上。发酵菌经超声破碎后得到包含体,经洗涤处理使包含体纯度达90%以上。用8mol/L盐酸胍溶解包含体后直接透析复性,复性液经Sephorose-SP离子交换层析,得到纯化的重组hIL-3,纯度达98%。用TF-1细胞进行体外检测活性,比活达到108单位/mg蛋白质。本研究为重组人白细胞介素-3的大规模生产提供了条件。 李全贞 任大明 胡罢生 毕惠祥 赵雨田 李英杰关键词:人白细胞介素 纯化 大肠杆菌 载脂蛋白E基因编码区及其转录调控区+113G/C多态在中国正常人群中的分布 2004年 目的 :探讨中国正常人群中载脂蛋白E(ApoE)基因编码区及其转录调控区 +113G/C多态的分布。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)和限制性片段长度多态 (RFLP)方法 ,检测ApoE基因编码区及其转录调控区 +113G/C多态各等位基因及基因型的频率分布。结果 :正常人群中ApoE基因及转录调控区 +113G/C多态基因型的分布符合Hardy Weinberg平衡。按是否含ApoEε4基因分层后 ,ε4与非ε4型人群等位基因和基因型频率分布差异均无显著意义 (基因型 χ2 =1.819,P =0 .178;等位基因 χ2 =4 .95 2 ,P =0 .0 85 )。按 +113G/C多态各基因型分层后 ,各人群间ApoE基因型差异无统计学意义 (G/G与非G/Gχ2 =1.14 5 ,P =0 .95 ;C/C与非C/Cχ2 =3.997,P =0 .5 5 )。但ε4等位基因与C/C基因型连锁分离的概率为 0 ,ε4纯合基因型与 +113G纯合基因型共分离的概率亦为 0。结论 :中国正常人群中ε4等位基因与 +113C纯合基因型及ε4纯合基因型与 +113G纯合基因型共分离相当罕见 。 赵晓萍 谢惠君 郑惠民 汤国梅 丁素菊 任大明关键词:编码区 软骨血管生成抑制因子抑制血管生成及其抗肿瘤作用的研究 1998年 测定了小牛软骨血管生成抑制因子(cartilageangiogenesisinhibitoryfactor,CAIF)对血管内皮细胞的细胞毒作用、对内皮细胞骨架系统及其运动迁移的抑制效应、对小鼠肿瘤生长的抑制效应.结果表明CAIF对血管内皮细胞产生明显的细胞毒作用,对内皮细胞骨架具有明显的抑制作用,能显著抑制内皮细胞的运动迁移,并显著抑制小鼠肿瘤的生长.提示CAIF的抗肿瘤作用机制可能是:通过抑制血管内皮细胞的骨架系统及其分裂增殖,并抑制内皮细胞的运动迁移,从而抑制血管内皮芽的形成和新生血管的生成.由于切断了肿瘤的营养供应及血道转移途径,从而抑制肿瘤的生长和转移. 沈先荣 吉冬梅 贾福星 黄建生 刘为平 任大明 姚锡惠 龚叶芳 王玲 雷呈祥 杨哓燕 孙加红关键词:软骨 血管生成 抗肿瘤作用 肿瘤防治 新生隐球菌CAP59荚膜缺陷株URA5突变株的筛选和鉴定 目的:筛选和鉴定新生隐球菌CAP59荚膜缺陷株URA5突变株。方法:用硫酸二乙酯化学诱导新生隐球菌CAP59荚膜缺陷株;利用5-氟乳清酸(5—FOA)反筛选尿嘧啶合成基因突变株;用带有URA5基因的质粒pKU对突变株进行... 郭秀军 廖万清 任大明 王荫榆 霍克克关键词:隐球菌