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任道全

作品数:4 被引量:5H指数:2
供职机构:湖南师范大学生命科学学院更多>>
发文基金:教育部留学回国人员科研启动基金湖南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域:生物学更多>>

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 4篇生物学

主题

  • 4篇RAC1
  • 4篇CDC42
  • 3篇细胞
  • 3篇活细胞
  • 3篇FRET
  • 2篇信号
  • 2篇信号转导
  • 2篇信号转导通路
  • 2篇通路
  • 2篇转导
  • 2篇转导通路
  • 2篇RAC
  • 1篇鸟苷
  • 1篇RHO

机构

  • 4篇湖南师范大学

作者

  • 4篇任道全
  • 3篇张青岩
  • 3篇郭向荣
  • 3篇孙斌
  • 2篇邱义兰
  • 2篇刘如石
  • 1篇刘一舟

传媒

  • 1篇生命科学研究
  • 1篇激光生物学报
  • 1篇分子细胞生物...

年份

  • 2篇2009
  • 2篇2008
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
Rac1、Cdc42单分子探针在活细胞中表达差异的比较
2009年
利用构建的Rac1、Cdc42单分子探针,探索其在NIH3T3、Hela、COS7等活细胞中的最佳表达效果.结果表明在胞浆中表达的探针其荧光值在诱导5~10 min达到最大值,随着时间的推移,其荧光强度逐渐减弱;在细胞膜上表达的探针也是相似的.DNA/转染试剂为1∶3时的表达效果最佳;每毫升转染培养基的质粒DNA含量为4或6μg时,其转染表达可达到最佳;在不同种类的细胞中表达时其差异不明显;在细胞的不同部位表达差异不明显.
任道全孙斌张青岩刘一舟郭向荣
关键词:RAC1CDC42FRET
定量成像诱导激活的Rac1、Cdc42信号转导通路
Rho鸟苷三磷酸酶(Rho GTPases),包括Rac和Cdc42,是一类在细胞信号转导领域中研究较多的蛋白分子,其主要调节细胞转录、细胞迁移、细胞形态和基因表达等一系列细胞过程。在细胞信号转导过程中,RhoGTPas...
任道全
关键词:信号转导通路
监测活细胞中诱导激活的Rac、Cdc42信号转导通路的FRET单分子探针被引量:3
2008年
Rho家族鸟苷三磷酸酶,包括Rac1和Cdc42等,参与调节细胞形态、细胞迁移、转录激活和基因表达等一系列细胞过程。根据FRET(Fluorescent resonance energy transfer)技术原理,构建了包含红色荧光蛋白dsRed1与青色荧光蛋白ECFP的全长cDNA,效应分子Pak1或N-WASP的GTP酶联结区域,信号分子Rac1或Cdc42的全长cDNA的几种单分子探针。转染NIH3T3或Hela细胞,以胰岛素、缓激肽为诱导剂,分别激活Rac1、Cdc42信号转导通路。离体荧光光谱检测表明,在两种转染动物细胞中均产生了FRET现象。不同信号转导通路的FRET效率,在诱导激活5min后,均达到最高值,但增加幅度有显著差异。随着诱导时间的延长,FRET效率下降,但下降速率在不同信号转导通路间差异显著。Rac1、Cdc42激活试验证实,诱导激活的转染细胞中,Rac1、Cdc42均处于激活状态(GTP-bound),其在不同诱导时间的相对激活程度与FRET效率表现相同。诱导激活的Rac1、Cdc42信号转导通路,分别导致了转染活细胞中片状伪足、线状伪足的产生。这表明,采用这些单分子探针,可直接监测激活的信号转导通路,在活细胞中的3D时空分布变化图像及其产生的细胞学效应。采用这些单分子探针,分析、判断了一些调节蛋白对Rac1、Cdc42的GEF或GAP特性,从而提供一种可大大简化现有的鉴定待测蛋白分子的方法。
孙斌任道全张青岩邱义兰刘如石郭向荣
关键词:FRETRAC1CDC42
监测活细胞中诱导激活的Rac、Cdc42时空图像的FRET单分子探针的构建被引量:2
2008年
以PCR方法从人脑cDNA基因文库扩增Rac1、Cdc42cDNA全序列及其效应蛋白基因Pak1、N-WASP的GTP酶联结区域(GBD)序列,从dsRed1-N1质粒扩增红色荧光蛋白dsRed1cDNA全序列。将cDNA序列依次定向克隆至pECFP-N1质粒载体,获得基于FRET原理,包含dsRed1,Pak1或N-WASP的GBD,Rac1或Cdc42,ECFP编码序列的单分子探针。在dsRed1的C末端加入一段CAAM法尼基化基序,构建包含EGFP,Pak1的GBD,Rac1或Cdc42,dsRed1-CAAM的质膜特异表达的单分子探针。采用这两种探针,可用于监测活细胞中诱导激活的Rac1、Cdc42信号转导通路的3D时空图像,检测待测蛋白分子的GEF或GAP活性。
张青岩任道全孙斌邱义兰刘如石郭向荣
关键词:RAC1CDC42FRET
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