倪小平
- 作品数:8 被引量:6H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 基于HEK细胞无载体固定化培养技术的重组腺病毒载体高效生产工艺
- 重组腺病毒载体是基因治疗研究和临床应用中将治疗基因有效地介入靶细胞和/或靶组织的最常用病毒载体。重组腺病毒载体的生产通常是通过将其感染人胚肾细胞(humanembryonickidneycells,HEK细胞)、使其在H...
- 刘兴茂刘红吴本传李世崇叶玲玲王启伟倪小平陈昭烈
- 文献传递
- 流体动力对HEK293细胞的细胞团形成及细胞生长和代谢的影响被引量:2
- 2006年
- 利用HEK293细胞在悬浮培养中具有聚集成团的体外培养特性,在250mL的Bellco的搅拌培养体系中,以HEK293细胞团的粒径、细胞数、细胞活力、葡萄糖比消耗率(qglc)、乳酸比产率(qlac)和乳酸转化率(Ylacglc)为观察指标,考察HEK293细胞在搅拌速度分别设置为25、50、75和100rmin的培养条件下的细胞团形成、粒径分布以及细胞生长和代谢。HEK293细胞在搅拌速度为50rmin和75rmin培养条件下所形成细胞团的粒径大小适中、离散度小。培养7d后,HEK293细胞团的平均粒径分别为201μm和175μm,其中粒径≥225μm的细胞团所占比例均低于10%;在整个培养过程中,细胞团中的HEK293细胞活力维持在90%以上,qglc、qlac和Ylacglc等反映HEK293细胞代谢的参数保持相对恒定。实验结果提示:合适的搅拌速度所产生的流体动力既可使细胞团的粒径控制在合适的范围内,也可为细胞团中的HEK293细胞提供基本满足其正常生长和代谢需要的物质传递效率。
- 刘红刘兴茂吴本传叶玲玲倪小平黄培堂陈昭烈
- 关键词:流体动力HEK293细胞代谢
- Ca^2+对悬浮培养HEK293细胞的细胞团形成、细胞生长和代谢的影响被引量:1
- 2006年
- 利用HEK293细胞在悬浮培养中具有聚集成团的体外培养特性,在250ml的Bellco的搅拌培养体系中,以细胞团粒径、细胞粒径、细胞数、细胞活力、葡萄糖比消耗速率(qglc)、乳酸比生产速率(qlac)和乳酸对葡萄糖得率(Ylac/glc)为观察指标,考察了HEK293细胞在Ca^2+浓度设置为0μmol/L、250μmol/L、500μmol/L、750μmol/L和1000μmol/L的搅拌培养体系中的细胞团形成、细胞生长和代谢。实验发现:培养基中的Ca^2+浓度决定着HEK293细胞在悬浮培养中能否形成细胞团并影响着细胞团的粒径分布和细胞团内细胞相互连接的紧密程度;在250~1000μmol/L的Ca^2+浓度范围内,眦K293细胞团的平均粒径与培养基中的Ca^2+浓度成正比;Ca^2+浓度对以细胞团的形式悬浮培养的HEK293细胞的生长和代谢无明显的影响。实验结果提示,Ca^2+浓度是调节HEK293细胞团粒径分布、维持悬浮细胞团中HEK293细胞正常生长和代谢的有效控制参数。
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- 关键词:钙离子HEK293细胞代谢
- 无载体固定化培养模式下HEK293细胞的生长和代谢特征被引量:3
- 2006年
- 利用HEK293细胞在悬浮培养体系中具有聚集成团的体外培养特性,在250ml的spinnerflask搅拌式细胞培养瓶中以悬浮细胞团的形式实施HEK293细胞的无载体固定化培养,以细胞密度、细胞活力、细胞团粒径分布和葡萄糖比消耗率(qglc)、乳酸比产率(qlac)、乳酸转化率(Ylac/glc)、氨基酸消耗为观察指标,同时设置静止培养体系作为参照,考察无载体固定化培养模式下的HEK293细胞生长和代谢特征。观察结果表明,HEK293细胞在搅拌式细胞培养瓶中无载体固定化培养和在组织培养瓶中静止贴壁培养表现为基本相同的细胞生长和代谢特征,平均粒径小于300μm的细胞团中的物质传递能够满足HEK293细胞维持正常生长和代谢的基本需要。HEK293细胞的无载体固定化培养便于实施灌注操作、提高生物反应器单位体积的生产效率。
- 刘兴茂刘红吴本传叶玲玲李世崇倪小平陈昭烈黄培堂
- 关键词:固定化培养HEK293细胞代谢
- 哺乳动物细胞无载体固定化培养方法
- 本发明公开了一种哺乳动物细胞无载体固定化培养方法,包括以下步骤:(1)促使哺乳动物细胞在悬浮培养条件下形成细胞团(2)控制细胞团的平均粒径(3)利用细胞团的自然沉降和旋转过滤器截流细胞团,更换培养基或连续灌注培养基(4)...
- 陈昭烈刘兴茂刘红吴本传叶玲玲倪小平王启伟于蕊
- 文献传递
- 一种高效生产重组腺病毒载体的方法
- 本发明涉及一种高效生产重组腺病毒载体的方法,属于细胞工程技术领域。以HEK细胞为重组腺病毒载体的生产细胞,使游离的细胞在悬浮培养条件下形成细胞团或使细胞团解聚为游离细胞,利用细胞团的自然沉降和/或旋转过滤器截流细胞团,更...
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- 一种高效生产重组腺病毒载体的方法
- 本发明涉及一种高效生产重组腺病毒载体的方法,属于细胞工程技术领域。以HEK细胞为重组腺病毒载体的生产细胞,使游离的细胞在悬浮培养条件下形成细胞团或使细胞团解聚为游离细胞,利用细胞团的自然沉降和/或旋转过滤器截流细胞团,更...
- 陈昭烈刘红刘兴茂吴本传黄培堂李世崇倪小平王启伟
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- 哺乳动物细胞无载体固定化培养方法
- 本发明公开了一种哺乳动物细胞无载体固定化培养方法,包括以下步骤:(1)促使哺乳动物细胞在悬浮培养条件下形成细胞团;(2)控制细胞团的平均粒径;(3)利用细胞团的自然沉降和旋转过滤器截流细胞团,更换培养基或连续灌注培养基;...
- 陈昭烈刘兴茂刘红吴本传叶玲玲倪小平王启伟于蕊
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