冯兰芳
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：南华大学基础医学院药物药理研究所更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅优秀青年基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Bcl-XL siRNA对人胃腺癌MGC-803细胞药物敏感性的影响被引量：3
- 2006年
- 目的:研究靶向Bcl-XL基因的小干扰RNA对胃腺癌MGC-803细胞Bcl-XL基因表达的作用及对药物敏感性的影响。方法:构建的Bcl-XLsiRNA载体或阴性siRNA并稳定转染到胃癌MGC-803细胞,G418抗生素筛选阳性克隆,克隆扩大培养,免疫荧光观察细胞蛋白表达。用不同浓度的5-FU或DADS处理稳定转染细胞,MTT观察细胞增殖的变化。用一种浓度的5-FU或DADS处理稳定转染细胞,流式细胞术观察亚G1细胞的比例。结果:免疫荧光结果表明,Bcl-XLsiRNA稳定转染组细胞中Bcl-XL蛋白的表达比阴性siRNA稳定转染组细胞Bcl-XL基因的表达均有明显的降低。当不同浓度的5-FU(13、130、1 300、13 000 mg.L-1)或DADS(20、35、50mg.L-1)处理细胞24 h后,MTT结果表明Bcl-XLsiR-NA细胞组A570吸光度值较阴性siRNA细胞组和未转染对照明显降低,细胞生长抑制率明显增高。5-FU或DADS药物的IC50值在Bcl-XLsiRNA细胞组有明显降低。使用5-FU(130 mg.L-1)或DADS(50mg.L-1)处理细胞24 h后,流式结果表明,Bcl-XL-siRNA细胞组较阴性siRNA和正常对照细胞组亚G1细胞比例有明显增高。结论:Bcl-XL siRNA下调了MGC-803细胞Bcl-XL基因的表达;Bcl-XLsiRNA能够促进MGC-803细胞凋亡,增强细胞对化疗药物的敏感性。
- 钟苗雷小勇冯兰芳朱炳阳唐圣松廖端芳
- 关键词：MGC-803细胞DADS
- Bcl-2 siRNA增强HepG2细胞对5-氟尿嘧啶敏感性被引量：1
- 2007年
- 目的观察Bcl-2 siRNA对人类肝癌细胞HepG2 5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的影响。方法Bcl-2 siRNA表达载体构建并稳定转染至肝癌细胞HepG2中,用G418筛选稳定的阳性细胞克隆。用RT-PCR检测Bcl-2 mRNA水平,免疫荧光检测目的基因Bcl-2蛋白水平的表达。用131、30、1300和13 000 mg/L 5-FU处理稳定转染细胞,用MTT观察细胞对药物敏感性的影响,用流式细胞术观察细胞凋亡情况。Western blot检测Bcl-2和Bax蛋白水平。结果5-FU处理细胞24 h,Bcl-2 siRNA转染组的细胞生长抑制率明显高于阴性载体转染组和正常细胞;Bcl-2 siRNA转染组细胞凋亡率高于正常细胞和阴性载体转染组;在Bcl-2表达下调时,Bax蛋白表达水平不变。结论siRNA下调目的基因Bcl-2能增强人类肝癌细胞HepG2对5-FU的敏感性;HepG2细胞对5-FU的敏感性增强与Bax/Bcl-2的比例增高有关。
- 殷杰钟苗冯兰芳朱炳阳唐圣松雷小勇
- 关键词：BCL-2RNA干扰HEPG2细胞5-氟尿嘧啶
- Bcl-2,Bcl-xlsiRNA对HepG2细胞药物敏感性的影响
- 目的:观察Bcl-2 siRNA和Bcl-xl siRNA对人类肝癌细胞HepG2药物敏感性的影响和作用机制。 方法:碱裂解法提取psiBcl-2和psiBcl-xl载体,共转染到肝癌细胞HepG2中,用G418筛选稳...
- 冯兰芳
- 关键词：HEPG2细胞药物敏感性碱裂解法BCL-2基因
- 文献传递
- Bcl-2 siRNA抑制HL-60细胞bcl-2基因表达被引量：3
- 2005年
- 目的应用RNA干扰技术观察Bcl2siRNA对白血病细胞HL60中bcl2基因表达的影响,探讨siRNA技术在白血病治疗中的作用。方法利用化学合成法体外化学合成Bcl2siRNA,将Bcl2siRNA与HL60细胞共孵育,用MTT法、荧光染色观察细胞增殖及凋亡情况,用RTPCR检测Bcl2mRNA水平,用荧光染色测Bcl2蛋白水平。结果Bcl2siRNA与HL60细胞共孵育48h后,HL60细胞凋亡率增加,Bcl2mRNA水平下调,Bcl2蛋白表达水平降低。转染GAPDHsiRNA组的细胞对Bcl2表达无影响。结论Bcl2siRNA能够特异性降低Bcl2mRNA水平及蛋白质的表达,促进HL60细胞凋亡。
- 雷小勇燕春艳涂玉林钟苗冯兰芳廖端芳
- 关键词：BCL-2SIRNAHL-60
