占利
- 作品数：87 被引量：432H指数：10
- 供职机构：浙江省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- ICU患者肺部感染危险因素分析
- 目的:对ICU患者肺部感染的危险因素进行分析并制定相应的护理对策。方法:以我院2010年-2013年ICU经机械通气后的228例重症患者作为研究对象,对其基本资料、护理方式、治疗方案等方面进行比较,并分析肺部感染的危险因...
- 沈彩芳占利
- 关键词：重症监护气管插管肺部感染护理对策
- 文献传递
- 一种香港海鸥型菌的实时荧光PCR检测试剂盒及应用
- 本发明公开了一种香港海鸥型菌的实时荧光PCR检测试剂盒及应用，所述试剂盒包括PCR扩增反应液、阳性对照和阴性对照，所述PCR扩增反应液包括特异性上游引物、特异性下游引物、荧光探针、PCR缓冲液、脱氧三磷酸核苷混合物和DN...
- 梅玲玲张俊彦占利朱敏潘雪霞潘军航龚璞汪炜杨勇
- 文献传递
- 浙江省丽水市首起非O1群霍乱弧菌食物中毒分子生物学溯源分析被引量：4
- 2007年
- 目的利用分子生物技术了解引起食物中毒的非O1群霍乱弧菌携带毒力基因情况及耐药性特征。方法对检出的非O1群霍乱弧菌菌株进行耐药性分析,同时采用聚合酶链反应(PCR)方法进行霍乱弧菌肠毒素基因(Ctx)、小带联结毒素基因(Zot)、辅助霍乱肠毒素(Ace)基因的检测,并参照美国CDC PulseNet的统一方法进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型并作同源性分析。结果从8例患者和8份食品标本中分离到7株非O1群霍乱弧菌,未检出Ctx、Zot、Ace等毒素基因,检出溶血素,Dienes试验和脉冲场凝胶电泳图谱显示病人分离株和剩余食物检出株同源。经耐药性分析,菌株除对复方新诺明、氨苄西林100%耐药外,对其余抗生素均较敏感。结论通过实验证实本次食物中毒是由聚餐者共同食用冷菜凤爪所致,流行病学追溯从患者共同食用冷菜和海产品中非O1群霍乱弧菌毒力基因、耐药性和脉冲场凝胶电泳分析为同源菌株。
- 林仁卫叶菊莲罗芸占利
- 关键词：非O1群霍乱弧菌食物中毒毒力基因
- 某区婚检人群艾滋病性病知识干预效果评价被引量：9
- 2004年
- 目的 :通过妇幼保健系统对成都市龙泉区婚检人群进行艾滋病性病预防的宣传干预 ,并对其效果进行评价。方法 :随机抽取在成都市龙泉区妇幼保健院进行婚前检查的男女 ,进行艾滋病性病知识的宣传干预 ,收集干预前后的调查问卷 ,分析干预对该婚检人群艾滋病性病预防知识和态度的影响。结果 :干预后 ,目标人群对艾滋病性病的认知程度显著提高 ,如预防性传播艾滋病的知晓率由干预前的 5 4 .5 5 %显著提高到干预后的 95 .5 9% ,对预防母婴传播艾滋病的知晓率由干预前的3.36 %到干预后的 83.2 4 % ;同时 ,干预对象对艾滋病和艾滋病人的态度有明显改变 ,如对不用隔离艾滋病感染者的知晓率由干预前的 33.33%到干预后的 70 .11%。结论 :发挥和利用妇幼保健系统婚检和婚前教育的优势 ,实施艾滋病性病预防的宣传干预 ,具有可持续性和易操作性 ,干预效果好 ,利于推广应用。
- 占利王志英潘晓莉孟玲文华刘祥匡彬方从祝许欣裴晓方
- 关键词：艾滋病病性婚检人群性病知晓率随机抽取
- LAMP技术快速检测产肠毒素性大肠埃希菌的LTⅠ毒素被引量：4
- 2009年
- 目的:建立环介导恒温扩增快速检测肠毒素性大肠埃希菌的LTⅠ毒素的方法。方法:采用环介导恒温扩增反应(LAMP)技术扩增肠毒素性大肠埃希菌的LTⅠ毒素特异性基因,优化反应条件,并与传统PCR比较。结果:与传统的PCR技术相比,LAMP法更加简便快速,且在等温条件下进行,具有更高的灵敏性及特异性。结论:该方法灵敏度高,特异性强,操作简便快速,不需要复杂仪器设备,为检测产肠毒素性大肠埃希菌的LTⅠ毒素提供了一个快速简便的新方法。
- 占利叶菊莲罗芸程苏云梅玲玲杨婷婷
- 猪链球菌核酸检测量值溯源研究及方法评估
- 2011年
- 目的针对病原微生物检测中急需解决的计量标准和量值溯源问题，建立猪链球菌核酸量值荧光定量PCR方法，研制猪链核酸检测标准物质，探索等效一致的核酸测量技术。方法根据已报告的DNA序列设计并合成种特异性16SrRNA引物，建立荧光定量WaR方法，摸索最佳上、下游引物配比浓度，利用已知核酸浓度的标准品作标准曲线并获得0值与样本起始拷贝数的关系，对方法的特异性、灵敏度、稳定性和不确定性进行评估，并进行DNA标准品效期实验。结果建立的猪链球菌DNA实时定量PCR方法，最佳引物浓度为上游0．6μmoL／L，下游0．3μmol／L。方法的灵敏度为18．6DNA拷贝数，DNA最佳检出浓度为1．86×102—1．86×104拷贝／10vL反应体系。0值只与模板的DNA起始浓度有关（F：597．60，P〈0．01），与不同的实验时间及实验人员（F=0．60、1．90，P〉0．05）无关。0值的不确定度为0．46％～5．40％。DNA标准品4oC可保存半年以上，而一60℃保存则可达1年以上。结论建立的荧光定量PCR方法特异性及稳定性良好，可用于猪链球菌核酸量值测定；制备的核酸标准物质具备国际计量标准，且稳定性好，可作为猪链球菌核酸检测的量值溯源和传递示范的标准物质。
- 杨婷婷王复甦占利程苏云朱水荣徐宝祥
- 关键词：链球菌荧光定量PCR
- 过氧化氢汽体对细菌芽孢与细菌繁殖体杀灭效果的比较被引量：11
- 2014年
- 目的比较细菌芽孢与细菌繁殖体对过氧化氢汽体（VPHP）的抗力,为选择VPHP生物指示剂提供参考。方法采用载体定量杀菌实验方法,比较某过氧化氢汽体发生器发生的VPHP对两组常用消毒试验指标菌芽孢与金黄色葡萄球菌杀灭效果,以评价此两种细菌芽孢作为VPHP生物指示剂的可能性。结果该VPHP发生器在20 m^3空间内运行0.5-1.0 h,室内中心点过氧化氢浓度均值为1 972-2 615 mg/m^3;运行1.5-2.5 h,室内中心点过氧化氢浓度均值为2 474-1 070 mg/m^3。启动该VPHP发生器运行2.5 h（一周期）,对不锈钢载体上的金黄色葡萄球菌、枯草杆菌黑色变种芽孢、嗜热脂肪杆菌芽孢杀灭对数值分别为2.32、4.18、〉5.00。结论该VPHP发生器在其设定的运行周期内,对金黄色葡萄球菌的杀灭效果明显低于两种细菌芽孢,提示仅以此两种细菌芽孢作为VPHP生物指示剂存在局限性。
- 魏兰芬潘协商张磊占利许激朱一凡
- 关键词：细菌芽孢细菌繁殖体生物指示剂
- 12小时PCR技术快速检测沙门菌被引量：10
- 2002年
- [目的]本课题根据致痫性沙门菌的invA基因序列设计引物,进行PCR反应,扩增出389bp的特异性片断,从而检测出目标菌。[方法]将试验菌种BPV中非选择性增菌6h:45min沸水浴破细胞,释放染色体DNA制作模板:PCR扩增约3h（1:95℃5min预变性:2:95℃1.5min变性3:62℃lmin退火:4:72℃ 45S延伸:5:72℃7min延长其中4至2步循环35次）。[结果]所得扩增产物经1.5％的琼脂糖凝胶电泳约1h,紫外灯下可见扩增条带。[结论]通过调节Mg2+浓度,引物浓度和模板量和纯化方法,优化反应条件,初步建立了一种12h内快速检测沙门菌的方法,灵敏度可达40-50cfu/ml。
- 裴晓方文华占利许欣
- 关键词：沙门菌PCR技术
- 淋球菌外膜蛋白PI基因重组子的构建和表达被引量：1
- 2005年
- 目的 扩增四株淋球菌外膜蛋白 PI基因 ,构建 p ET30 b- PI- NG重组子 ,在大肠杆菌中诱导表达外膜蛋白 PI。方法 采集临床淋球菌四株 ,提取细菌基因组 DNA,PCR扩增外膜蛋白 PI基因 ,与克隆载体 p BS- T连接 ,构建 p BS- T- PI- NG重组子 ,测序 ,目的基因插入表达质粒载体 p ET30 b中 ,构建 p ET30 b- PI NG重组子 ,转化表达宿主大肠杆菌 BL 2 1(DE3) ,IPTG诱导蛋白质表达 ,SDS- PAGE初步分析。结果 成功构建了四株淋球菌的p ET30 b- PI大肠杆菌表达重组子 ,经 IPTG诱导表达后 ,其中三株获得表达的目的蛋白 PI。结论 本研究为 PI蛋白免疫学特性的研究、抗体制备、以及预防淋病疫苗的研制奠定了基础。
- 文华占利汪东篱许欣雍刚裴晓方
- 关键词：淋球菌蛋白质表达
- 耐辐射奇球菌超氧化物歧化酶基因的克隆和表达被引量：4
- 2005年
- 目的 构建耐辐射奇球菌 (D.radiodurans)锰超氧化物歧化酶 (Mn- SOD)基因的原核表达重组子 ,并在 E.coli BL 2 1(DE3)中表达。方法 用 PCR方法自 D. radiodurans基因组中扩增 Mn- SOD目的片段。将该基因与原核表达质粒载体 p ET- 30 a(+)连接 ,构建重组质粒 p ET- SOD,并转化表达宿主菌 E.coli BL 2 1(DE3)。用异丙基硫代 -β- D-半乳糖苷 (IPTG)诱导重组 SOD蛋白表达 ,SDS- PAGE分析表达产物。结果 获得了 D . radioduransMn- SOD基因的 p ET原核表达重组质粒 ,该质粒经 IPTG诱导能在 E.coli BL 2 1(DE3)中高效表达目的蛋白 ,蛋白活性可达 5 180 0 U / g湿菌体。结论 成功构建了原核表达重组质粒 p ET- SOD,实现了 SOD在原核细胞中的高效表达 ,表达产物活性较高 ,为重组 D. radiodurans Mn- SOD的进一步研究和应用奠定了基础。
- 孟玲许欣汪东篱占利裴晓方
- 关键词：耐辐射奇球菌超氧化物歧化酶基因克隆
