您的位置： 专家智库 > >

孙卫华

作品数：6 被引量：17H指数：2
供职机构：军事医学科学院野战输血研究所更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 4篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 4篇农业科学
  • 1篇生物学
  • 1篇轻工技术与工...
  • 1篇医药卫生

主题

  • 5篇病毒
  • 3篇牛病
  • 3篇牛病毒性
  • 3篇牛病毒性腹泻
  • 3篇牛病毒性腹泻...
  • 3篇牛病毒性腹泻...
  • 3篇腹泻
  • 3篇腹泻病
  • 3篇腹泻病毒
  • 3篇病毒性腹泻
  • 3篇病毒性腹泻病
  • 3篇病毒性腹泻病...
  • 2篇荧光
  • 2篇荧光定量
  • 1篇蛋白
  • 1篇荧光PCR检...
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇舌病
  • 1篇实时荧光
  • 1篇实时荧光定量

机构

  • 5篇军事医学科学...
  • 2篇华中农业大学
  • 1篇南方医科大学
  • 1篇中国动物卫生...
  • 1篇解放军第30...

作者

  • 5篇孙卫华
  • 5篇章金刚
  • 4篇孙宇
  • 4篇史利军
  • 3篇尹惠琼
  • 2篇吕茂民
  • 1篇张兰兰
  • 1篇杨姝
  • 1篇黎诚耀
  • 1篇张燕霞
  • 1篇李晓成

传媒

  • 2篇中国兽医学报
  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇中国动物检疫
  • 1篇第四届全国免...

年份

  • 2篇2009
  • 3篇2008
共 6 条 记 录，以下是 1-5
全选 清除 导出
排序方式：
牛病毒性腹泻病病毒荧光定量PCR检测体系的建立与评价被引量：9
2009年
基于实时荧光定量PCR技术建立了一种有效地检测牛病毒性腹泻病病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)核酸的方法。对BVDV基因组进行同源比对,选取5′UTR区作为扩增目的区,经软件分析后设计特异扩增引物,扩增片段长度为203 bp。选用SYBR染料作为扩增时信号指示剂,经扩增曲线分析表明,建立的方法可有效地检测BVDV。检测体系可检测到102copies/μL的样品拷贝数。故本研究建立的BVDV实时定量检测体系可用于易感动物、牛源血液生物制品及其他可能感染或污染BVDV样品的检测。
史利军孙宇尹惠琼孙卫华吕茂民章金刚
关键词：牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量PCR
牛病毒性腹泻病毒荧光定量PCR检测体系的建立与评价
本研究基于实时荧光定量PCR技术建立了一种有效的检测BVDV核酸的方法。对BVDV基因组进行同源比对，选取5’-UTR区作为扩增目的区，经软件分析后设计特异扩增引物，扩增片段长度为203bp。选用SYBR染料作为扩增时信...
史利军尹惠琼孙宇孙卫华章金刚
关键词：牛病毒性腹泻病免疫学检验荧光PCR检测
文献传递
蓝舌病毒群特异性RT-PCR检测技术及其应用被引量：2
2008年
目的:建立一种适于蓝舌病毒(BTV)群特异性基因检测的RT-PCR方法。方法:根据本实验室设计的一对BTVNS1基因通用型检测引物建立BTV群特异性RT-PCR检测技术;对不同血清型BTV及鹿流行性出血热病毒(EHDV)进行检测,验证其特异性;同时,利用该方法检测血清模拟样品及抗病毒血清样品。结果:所设计的检测方法特异性好,与EHDV无交叉反应,可检测至少17个血清型BTV,并能有效检出不同病毒浓度的模拟样品及不同型的血清样品。结论:建立的RT-PCR方法可用于BTV群的特异性通用检测。
尹惠琼张燕霞孙宇张兰兰孙卫华杨姝李晓成章金刚
关键词：蓝舌病毒BTV
牛病毒性腹泻病毒E^(rns)-E2融合蛋白在果蝇S2细胞中的表达与鉴定被引量：2
2008年
目的:利用果蝇S2细胞表达牛病毒性腹泻病毒(BVDV)Erns-E2融合蛋白,并对其抗体结合能力进行鉴定。方法:用RT-PCR方法扩增BVDV NADL株Erns和E2蛋白的编码基因,利用(G4-S)3柔性15肽基因将扩增的2个基因连接,再与昆虫表达载体pMT/BiP/V5-His连接构建重组表达载体pMT/BiP/V5-His-Erns-E2,将后者与筛选质粒pCoBlast共转染果蝇S2细胞后表达Erns-E2融合蛋白,并对表达产物进行鉴定。结果:SDS-PAGE结果表明,融合蛋白相对分子质量为76800;Western blotting检测表明,该融合蛋白具有与BVDV抗体良好的结合能力。结论:BVDV的Erns-E2融合蛋白能在果蝇S2细胞中进行表达;经鉴定,表达产物具有良好的抗体结合能力,可用于抗原检测。
孙宇史利军孙卫华章金刚
关键词：牛病毒性腹泻病毒E2蛋白
西尼罗病毒E蛋白结构域Ⅲ在昆虫S2细胞中的表达与鉴定被引量：4
2008年
根据GenBank中发表的西尼罗病毒(WNV)E domainⅢ基因序列设计1对引物,用PCR方法扩增domainⅢ基因片段,回收目的基因片段定向克隆入果蝇表达载体pMT/B/V5,构建重组表达载体pMT-DⅢ。测序验证正确后,用脂质体转染法与辅助质粒pCoBlast共转染果蝇S2细胞,通过Blasticidin进行加压筛选,获得了抗性细胞S2-DⅢ。提取S2-DⅢ细胞的基因组DNA,用PCR方法检测目的基因在果蝇S2细胞中的整合与表达。用硫酸铜溶液诱导表达,收集无血清的细胞表达上清,样品浓缩后进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果表明,研究成功构建了重组表达载体pMT-DⅢ,转染细胞经12mg/L的Blasticidin筛选及鉴定后获得了稳定表达WNV E do-mainⅢ蛋白的果蝇S2细胞株。
史利军吕茂民黎诚耀孙卫华章金刚
关键词：西尼罗病毒E蛋白
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0