孙玉静
- 作品数：18 被引量：47H指数：4
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 树突状细胞表面HSP70受体介导的内化作用被引量：1
- 2006年
- 目的研究树突状细胞(DCs)表面HSP70受体介导的内化作用。方法实验分为3组:HSP70受体封闭组、非受体封闭组和对照组,采用流式细胞仪检测C57BL/6小鼠骨髓来源DCs内化FITC标记的HSP70阳性细胞率。结果受体封闭组50μgHSP70可使DCs表面受体饱和;受体饱和后随HSP70-FITC用量的升高,HSP70-FITC阳性细胞数呈正比性增高;非受体封闭组应用50μgHSP70-FITC与100μgHSP70-FITC时HSP70-FITC阳性细胞率均达到90%以上且组间差别不大。结论DCs表面HSP70受体介导的内化作用是DCs摄取抗原的主要途径,且具有饱和性和优先性的特点。当受体饱和后,非受体介导的内化作用可能在DCs内化HSP70过程中起作用并且呈剂量依赖性。
- 葛伟隋延仿孙玉静曹云新司少艳张秀敏
- 关键词：热休克蛋白质70树突细胞内化
- 肿瘤特异性抗原纳米乳剂的制备及抗肿瘤免疫效应被引量：18
- 2005年
- 目的制备包裹基因工程MAGE1HSP70的纳米乳剂,研究其生物学特性及抗肿瘤免疫效应。方法采用界面聚合法,制备包裹MAGE1HSP70的纳米乳剂(NEMAGE1HSP70),于电镜下观察其形态并测量其粒径,凝胶层析法检测纳米乳剂包裹率、载药量、稳定性及体外释药特性。用NEMAGE1HSP70免疫小鼠,运用酶联免疫斑点法(ELISPOT)和细胞毒性杀伤实验(LDH)检测了NEMAGE1HSP70激活机体细胞免疫反应的状况。结果成功地制备出粒径为(25±10)nm的纳米乳剂,包裹率为91%,载药量0091g·L-1,4℃放置6mon后性质稳定。体外释药特性显示有70%的蛋白释放在24h内完成。ELISPOT和LDH显示NEMAGE1HSP70可以激活机体免疫反应产生针对MAGE1的CTL,特异性杀伤表达MAGE1的肿瘤细胞。结论NEMAGE1HSP70具有良好的包裹率和载药量,性质稳定且具有缓释作用,可以有效激活机体免疫反应产生针对特异性抗原MAGE1的CTL,是一种很有希望的新型抗肿瘤疫苗。
- 孙玉静隋延仿吴道澄葛伟叶菁张秀敏
- 关键词：纳米乳剂肿瘤特异性抗原肿瘤疫苗
- 汉滩病毒体外诱导热休克蛋白70的表达
- 2006年
- 目的定量研究汉滩病毒(HTNV)体外诱导细胞热休克蛋白70(HSP70)及HSP70 mRNA的表达规律。方法以HTNV敏感细胞株Vero-E6为对象,体外实验性感染Hantaan 76-118。采用原位杂交、免疫细胞化学染色法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察感染后72 h内HSP70的表达并加以定量分析。结果与模拟感染组相比,Hantaan 76-118感染Vero-E6细胞后0．5 h．HSP70 mRNA开始升高,于感染后12 h达高峰,并持续高表达至72 h(P＜0．05)。Hantaan 76-118感染后2 h可检测到HSP70蛋白表达增加,于感染后12 h达高峰,并持续高表达至72 h(P＜0．05)。结论体外感染HTNV可诱导Vero-E6细胞产生热休克反应并表达HSP70,这种快速、持久的应激反应,可能对HSP70持续发挥其细胞保护作用具有重要意义。
- 余璐马恒段春光孙玉静杨守京
- 关键词：汉滩病毒热休克蛋白质70热休克反应
- 肾综合征出血热诱导热休克反应及其与病毒感染关系和意义的研究进展
- 肾综合征出血热(HFRS)是由汉坦病毒(Hantavirus,HTV)感染引起的一类重要的流行性传染病,我国除青海、新疆外,其他各地均有流行,年发病10万人左右.HTV含有大片段L、中片段M和小片段S三段反义的单链RNA...
- 杨守京刘彦仿叶玲赵荣孙玉静赵君
- 文献传递
- 不同人肝癌细胞中热休克蛋白70表达的动态研究被引量：4
- 2000年
- 目的 :探讨 HSP70在人肝癌细胞中的表达。方法 :不同人肝癌细胞经 42℃休克 2 h,分别于休克后 4h、8h、12 h、16 h、48h收集细胞爬片 ;采用 ENVISION免疫组化法检测 HSP70在细胞中的表达 ;采用间接免疫荧光法定量分析 SMMC- 772 1细胞休克前及休克后 16 h HSP70的表达。结果 :免疫组化和免疫荧光检测显示热休克前后不同人肝癌细胞中 HSP70表达明显增加 ,以 16 h表达达高峰。结论 :不同人肝癌细胞休克前后 HSP70表达的动态研究 ,为今后进行
- 王小平刘彦仿杨守京孙玉静
- 关键词：肝癌细胞热休克蛋白70病理
- 纳米乳剂的制备及特性鉴定被引量：5
- 2005年
- 目的: 制备包裹BSA- FITC的纳米乳剂 (NEBSA -FITC), 研究其特性以及树突状细胞 (DC)和巨噬细胞对其摄取的效率。方法: 采用界面聚合法, 制备包裹BSA- FITC的纳米乳剂(NEBSA- FITC), 于电镜下观察其形态并测量其粒径。用凝胶层析法检测纳米乳剂的包裹率、载药量及稳定性。将小鼠骨髓DC及腹腔巨噬细胞与NEBSA -FITC共育后, 用流式细胞仪检测DC及腹腔巨噬细胞摄取NEBSA- FITC的阳性率。用激光共聚焦显微镜观察DC摄取NEBSA -FITC的能力。结果: 成功地制备出粒径为(25±10)nm的纳米乳剂, 其包裹率为 91%, 载药量为 0. 091g/L, 于 4℃放置 6个月后性质稳定。流式细胞仪检测显示, DC和腹腔巨噬细胞摄取NEBSA FITC的能力明显强于对游离BSA- FITC的摄取。激光共聚焦显微镜下观察到DC可摄取NEBSA -FITC。结论: 纳米乳剂具有良好的包裹率和载药量, 可有效地增强抗原递呈细胞对所载药物的摄取, 有望作为肿瘤抗原疫苗的新型载体。
- 孙玉静吴道澄曹云新隋延仿
- 关键词：纳米乳剂树突状细胞肿瘤疫苗
- 汉坦病毒感染乳鼠脑组织中HSP70与病毒抗原关系被引量：1
- 2002年
- 目的 :探讨汉坦病毒 (HTNV)感染诱导乳鼠脑组织热休克蛋白 (HSPs)表达及热休克蛋白与病毒蛋白的相互关系。方法 :采用免疫荧光法检测实验性乳鼠感染脑组织中病毒抗原及HSP70的表达 ,用ELISA、免疫印迹、免疫共沉淀方法分析病毒抗原和HSP70的表达。结果 :HTNV感染诱导了乳鼠脑组织神经细胞高表达HSP70 ,组织中HTNV NP与HSP70关系密切 ,免疫共沉淀结果显示HSP70与HTNV NP结合形成复合物。结论 :HTNV实验性乳鼠感染脑组织中高表达的HSP70与病毒核心抗原 (HTNV NP)形成非共价复合物 ,该复合物可能在病毒感染复制及宿主免疫反应中发挥作用。
- 孙玉静杨守京刘彦仿
- 关键词：汉坦病毒感染乳鼠脑组织HSP70
- 汉滩病毒诱导乳鼠组织热休克蛋白表达及其与病毒抗原蛋白的相关性被引量：7
- 2002年
- 目的 探讨汉滩病毒 (HV)感染诱导乳鼠组织热休克蛋白 (HSPs)表达及热休克蛋白与病毒蛋白的相互关系。方法 出生后 2～ 3d的昆明乳鼠 ,每只脑内接种 10 0个半数致死量的HV0 .0 3ml,8d后乳鼠发病死亡 ,取其脑组织一部分固定 ,石蜡包埋切片 ,用免疫组织化学法结合共聚焦显微镜检测组织中病毒抗原及HSP70的表达 ,一部分组织制匀浆液 ,用ELISA、免疫共沉淀方法分析病毒抗原和HSP70的表达及关系。结果 HV感染诱导了乳鼠脑组织神经细胞高表达热休克蛋白(HSP) 70 ,细胞内病毒抗原与HSP70有共定位关系 ;免疫共沉淀结果显示用HSP70mAb可以共沉淀感染乳鼠脑组织匀浆中的汉滩病毒核心抗原 (HV NP) ,用HV NPmAb 1A8可沉淀感染乳鼠脑组织匀浆中的HSP70 ,对照实验阴性 ,所用两种蛋白抗体间无交叉反应 ,因而HSP70与HV NP结合形成复合物 ,结果是特异的。结论 HV感染诱导HSP70的表达 ,后者与HV NP结合形成HSP70 病毒抗原肽复合物 ,该复合物可能在病毒感染和复制过程中发挥作用。
- 孙玉静杨守京赵君刘彦仿
- 关键词：汉坦病毒热休克蛋白类沉淀素试验
- NE(MHS)纳米乳剂疫苗的抗肿瘤免疫学效应研究被引量：2
- 2008年
- 目的:制备包裹有MAGE1-Hsp70和SEA的复合抗原的纳米乳剂疫苗NE(MHS)(nanoemulsion-encapsulated MAGE1-Hsp70/SEA),评价其抗肿瘤免疫学特性。方法:采用磁力超声法制备纳米疫苗NE(MHS),评价其粒径、包裹率及稳定性;NE(MHS)免疫动物,IFN-γ ELISPOT和LDH杀伤实验检测疫苗激活机体特异性细胞免疫反应情况;肿瘤攻击实验检测纳米乳剂疫苗的抗肿瘤效应。结果:(1)成功制备出粒径为(20±5)nm的NE(MHS),其药物包裹率为87%,于4℃放置6个月后或3000r/min10min离心后无分层;(2)与其他组相比,NE(MHS)组小鼠脾淋巴细胞中分泌IFN-γ的T细胞数量明显增多(P<0.05),CTL对B16-MAGE-1的特异性杀伤作用明显增强;NE(MHS)组B16-MAGE-1肿瘤成瘤时间长、成瘤率低。结论:NE(MHS)纳米乳剂疫苗具有良好的理化性质,能够刺激机体产生强烈的MAGE-1特异性的细胞免疫,能有效预防表达MAGE-1的肿瘤细胞攻击,是一种很有希望的新型抗肿瘤疫苗。
- 葛伟孙玉静李源张珊红张秀敏黄杨胡沛臻隋延仿
- 关键词：纳米乳剂肿瘤疫苗HSP70SEA
- HSP70复合物抗人肝癌细胞免疫的初步研究被引量：2
- 2000年
- 目的 :研究 HSP70复合物抗人肝癌细胞的免疫效应。方法 :用经 42℃热休克处理的 SMMC- 772 1细胞制备裂解液 ,免疫共沉淀法提取 HPS70复合物 ,采用 SDS- PAGE和 Western- blot鉴定蛋白性质及分子量 ;蛋白测定仪进行复合物定量。 MTT法检测 HSP70复合物体外致敏人脾淋巴细胞对 SMMC- 772 1的细胞毒作用。结果 :SDS- PAGE和 Western- blot证实获得相对分子量约为 7× 10 4的 HSP70蛋白 ;体外细胞毒实施显示在不同效靶比时 ,致敏的淋巴细胞对 SMMC- 772 1均具有一定的杀伤效应 ,且这种效应可被 CD4、CD8的单抗部分阻断。结论 :HSP70复合物能在体外诱导针对人肝癌细胞的淋巴细胞毒效应 ,CD4、CD8介导了部分抗瘤作用 ,提示 HSP70可能通过多种免疫途径参与抗瘤效应。
- 王小平刘彦仿杨守京孙玉静
- 关键词：肝癌细胞细胞毒免疫
