孙瑛勋
- 作品数：41 被引量：138H指数：7
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用单克隆抗体对幼稚急性淋巴细胞白血病免疫标志的研究被引量：1
- 1991年
- 本研究应用抗人白细胞表面分化抗原单克隆抗体和免疫基因探针,对缺乏表面标志的极幼稚急淋(ALL)细胞进行了胞膜和胞浆相关抗原的检测。通过对63例T-ALL细胞分析表明,膜CD_7(SmCD_7)与胞浆CD_3(cCD_3)配伍可作为幼稚T-ALL诊断的特异标志;53例非T-ALL比较研究证实,SmCD_(19)、cCD_(22)和cCD_(10)可共同用于检测幼稚B细胞系白血病,三种单抗联合应用有助于提高非T-ALL的检出率。
- 白炎申明燕朱元晓赖春宁陈勇孙瑛勋王建安
- 关键词：单克隆抗体白血病免疫标志
- 联合应用CD9及CD10类细胞毒性单克隆抗体清除骨髓中非T急淋白血病细胞的研究
- 1991年
- 用B细胞培养细胞系SB及Nalm-1作为异质性白血病细胞模型,与9倍数量正常骨髓细胞混合后,观察 CD9类抗体 DS21、CD10类抗体55对骨髓中 SB 及 Nalm-1细胞依赖补体的净化效果。用间接免疫荧光及溴乙锭双染法及集落形成实验均证明,联合使用 DS21及55抗体对靶细胞清除效果优于任何一个单一抗体,同时对骨髓中造血祖细胞无明显杀伤作用。本实验结果为临床联合应用 DS21及55抗体净化非 T-ALL 患者自体骨髓提供了依据。
- 刘深刘秀珍朴鲜华孙瑛勋陈勇白炎
- 关键词：白血病自体骨髓细胞
- 抗人重组IL－1单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 1995年
- 以重组人ＩＬ－１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞６５３融合，得到一组分泌抗人重组ＩＬ－１单克隆抗体的杂交瘤细胞。对其中的３株ＹＡ１３３、ＹＡ１４０和ＹＡ１６３进行了初步鉴定；抗体类别为ＩｇＧ，亚类均为ｌｇＧｌ；免疫转印显示，３株抗体均能特异性地识别分子量为１７．５ｋＤ的ＩＬ－１蛋白条带；ＥＬＩＳＡ法证明与其它细胞因子如：ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＴＮＤ－α、ＩＦＮ－γ和ＧＭ－ＣＳＦ均无交又反应；放射免疫测定结果证实，３株抗体分别识别ＩＬ－１分子上两个不同的抗原决定簇。
- 于鸣孙瑛勋杨子义孙启鸿沈倍奋
- 关键词：白细胞介素-1单克隆抗体
- 抗CD20嵌合抗体的构建与表达被引量：7
- 2006年
- 目的构建抗CD20嵌合抗体的真核表达载体并实现在真核细胞中的表达。方法采用RT-PCR,从分泌鼠源抗人CD20抗体的杂交瘤细胞系1-28中钓取其轻、重链基因,连接至T载体,进行序列测定。还原SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离抗CD20单克隆抗体(mAb)1-28的轻、重链蛋白,切取轻链及重链条带,质谱测定氨基酸序列,Biolynx和pepeseq软件分析可信度。对比所测DNA序列与蛋白序列,确定所钓取基因的正确性。将mAb1-28轻重链可变区基因,连接至表达载体pCMV-VH和pCMV-VL,构建成嵌合抗体C1-28的轻链真核表达载体C1-28L及重链真核表达载体C1-28H。PCR、酶切及序列测定以确定连入基因的正确性。脂质体介导法将嵌合抗体的轻重链真核表达载体共转染入293T细胞,RT-PCR检测mRNA水平的表达,夹心ELISA法检测蛋白表达量,Westernblot检测目的蛋白的大小。结果钓取到mAb1-28基因。mAb部分蛋白序列测定结果与根据所钓取基因推出的蛋白序列相对应。成功构建了嵌合抗体的真核表达载体,并实现真核表达,表达量可达257mg/L,其相对分子质量(Mr)与人IgG的Mr一致。结论为后续研究嵌合抗CD20抗体对非霍奇金淋巴瘤的治疗提供了一定的依据。
- 王玉刚黄英谷欣于鸣冯健男孙瑛勋黎燕沈倍奋
- 关键词：杂交瘤质谱分析嵌合抗体
- 抗人K、γ轻链单克隆抗体在白血病免疫分型中的作用
- 1990年
- 抗人κ、λ轻链单克隆抗体与膜表面免疫球蛋白(SmIg)多克隆抗血清的比较研究表明,具有成熟B细胞特征的κ、λ标志在正常人血中是按一定比例分布的,比值为1.8左右。κ与λ之和近似于SmIg。而在151例各类白血病细胞的免疫表型中,引起SmIg抗血清阳性反应有两种情况,其一为B淋巴细胞性白血病,14例急、慢性B细胞白血病患者通过κ和λ单抗检测,可以清晰地识别出白血病细胞单克隆恶性增殖的特性;其二是急性单核细胞白血病,11例FAB分型为M4/M5亚型的免疫表型显示,这类细胞与抗κ、λ单抗反应呈现多克隆着染现象,此特点有助于与髓系其他类型白血病相鉴别。针对κ、λ单抗较之SmIg抗血清的优越性,以及上述两类白血病细胞的反应类型进行了讨论。
- 申明燕赖春宁孙瑛勋白炎
- 关键词：单克隆抗体白血病免疫分型轻链
- 抗T免疫毒素用于异基因骨髓移植的实验研究及初步应用被引量：3
- 1994年
- 异基因骨髓移植是治疗白血病的有效途径,其主要并发症是供体骨髓中成熟T细胞介导的移植物抗宿主病(GVHD)。抗人T淋巴细胞的单克隆抗体与蓖麻毒素组成的抗T免疫毒素能特异性地去除T细胞。体外实验证明它们能有效地抑制靶细胞的蛋白质合成和T细胞功能。在1×10^(-9)mol/L浓度时对靶细胞的杀伤可达到99.9％,而对非靶细胞则无细胞毒作用。该浓度的抗T免疫毒素对骨髓中造血干祖细胞的增殖没有明显影响。在10例异基因骨髓移植中(8例为HLA二个位点不相同的移植)用它在体外清除供体骨髓中的T细胞,结果未见明显的GVHD发生。
- 沈倍奋黎燕陈兴贺永怀陈勇孙瑛勋
- 关键词：异基因骨髓移植T细胞移植物抗宿主病单克隆抗体蓖麻毒素
- 全文增补中
- 双特异性抗体的制备与应用被引量：2
- 1994年
- 双特异性抗体的制备与应用孙瑛勋，综述沈倍奋审阅（军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０）双特异性抗体（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）又称双功能抗体（ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＢＦＡ），此类抗体单体的两个抗原结合位...
- 孙瑛勋
- 关键词：抗体双特异性
- 抗人IgM(μ链)单克隆抗体的制备
- 1990年
- 本实验用可溶性抗原人 IgM 免疫 BALB/C 小鼠,按常规方法取免疫鼠脾细胞,分别与 NS-1、SP2/0细胞进行融合,ELISA 法筛选只与 IgM 反应阳性的抗体分泌杂交细胞,建立了6株杂交瘤株。经鉴定,此6株细胞分泌的抗体与 IgM 产生特异性反应,而不与其它免疫球蛋白重、轻链及 J 链交叉反应。经免疫电转印的硝酸纤维膜染色只显示分子量为72kD 的电泳带。放射免疫方法检测6个单克隆抗体,可分别识别4个不同的抗原决定簇。此组抗体识别 B 细胞胞浆内及膜表面μ链并可检测乙型病毒性肝炎患者血清中 HB_C-IgM 复合物。本组抗体间彼此加合可提高检测的灵敏性。抗 IgM(μ链)单克隆抗体对研究人 B 细胞的分化、成熟及功能提供了重要途径。
- 孙瑛勋赵薇薇陈勇白炎
- 关键词：单克隆抗体免疫球蛋白M
- 抗人CD16单克隆抗体可变区基因的克隆和表达被引量：7
- 2002年
- 目的 克隆抗人CD16单克隆抗体重、轻链可变区（VH,VL）基因并合成单链抗体（ScFv）基因。方法 从分泌抗人CD16单克隆抗体的杂交瘤细胞B88-9中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得抗CD16单克隆抗体的VH、VL基因。用连接肽（Linker）将VH和VL连接成具有VH-Linker-VL结构的ScFv基因,将其克隆到表达载体pcDNA3.1（+）,并转染COS-7细胞。结果VH基因长度为354bp,属于鼠抗体可变区重链基因家族I（B）亚群;VL基因长度为333bp,属于鼠抗体可变区 kappa轻链基因家族Ⅲ亚群。采用夹心ELISA方法检测到ScFv的表达。结论 抗人CD16单克隆抗体VH与VL基因的克隆和ScFv基因的构建为基于CD16的导向免疫治疗奠定了基础。
- 解志刚郭宁施明冯健男孙瑛勋于鸣沈倍奋
- 关键词：克隆CD16抗体可变区基因免疫疗法
- 抗TNF和抗CALLA三体瘤的研制及其分泌抗体的初步纯化被引量：1
- 1993年
- 抗CALLA一次杂交瘤79经8-杂氮鸟嘌呤诱导,成为HAT敏感型细胞系79A,79D;与TNF免疫的脾细胞融合,经筛选鉴定得到了几株分泌抗CALLA和抗TNF双特异性单克隆抗体的三体瘤。然后用羟基磷灰石柱对其中一株E6所分泌的抗体进行了初步纯化,与高压液相法相比,在普通常压色谱条件下取得了较为满意的效果。
- 刘明旭孙瑛勋王建安沈倍奋陈勇
- 关键词：肿瘤坏死因子
