孙秀华
- 作品数：7 被引量：15H指数：2
- 供职机构：中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅课题基金辽宁省科技厅博士启动基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肺癌中PI3K/AKT信号通路对Skp2调控机制的研究被引量：7
- 2010年
- 目的探讨肺癌中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/AKT信号通路对S期激酶相关蛋白2(Skp2)的调控机制。方法体外培养4种类型肺癌细胞系H460、LK2、H446和A549,经LY294002处理细胞24 h后实时RT-PCR法检测Skp2基因表达变化;Western blot检测E2F1蛋白表达变化。结果实时RT-PCR显示LY294002作用后4种肺肿瘤细胞系中Skp2基因表达均下降;Western blot结果表明在小细胞肺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌中E2F1蛋白表达降低,肺腺癌中E2F1蛋白未表达。结论肺癌中PI3K/AKT通路可在转录水平调节Skp2表达,在小细胞肺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌中此种调节可能通过转录因子E2F1发挥作用,而肺腺癌中E2F1不参与此种调节。
- 解智慧孙秀华柯丹张洪开于爱鸣
- 关键词：肺肿瘤磷脂酰肌醇-3-激酶S期激酶相关蛋白2
- 非小细胞肺癌中PI3K/Akt信号通路通过Cdh1调控Skp2表达的机制研究
- 2011年
- 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中Cdc20同源蛋白1(Cdh1)参与磷脂酰肌醇三羟基激酶(PI3K)/Akt信号通路对S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达调控的机制。方法体外培养NSCLC细胞系A549、LK2和H460,LY294002特异性阻断PI3K/Akt信号通路后,Western blot检测Skp2、Cdh1及p-Akt蛋白表达的变化,免疫荧光(IF)检测Cdh1在NSCLC中的定位变化。结果 LY294002处理后,与对照组相比3种细胞中Skp2蛋白表达和Akt磷酸化水平均降低(P<0.01),Cdh1在3种细胞的核内表达均增多。结论 NSCLC中PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002使Skp2蛋白表达下调与Cdh1由细胞质向细胞核转位有关。
- 孙秀华张洪开李玉于爱鸣
- 关键词：肺肿瘤S期激酶相关蛋白2
- 葡萄糖胺抑制LL-37诱导的人脐带血管内皮细胞活化被引量：2
- 2010年
- 目的探讨葡萄糖胺对LL-37诱导的人脐带血管内皮细胞(HUVEC)细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule,ICAM-1)和单核细胞趋化因子(monocyte chemoattractant factor,MCP-1)表达的影响。方法实时逆转录聚合酶链式反应(Rea ltime RT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)、酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay)分别测定ICAM-1和MCP-1的表达;Western blot法测定HUVEC蛋白的O-连接N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)修饰及细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)的磷酸化程度。结果葡萄糖胺抑制LL-37诱导的ICAM-1和MCP-1在HUVEC的表达;葡萄糖胺诱导内皮细胞蛋白的O-GlcNAc修饰;葡萄糖胺抑制LL-37诱导的ERK磷酸化。结论葡萄糖胺通过抑制ERK的活化抑制LL-37诱导的ICAM-1和MCP-1的表达。
- 具英花于爱鸣解智慧孙秀华
- 关键词：葡萄糖胺细胞间黏附分子-1单核细胞趋化因子-1
- LY294002对LK2和H460肺肿瘤细胞系细胞增殖及SKP2和p27表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨PI3K抑制剂LY294002对肺肿瘤细胞增殖影响及其分子机制。方法:培养肺癌细胞系LK2和H460,LY294002阻断PI3K信号通路后,MTT比色法测定细胞生长曲线;FCM分析细胞周期变化;实时RT-PCR、蛋白印迹法分别观察PI3K信号下游蛋白SKP2、p27mRNA及蛋白表达变化。结果:与对照组相比,处理组细胞生长速率受抑制,细胞周期阻滞于G1期。实时RT-PCR及蛋白印迹结果显示,LY294002处理后SKP2mRNA、蛋白表达水平均降低,2种细胞中基因降低量分别为42%和41%,蛋白降低量为65%和55%,p27mRNA表达水平增加了49%和36%,但蛋白表达水平不变。结论:肺肿瘤细胞LK2和H460中PI3K通路通过SKP2,但并不经由p27调节细胞周期,调控细胞增殖。
- 解智慧孙秀华柯丹张洪开于爱鸣
- 关键词：肺肿瘤细胞增殖
- 葡萄糖胺对TNF-α诱导的血管内皮细胞VCAM-1表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨葡萄糖胺对肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-α,TNF-α)诱导的人脐带血管内皮细胞(HUVEC)血管细胞黏附分子(vascular cell adhesion molecule,VCAM-1)表达的影响。方法实时逆转录聚合酶链式反应(Real time RT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)分别测定葡萄糖胺对VCAM-1的表达情况;Western blot法测定HUVEC核因子-κB(nuclear factor,NF-κB)磷酸化程度。结果葡萄糖胺抑制TNF-α诱导的VCAM-1在HUVEC的表达;NF-κB抑制剂BMS-345541抑制TNF-α诱导的VCAM-1的表达;葡萄糖胺抑制TNF-α诱导的NF-κB的磷酸化。结论葡萄糖胺抑制TNF-α诱导的VCAM-1的表达与抑制NF-κB的活化相关。
- 具英花于爱鸣解智慧孙秀华
- 关键词：葡萄糖胺血管细胞黏附分子
- IGF-1在人非小细胞肺癌细胞增殖中的作用
- 2010年
- 目的探讨胰岛素样生长因子1(IGF-1)对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖的影响及可能的分子机制。方法 MTT比色法检测0.1,1,10,100 ng/ml IGF-1对非小细胞肺癌系腺癌A549、鳞癌LK2、大细胞肺癌H460细胞增殖的影响,流式细胞术(FCM)、Western blot分析IGF-1处理前后各肺癌细胞的细胞周期变化,S期激酶相关蛋白2(SKP2)和CDC20同源蛋白1(CDH1)的表达变化。结果在非小细胞肺癌系A549、LK2、H460中,不同浓度的IGF-1均显示有促进细胞增殖的作用(P<0.05),其中1 ng/ml IGF-1作用后细胞增殖率达到峰值;与DMSO组相比,处理组S期细胞增加(P<0.01),SKP2蛋白表达增加(P<0.05),但CDH1蛋白表达却无明显变化(P>0.05)。结论非小细胞肺癌细胞中IGF-1可能是通过SKP2蛋白表达的增强,负性调控p27作用,加速细胞周期的进程。
- 孙秀华胡海洋张洪开解智慧于爱鸣
- 关键词：胰岛素样生长因子1肺癌S期激酶相关蛋白2细胞增殖
- PI3K和MAPK信号通路对A549细胞FOXO1蛋白表达及其亚细胞定位的调节被引量：4
- 2012年
- 目的探讨非小细胞肺癌中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/AKT和丝裂原活化蛋白激酶MAPK/ERK信号通路对Forkhead转录因子(Fox蛋白家族)FOXO1活性的影响及分子机制。方法体外培养人非小细胞肺癌系A549,分别选用PI3K/AKT信号通路特异性抑制剂LY294002和MAPK/ERK信号通路特异性抑制剂UO126及两种抑制剂联合处理细胞之后,MTT比色法检测其对细胞增殖的影响;Western blot检测蛋白FOXO1、p-FOXO1及信号下游蛋白Bim表达的变化;免疫荧光法检测FOXO1蛋白在A549细胞中亚细胞的定位的变化。结果与对照组相比,LY294002和UO126都能明显地抑制A549细胞的增殖,且具有时间依赖性。Western blot结果显示,FOXO1的蛋白水平未见显著性变化,而FOXO1的磷酸化水平明显下降,Bim的表达相应增加。免疫荧光结果显示,FOXO1在A549细胞中的核转位增多。LY294002和UO126联合处理A549细胞时,较药物单独作用效果明显增加。结论 PI3K/AKT和MAPK/ERK信号通路能调节FOXO1磷酸化水平,且具有协同作用,抑制其转录活性。FOXO1通过激活Bim蛋白,促进细胞凋亡,抑制细胞的增殖。
- 张洪开具英花徐韬钧孙秀华于爱鸣
- 关键词：FOXO1PI3KMAPK
