应蓓蓓
- 作品数：13 被引量：29H指数：3
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金上海市自然科学基金上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 生物制品中支原体污染的快速检测被引量：12
- 1999年
- 用两步ＰＣＲ法（ＮｅｓｔｅｄＰＣＲ）及ＤＮＡ荧光染色技术（ＨｏｅｃｈｓｔＳｔａｉｎｉｎｇ），检测了８１份不同来源和批号的疫苗及一些实验用细胞株中的支原体，并对检测结果做了比较。ＰＣＲ阳性检出率为３８．３％，Ｈｏｅｃｈｓｔ阳性检出率为１９％。这些结果表明ＰＣＲ法较Ｈｏｅｃｈｓｔ染色法更敏感。
- 应蓓蓓陆诗华吴维寿赵寿元李昌本
- 关键词：生物制品
- 表达人白细胞介素-2的重组腺病毒的制备
- 1997年
- 携带人白细胞介素-2（interleukin－2，IL－2）cDNA序列的E1区缺陷的腺病毒载体pAdl2／RSV－IL2－bpA与pJM17质粒，通过磷酸钙沉淀法共转染293细胞，经同源重组，获得了一个腺病毒噬斑。抽提腺病毒DNA，运用PCR扩增及XbaI酶切检测，证实这一噬斑为带有人IL－2cNDA序列的重组腺病毒。受其感染的293细胞和人黑素瘤A375细胞上清中，都能够测出IL－2的活性，表明制备的重组腺病毒是能表达人IL－2的，可进一步用于恶性肿瘤的基因治疗。
- 徐人尔应蓓蓓王义斌赵寿元李昌本
- 关键词：人白细胞介素-2腺病毒重组体
- 应用带HSV－TK基因的重组腺病毒的肺癌基因治疗的研究被引量：1
- 1996年
- 带有单纯疱疹病毒脱氧胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的腺病毒结合ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ（ＧＣＶ）对分裂细胞有很强的杀伤作用。本文报道在感染复数（Ｍ．Ｏ．Ｉ，ＭｕｌｔｉＰｌｉｃｉｔｙｏｆＩｎｆｅｃｔｉｏｎ）达到１０００时对人体肺腺癌细胞Ａ５４９的杀伤几乎达到回１００％。四种人体肺癌细胞株（Ａ５４９，ＬＡＸ，ＳＰＣ，ＳＫＹ）对带ＨＳＶ－ｔｋ的腺病毒（ＡＤＶ／ＲＳＶ－ｔＫ）的杀伤作用表现不同的敏感性。另外，Ａｃｙｃｌｏｖｉｒ（ＡＣＶ）和ＧＣＶ对感染了重组腺病毒ＡＤＶ／ＲＳＶ－ｔＫ的细胞都有一定杀伤作用，但杀伤效果有很大差别；就Ａ５４９而言，ＧＣＶ的杀伤作用比ＡＣＶ高７—８倍。此外ＡＤＶ／ＲＳＶ－ｔｋ结合ＧＣＶ杀伤肿瘤细胞时有“旁观者效应”，即感染了ＡＤＶ／ＲＳＶ－ｔｋ的细胞与未感染细胞混合后，后者也明显地遭到杀伤。
- 耿雨红吴昊泉应蓓蓓徐人尔王义斌赵寿元李昌本
- 关键词：腺病毒HSV-TK基因肺癌
- 带HSV-tk基因的重组腺病毒治疗小鼠实体瘤的研究
- 1997年
- 在完成一系列离体实验川的基础上进一步进行了活体研究，离体实验表明，小鼠肉瘤细胞5180在感染重组腺病毒ADV／RSV－tk后对GCV的处理显示出致死敏感性。因4L以S180肿瘤细胞进行活体实验，小鼠腋下接种3×106S180细胞，当能触摸到瘤块时在瘤内注入ADV／RSV－tk，并腹腔注射GCV连续五天；种瘤后10天杀死小鼠剥离瘤块称重，治疗组瘤重为对照组的1／14。实验结果表明，以腺病毒为载体介导HSV－tk基因结合GCV作用对肿瘤细胞有强杀伤性，是有应用前景的肿瘤基因治疗的一种疗法。
- 耿雨红孟德鸣吴昊泉应蓓蓓徐人尔刘全海王义斌赵寿元李昌本
- 关键词：基因治疗腺病毒HSV-TK基因GCV
- 表达人γ-干扰素的重组腺病毒的制备及检测被引量：3
- 1997年
- Ｅ１区缺失的腺病毒载体插入人γ干扰素ｃＤＮＡ序列，与ｐＪＭ１７质粒通过磷酸钙沉淀法共转染２９３细胞，经同源重组，共获得６个病毒噬斑。经ＰＣＲ共扩增检测，证实这６个噬斑均为带有人γ干扰素ｃＤＮＡ的重组腺病毒；受其感染的２９３细胞的上清中，都能测到γ干扰素的活性，且这种活性可被一定稀释度的兔抗人γ干扰素多克隆抗体所中和。其中的１号重组病毒纯化后，按不同的ＭＯＩ（Ｍｕｌｔｉｐｌｅｏｆｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）值感染复制缺陷型腺病毒不能在其中增殖的Ｂ１６Ｆ１０细胞，未出现细胞病变效应（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃｅｆｅｃｔ，ＣＰＥ），而上清中的γ干扰素活性却随ＭＯＩ值增大而升高。
- 徐人尔应蓓蓓王义斌赵寿元李昌本
- 关键词：基因治疗腺病毒Γ-干扰素同源重组活性检测
- 哺乳动物基因功能研究正引发国际生命科学和生物医药产业的新一轮竞争
- 2011年
- 人具有46条染色体，包含了约2．4万个编码不同蛋白质的基因以及大量miRNA和基因调控序列。这些基因蕴含的遗传信息不仅决定了人的体貌、代谢、寿命等生理特征，而且对疾病的发生发展具有重要作用。现代生物医学研究表明，基因突变和基因功能异常不仅可以直接导致肿瘤、
- 吴晓晖孙璘徐人尔陶无凡邓可京陈慕云丁昇丁一董永利杜兴荣郭增礼金艳孔珊珊雷凯李荣波彭超钱璟熠时富彪王光学王合瑞徐驰炜杨东叶坚叶知晟殷琪立余珊曾浩张弛应蓓蓓韩珉庄原许田
- 关键词：基因功能生物医药产业生命科学哺乳动物MIRNA
- 人新基因ADAM29功能的初步分析被引量：1
- 2001年
- ＡＤＡＭ家族是一类具有去整合素域和金属蛋白酶域的Ⅰ型跨膜蛋白，广泛参与各种重要的生理过程，如精卵结合、神经系统发育、成肌细胞融合以及炎症反应等．ＡＤＡＭ２９是一个新发现的人类基因，它特异性地表达于人睾丸组织中，包含一段潜在的融合蛋白域．用ＰＣＲ方法克隆了其全长ｃＤＮＡ，并比较分析了在哺乳动物睾丸组织中专一表达的ＡＤＡＭ家族成员的氨基酸顺序．此外，以ＡＤＡＭ２９的一个肽段（Ｌｅｎ２６８～Ａｓｐ３７４）制成融合蛋白后作为抗原制备多克隆抗体．人睾丸组织切片免疫组织化学的检测结果表明，ＡＤＡＭ２９分布于多种细胞内，但主要集中于间质细胞，因而推测ＡＤＡＭ２９可能与信号传导有关．
- 王昉徐人尔朱鹏程胡俊杰应蓓蓓赵寿元李昌本
- 关键词：免疫组织化学睾丸组织
- 生物制品中支原体污染的快速检测被引量：2
- 1998年
- 用两步PCR法（NestedPCR）及DNA荧光染色技术（HoechstStaining），检测了国内部分生物制品研究所生产的81份不同来源和批号的疫苗及一些实验用细胞株中的支原体，并对检测结果做了比较．PCR阳性检出率为38．3％，Hoechst阳性检出率为19％．这些结果表明PCR法较Hoechst染色法更敏感，同时亦提示必须重视检测与控制国内生物制品的支原体污染问题．
- 应蓓蓓陆许华关维寿赵寿元李昌本
- 关键词：生物制品
- 小鼠腹腔内腺病毒介导的基因表达和分布
- 1997年
- 本文报道了重组腺病毒——带有报道基因1acZ的Ad/RSV-β-gal注入小鼠腹腔后,在胃、小肠、大肠、子宫、肝、脾、膀胱、体壁、膈和睾丸的腹膜面均出现被X-gal染成蓝色的细胞,腹膜面下未见染色细胞。结果表明重组腺病毒可广泛感染腹腔内的组织并使外源基因表达,但不扩散出体腔。另一带有单钝疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk)的重组腺病毒Ad/RSV- tk,注入小鼠腹腔后并给以药物ACV,未发现急性毒性反应。在此基础上,讨论了TK/ACV 系统对腹腔内肿瘤作基因治疗的可行性。
- 吴昊泉耿雨红徐人尔应蓓蓓孙加廷王义斌赵寿元李昌本
- 关键词：基因表达基因治疗
- 带HSV-tk基因的重组腺病毒基因治疗小鼠B16黑色素瘤的实验研究被引量：3
- 1997年
- 我们成功开展了携带单纯疱疹Ⅰ型病毒胸腺嘧啶激酶基因(Herpes simplex virus thy-midine kinase,HSV-tk)的复制缺陷型重组腺病毒Ad(HSV-tk)结合使用GCV治疗C 57 BL/6小鼠B 16黑色素瘤的离体及动物试验。导入了HSV-tk基因的B16细胞对GCV的杀伤作用高度敏感,IC_(50)约为0.1μg/ml;感染与未感染Ad(HSV-tk)的B 16细胞混合后,可观察到显著的细胞毒杀伤作用——“旁观者效应”。Ad(HSV-tk)直接注入C57BL/6小鼠已建成的B16黑色素瘤内,结合连续6 d腹腔给予GCV,肿瘤结节出现萎缩坏死现象,大小仅为对照组的1/25。灵敏的RT-PCR检测结果表明:瘤内注射Ad(HSV-tk)后,腺病毒的扩散范围是有限的,HSV-tk基因的表达局限于肿瘤组织内。因此,Ad(HSV-tk)/GCV疗法可能为黑色素瘤等恶性实体瘤的治疗提供了一种较为有效、安全的选择方案。
- 徐人尔应蓓蓓赵寿元李昌本
- 关键词：黑色素瘤腺病毒基因治疗
