张善锋 作品数:50 被引量:175 H指数:7 供职机构: 郑州大学基础医学院 更多>> 发文基金: 河南省教育厅自然科学基金 河南省杰出人才创新基金 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 经济管理 更多>>
小干扰RNA预防兔激素性股骨头坏死的组织病理学观察 被引量:2 2016年 目的观察靶向过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因小干扰RNA预防兔激素性股骨头坏死(ONFH)的组织病理学变化。方法将48只兔随机分为4组。股骨头坏死模型组(M):给予地塞米松20mg/kg,连续肌肉注射3d。干扰组(S):同样给予地塞米松,并于实验1、3、6周给予siRNA腺病毒滴液25山注入一侧股骨头内。无关序列组(Con):同样给予地塞米松,注入兔股骨头内无关序列siRNA病毒滴液。正常组(N):无特殊处理。实验第4、8周末分批处死兔,观察兔股骨头组织病理学改变。结果实验8周时,干扰组、模型组、无关序列组、正常组中,最大脂肪细胞平均直径分别为(41.21±2.33)、(49.61±1.13)、(49.22±2.18)、(40.94±2.09)μm;骨小梁面积分数分别为(40.93±1.96)、(31.51±4.26)、(30.79±1.85)、(41.64±2.34)%;空骨陷窝计数分别为(12.07±1.38)、(21.54±1.38)、(21.76±1.46)、(11.67±1.28)%。模型组和无关序列组中发生明显的早期ONFH组织病理学变化,股骨头软骨下骨区造血组织大大减少、骨髓坏死、脂肪细胞增殖肥大、平均直径明显增大、骨小梁变细稀疏或断裂、骨小梁面积分数明显降低、空骨陷窝显著增多。而正常组中无这些病理学改变(P〈0.05)。干扰组股骨头病理学改变较少,接近于正常组(P〉0.05),与模型组和无关序列组之间的差异均有统计学意义(P〈0.05)。模型组、无关序列组中ONFH发生率为83%、83%,干扰组、正常组中为33%、0%(P〈0.05)。结论靶向PPARγ基因小干扰RNA能够有效阻止激素导致兔ONFH的组织病理学改变,预防激素性ONFH的发生。 马源 张善锋 刘鸣 李劲峰 王义生 李月白 赵国强关键词:小干扰RNA 激素 股骨头坏死 组织病理学 前列腺癌特异突变DNA聚合酶β真核表达载体构建及鉴定 被引量:2 2009年 目的构建前列腺癌(PCa)特异突变DNA聚合酶β(polβ)真核表达载体。方法提取有特异DNApolβ突变的PCa组织的总RNA,通用引物逆转录成cDNA;用设计带有接头的DNA polβ全基因引物,PCR扩增PCa组织中呈现的突变型DNApolβ全基因;构建T-A克隆并进行重组体的筛选鉴定;亚克隆入表达载体pcDNA3.1并进行重组体的筛选和鉴定。结果PCa特异突变DN Apolβ基因扩增选择出P4(M1-polβ)和P5(M2-polβ)两个标本,构建重组有特定突变位点的polβ目的基因的pcDNA3.1真核表达载体,经PCR扩增获得2个阳性集落。结论经鉴定成功构建2例PCa特异突变DNApolβ真核表达载体(pcDNA3.1-M1 and pcDNA3.1-M2)。 王明臣 宋宇 张善锋 付蕾 文明 赵勤 金国平 赵国强关键词:前列腺癌 DNA聚合酶Β 基因突变 真核表达载体 前列腺癌特异突变DNA聚合酶β表达载体转染NIH3T3的细胞生物学行为变化 被引量:1 2010年 目的观察前列腺癌(CPa)特异突变DNA聚合酶β(polβ)表达载体转染NIH3T3的细胞生物学行为变化。方法采用业已成功构建的2例特异突变polβ表达载体(pCDNA3.1-M1和pCDNA3.1-M2),采用脂质体包裹转染NIH3T3细胞,观察比较这些突变对细胞polβ基因mRNA和蛋白表达的影响以及引发的相应的细胞周期和细胞自发突变率等细胞生物学行为的变化。结果筛选得到高表达PCa特异突变polβ的NIH3T3细胞株(NIH3T3-M1,NIH3T3-M2)和高表达野生型polβ的NIH3T3细胞株(NIH3T3-W)。RT-PCR和Western印迹结果显示,外源DNApolβ在转化的NIH3T3细胞中呈现高表达。与转染空载体和未转染的NIH3T3细胞相比,转染PCa特异突变polβ的2个细胞株和转染野生型polβ的细胞株的细胞周期的S期比例及转染细胞的HGPRT(次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)基因的自发突变率均显著增加,且转染野生型polβ的细胞株亦显著高于转染PCa特异突变DNApolβ的细胞株。结论 DNApolβ高表达介导了肿瘤发生的分子机制。 王明臣 霍玉奇 张善锋 宋宇 赵勤 金国平 董子明关键词:前列腺癌 DNA聚合酶Β NIH3T3 河南地区汉族85份无关个体6个短串联重复序列基因座的遗传多态性调查 2006年 目的:调查河南汉族人群中DNA遗传标记-6个短串联重复序列的基因多态性。方法:调查于2004-12/2005-06进行。采集85份无关个体抗凝血样本,均为3代以上居住于河南省的汉族群体,所有受试者均签署知情同意书。应用聚合酶链反应和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术检测结果。统计D2S1338,D3S1358,D5S819,D8S1178,D13S317和D18S51等6个短串联重复序列的等位基因的基因频率,用SPSS11.0软件包对基因型分布作χ2检验,检测是否符合Hardy-Weinberg平衡。根据所得基因频率和基因型频率,分别计算各基因座反映遗传标记的多态性程度及其应用价值的杂合度、个人识别能力、非父排除率和多态性信息值(一般杂合度高,个人识别能力>0.8、非父排除率>0.5,多态性信息量>0.5,属于高度多态性遗传标记,具有高度的可提供信息量)。结果:85人的数据全部进入结果分析。①得到D2S1338,D3S1358,D5S819,D8S1178,D13S317和D18S51等6个基因座各等位基因的基因频率范围分别为0.008~0.072,0.008~0.258,0.008~0.154,0.008~0.096,0.008~0.117,0.008~0.138,经检验,基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。②6个短串联重复序列基因座平均杂合度>0.7、个人识别能力>0.8、非父排除率>0.5、多态性信息量>0.7。结论:此6个短串联重复序列基因座具有具有较高的杂合度和多态性信息含量,是较理想的遗传标记。 邹祺 张伟宏 张雷 张善锋关键词:串联重复序列 遗传多态性 前列腺癌组织中SOD_2的cDNA克隆及其序列分析 2009年 目的构建前列腺癌组织中SOD2的cDNA克隆,并进行序列分析。方法从人前列腺癌组织细胞中提取总RNA并逆转录成cD-NA,PCR扩增cDNA片段,将cDNA克隆入载体pGEM-T中构建T-A克隆,对阳性克隆进行序列测定分析。结果在1例前列腺癌组织标本中发现了SOD2基因的两个相连的点突变位点:372nt T→G颠换和373ntG→T颠换。蛋白序列比较分析显示:对应SOD2编码蛋白的第89位氨基酸由亮氨酸变为精氨酸。结论SOD2基因突变在前列腺癌的发生中可能起重要作用。 王明臣 王好东 张善锋 王红钢 臧明玺 赵国强关键词:锰超氧化物歧化酶 逆转录 分子克隆 叶黄素抗衰老及抗突变的实验研究 根据衰老的自由基代谢紊乱学说,本实验采用大鼠颈后部皮下注射D-半乳糖,建立亚急性衰老模型,同时系统的研究了不同剂量的叶黄素对衰老大鼠的干预作用。通过测定与衰老有关的行为学指标、免疫学指标及生化指标,探讨叶黄素对衰老大鼠的... 张善锋关键词:叶黄素 抗衰老 抗氧化 抗突变 AMES试验 染色体畸变 文献传递 一种检测试剂盒存放装置 本发明公开了一种检测试剂盒存放装置,涉及试剂盒存放技术领域,包括存放箱和与之配合的盖板,盖板上开设有竖直通道,还包括:承载机构,转动设置在盖板内侧,包括转盘,转盘上设置有对试剂盒进行限位的卡接机构;旋转易位机构,安装在盖... 王鹏 韩圣娜 阙祥尧 张善锋 杜胜男 王明臣 毕红征 余祖江 李向楠 王威 王涛 阚全程 杜培洁文献传递 一种康复训练用可调节拉伸器 本发明涉及康复训练设备领域,具体是一种康复训练用可调节拉伸器,包括移动安装板,所述移动安装板的底部四角均设置有转向安装套,配合转向安装套均竖直伸出设置有转向安装轮架,转向安装轮架伸出转向安装套的一端均设置有支撑移动轮,还... 王鹏 刘腊梅 张善锋 杨华山 蒋莉莉 史岩 王曼莉 王盼盼15-脱氧前列素2抑制MG63细胞活性并诱导其凋亡的机制 2014年 目的研究过氧化物酶体增殖活化受体(PPAR)γ的内源性配体15-脱氧前列素2(15d-PGJ2)对骨肉瘤细胞株MG63的增殖活性的影响及诱导其凋亡可能的作用机制。方法采用人骨肉瘤细胞MG63,分别用终浓度为0.1、1、5、10和50μmol/L15d-PGJ2处理,对照组不给予药物,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定药物作用24 h、48 h、72 h及96 h细胞增殖的变化;流式细胞术(FCM)结合Annexin V/PI双染色观察终浓度5μmol/L和20μmol/L15d-PGJ2作用48 h和72 h MG63细胞周期变化及诱导细胞凋亡和坏死情况;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测终浓度20μmol/L15d-PGJ2处理48 h对MG63细胞中PPARγm RNA的表达影响;通过免疫细胞化学技术检测终浓度20μmol/L15d-PGJ2作用48 h,MG63细胞中凋亡相关蛋白caspase3,p53和Bax/bcl-2的表达情况。结果 MTT结果显示:1各浓度15 d-PGJ2作用24 h、48 h、72 h及96 h,对MG63细胞增殖均有抑制作用,48 h达到最佳抑制效果。48 h、72 h及96 h抑制率两两比较均无差异(P>0.05),且50μmol/L对细胞的抑制率几乎达100%;2在各时间点,各浓度组间比较均有差异(P=0.000),在0.1~50μmol/L浓度组区间,相同时间点的抑制率有随浓度升高而递增的趋势。流式细胞术检测结果显示:不同浓度的各细胞周期分布差异有统计学意义(P=0.000)。加药组G0/G1期细胞比例均高于对照组,S和G2/M期相应减少,且细胞凋亡率增高,表明加药组可使细胞G0/G1期阻滞且诱导细胞凋亡;RT-PCR检测PPARγm RNA的表达,并同时逆转录稳定的内参片段β-actin,以二者的面积灰度值比值作为该m RNA的相对表达量,20μmol/L 15d-PGJ2作用48 h,PPARγm RNA的相对表达量(2.06±0.35)与对照组(0.94±0.23)比较有差异(P<0.05);免疫细胞化学结果显示:药物干预组凋亡相关蛋白caspase3和Bax表达与对照组比较显著增加,而p53和bcl-2表达下降(P<0.05)。结论 1PPARγ激动剂15d-PGJ2能明显抑制人骨肉瘤MG63细胞的生长,引起细胞G1期阻滞并诱� 全碧波 张善锋 李月白 李晓坤 李啸然 李洁关键词:过氧化物酶体增殖活化受体 骨肉瘤 MG63 凋亡 绞股蓝对衰老大鼠的抗氧化作用 被引量:14 2005年 目的:观察绞股蓝总苷对老龄大鼠的抗氧化作用,探讨其延缓衰老的作用机制。 方法:实验于2004-03/2005-02在郑州大学医学院完成。选用健康老龄(18个月)SD雄性大鼠50只,随机分为5组,每组10只。空白对照组给予蒸馏水灌胃,1次/d;人参皂甙组给于人参皂甙20mg/kg灌胃,1次/d;绞股蓝总苷40,20及10mg/kg组,分别给于相应剂量绞股蓝总苷灌胃,1次/d。灌胃30d,取大鼠血清和脑组织,用硫代巴比妥酸法测定脂质过氧化物含量;用羟胺法检测超氧化物歧化酶活性及免疫器官指数。 结果:50只大鼠均进入结果分析。①绞股蓝对衰老大鼠胸腺指数和脾脏指数的影响:绞股蓝40mg/kg组和20mg/kg组胸腺指数和脾脏指数明显高于空白对照组[绞股蓝40mg/kg组(18.98±1.95),(22.12+2.41),20mg/kg组(17.98±1.64),(22.89±1.98),空白对照组(16.02+2.03),(18.79±2.37),P<0.05]。②绞股蓝对衰老大鼠血清及脑组织中超氧化 物歧化酶和丙二醛含量的影响:绞股蓝40mg/kg组和20mg/kg组血清超氧化物歧化酶活力显著提高;脑组织中超氧化物歧化酶活力亦显著高于空白对照组[(176.24±19.56),(154.35±17.23),(113.14±13.56)kNu/L,P<0.01];绞股蓝40mg/kg组大鼠血清丙二醛含量显著降低;绞股蓝40mg/kg组和20mg/kg组脑组织中丙二醛含量显著低于空白对照组[(102.24±11.32),(132.54±12.03)。(199.32±20.15)μmol/L,P<0.01)。 结论:绞股蓝总苷能增强老龄大鼠机体抗氧化能力,延缓机体衰老。 蔡太生 张善锋 王明臣关键词:绞股蓝属 丙二醛