张坤娟
- 作品数：15 被引量：44H指数：3
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- 发文基金：河北省科技攻关计划河北省卫生厅医学科学研究重点课题河北省科学技术研究与发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗HIV-1gp120单克隆抗体的制备及其初步应用被引量：3
- 2005年
- 目的: 制备抗HIV-1 gp120单克隆抗体(mAb),并建立一种可用于检测gp120的ELISA法.方法: 采用基因工程抗原HIV-1 gp120免疫BALB/c小鼠, 通过B细胞杂交瘤技术制备抗HIV-1 gp120的mAb.用ELISA法鉴定mAb的Ig亚类、效价及特异性.用饱和硫酸铵(SAS)纯化mAb,并用HRP标记后建立双mAb夹心ELISA法.结果: 筛选出10株稳定分泌抗HIV-1 gp120 mAb的杂交瘤细胞株,9株为IgG,其中4株的腹水效价为32×10-4～256×10-4.所得mAb与HIV-1 gp41、HIV-1 p24及HIV-2 gp36 Ag均无交叉反应,仅与HIV-1 gp120产生特异性反应.用 mAb 6H9和9H12建立了双夹心ELISA法, 检测gp120抗原的灵敏度是10 μg/L.结论: 获得10株特异性强、效价高的抗HIV-1 gp120的mAb, 并建立了灵敏度良好的双mAb夹心ELISA法.
- 安庆军王润田张坤娟郝林娟张红中王蕙芬
- 关键词：HIV-1GP120单克隆抗体杂交瘤
- 双膦酸盐在肿瘤领域中的研究与应用被引量：2
- 2010年
- 薛小梅张坤娟侯宁闫征刘东刚
- 关键词：肿瘤肿瘤转移双膦酸盐
- 抗HIV-1基因工程抗原gp120单克隆抗体的制备及gp120抗原检测方法的建立
- 目的 制备抗HIV-1基因工程抗原gp120单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化并筛选能够配对检测基因重组gp120的单抗,并用之探索构建检测gp120的ELISA法,以期为研究HIV-1感染、检测、预防和治疗提供可用的单抗....
- 安庆军王润田张坤娟郝林娟张红中苏彦辉张雪迎王惠芬
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤抗原检测
- 文献传递
- 三种多糖对抗人红细胞A、B抗原单克隆抗体稳定性的影响
- 2010年
- 目的研究葡萄糖、蔗糖、麦芽糖三种多糖对抗人红细胞A、B抗原单克隆抗体(简称单抗)稳定性的影响,进一步延长血型试剂的使用期限。方法将葡萄糖、蔗糖、麦芽糖作为稳定剂,计为葡萄糖组、蔗糖组、麦芽糖组,生理盐水做对照(盐水组),分别加入抗人红细胞A、B抗原的腹水型单抗溶液,37℃、室温、4℃条件下观察抗体效价变化。结果 0.1～0.8 mol/L的葡萄糖、蔗糖、麦芽糖对抗A、B单抗效价均有一定稳定作用,同种糖高浓度的稳定效果优于低浓度,最佳有效稳定浓度为0.4 mol/L。葡萄糖、蔗糖、麦芽糖作为稳定剂存在时,37℃下腹水单抗的效价稳定性可延长至2～3周,室温下可延长至4～6个月,4℃下可延长至24个月。结论葡萄糖、蔗糖、麦芽糖均可作为单抗的稳定剂,可提高抗体的稳定性,延长使用期限;蔗糖效果更好。
- 张坤娟邓郁青弋国红张红中王从印张雪迎王惠芬
- 关键词：单克隆抗体稳定性蔗糖麦芽糖
- 瑞香狼毒甲醇提取物抗瘤机理研究被引量：26
- 2003年
- 目的 研究瑞香狼毒甲醇提取物的抗瘤机理。方法 用不同剂量的瑞香狼毒甲醇提取物 (简称醇提物 ) ,观察其体内对荷瘤鼠和所荷肿瘤生长的作用 ;MTT法研究其体内对荷瘤鼠脾细胞转化及NK活性 ,体外对正常鼠脾细胞生长、转化和NK活性以及对 3株肿瘤细胞增殖的影响 ;流式细胞术和透射电镜检测其体外对K5 6 2的细胞周期和凋亡及p5 3、bcl 2和c myc基因表达的影响 ;台盼蓝拒染法检测其体外对K5 6 2增殖曲线的影响。结果 体内 ,每天 5 μg kg醇提物可抑制肿瘤生长 ,提高荷瘤鼠免疫功能。体外 ,0 .1～ 10 μg ml醇提物可刺激脾细胞增殖和协同最适量和亚适量ConA刺激脾细胞转化 ,0 .1、1μg ml醇提物可提高脾细胞NK杀伤活性 ,0 .1～ 10 μg ml醇提物对K5 6 2、S180和YAC 1的增殖均有抑制作用 ,K5 6 2最为敏感。 0 .5 μg ml醇提物作用的K5 6 2 ,处于G0 G1 期的细胞和凋亡细胞显著增加 ,p5 3基因表达显著增加 ,bcl 2和c myc基因表达显著下降。K5 6 2在 0 .5 μg ml醇提物作用2 4h后洗去或不洗去培养 9d ,细胞虽仍存活 ,但密度却不增加。结论 醇提物在一定剂量范围内可抑制肿瘤细胞生长 ,提高荷瘤鼠免疫功能。抗瘤机理与其可刺激脾细胞增殖 ,协同ConA刺激脾细胞转化和提高脾细胞NK杀伤活性及阻滞肿瘤细胞周期 ,?
- 王润田张坤娟佟慧李全海邓郁青
- 关键词：瑞香狼毒甲醇提取物
- 伊班膦酸钠对糖皮质激素引起的家兔骨质量下降的预防作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨伊班膦酸钠在糖皮质激素引起的家兔骨质量下降的预防作用。方法 30只新西兰大白兔,随机分为对照组、模型组(肌肉注射地塞米松,3mg/kg,2次/周,)和干预组(肌肉注射1次伊班膦酸钠2mg/kg进行干预,肌肉注射地塞米松3mg/kg,2次/周)。6周后,第3腰椎、两侧股骨与肱骨进行骨生物力学测定,第2腰椎和右侧股骨颈苏木精-伊红(HE)染色进行形态学观察与分析。结果与对照组相比,模型组腰椎压缩实验和股骨三点弯曲实验的最大负荷及肱骨扭转最大扭矩分别降低了27.2%、26.8%和52.0%(P<0.01);形态学观察骨质疏松的形态改变明显,家兔腰椎骨小梁面密度、厚度、数目分别降低了57.5%、39.2%和35.5%,分离度增加了120.8%(P<0.01)。与模型组相比,干预组骨生物力学指标分别增加了24.2%、29.9%和37.2%(P<0.01);形态学观察骨小梁则排列密集、连接增多、成骨活跃、腔内血细胞丰富,家兔腰椎骨小梁面密度、厚度、数目分别增加100.0%、40.6%和45.7%,分离度降低了43.9%(P<0.01)。股骨颈骨小梁形态计量学变化与腰椎骨小梁的变化相似。结论糖皮质激素开始治疗的同时,应用伊班膦酸钠进行干预,可有效预防实验家兔骨质量的下降。
- 高春香张剑张坤娟薛小梅李艳伟董海宁刘东刚
- 关键词：骨质疏松症糖皮质激素伊班膦酸钠
- 抗HIV-1 gp41单克隆抗体的制备及意义
- 2009年
- 目的为HIV-1感染的检测和研究提供依据。方法以基因工程重组抗原HIV-1 gp41蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法制备抗gp41蛋白的单克隆抗体(mAb),用ELISA法鉴定所得mAb的Ig亚类、效价及特异性。单抗经饱和硫酸铵(SAS)纯化和HRP标记后,利用双抗体夹心ELISA筛选检测gp41蛋白的最佳配伍单抗,分别包被ELISA板及作为酶标mAb,建立双mAb夹心ELISA法。结果经细胞融合、筛选、克隆化,获得了12株可分泌高效价mAb的杂交瘤细胞。纯化的腹水mAb经配对试验,选出2株mAb:7D4和9G2-HRP建立了双mAb夹心ELISA法,检测HIV-1 gp41抗原的灵敏度是1μg/L。结论获得12株效价高的抗HIV-1 gp41的mAb,建立了特异性强、灵敏度较高的检测HIV-1 gp41抗原的双抗体夹心ELISA法。
- 邓郁青张坤娟王从印张征峥宋小天张红中王润田
- 关键词：人类免疫缺陷病毒-1单克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 抗HIV-1 p24单克隆抗体的制备、特性鉴定及初步应用被引量：3
- 2006年
- 目的:制备抗HIV1p24单克隆抗体(mAb)及特性鉴定。方法:采用细胞融合技术制备可稳定分泌抗HIV1p24mAb的杂交瘤细胞。选择高效价、识别不同抗原表位的mAb纯化后,分别包被ELISA板及作为酶标记mAb,建立双mAb夹心ELISA法,检测400份正常人血浆,20份抗HIV抗体阳性(p24抗原阴性)的血浆,20份HIV1感染的细胞培养上清及HIV1p24抗原国家参考品,并同时用进口p24抗原检测试剂盒进行对比检测。结果:经细胞融合、筛选、克隆化,共获得10株可分泌高效价mAb的杂交瘤细胞。纯化的腹水mAb经配对试验,选A值≥2.50的2株mAb建立的双mAb夹心ELISA法,敏感性可达2.5ng/L,且与进口试剂盒检测结果的一致性良好。结论:建立了具有高度敏感性和特异性的双mAb夹心ELISA法,为研制可用于检测HIV1p24抗原的试剂盒奠定了基础。
- 张红中王润田王蕙芬张坤娟王从印王丽
- 关键词：HIV-1P24单克隆抗体ELISA
- 瑞香狼毒甲醇提取物抗瘤机理的研究
- 目的:研究瑞香狼毒甲醇提取物的抗瘤机理。方法:用不同剂量的瑞香狼毒甲醇提取物(简称醇提物),观察其体内对荷瘤鼠和所荷肿瘤生长的作用;MTT法研究其体内对荷瘤鼠脾细胞转化及NK活性,体外对正常鼠脾细胞生长、转化和NK活性以...
- 张坤娟王润田佟慧李全海邓郁青
- 文献传递
- 瑞香狼毒提取物抗肿瘤免疫机理的研究
- 该文应用瑞香狼毒的醇提取物(简称瑞提物)从三个方面对其抗肿瘤作用和对免疫功能的影响进行了较了系统的研究,以揭示其肿瘤的机理与免疫功能的联系.
- 张坤娟
- 关键词：抗肿瘤免疫功能小鼠
- 文献传递
