张帆
- 作品数：6 被引量：21H指数：2
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- 乙型肝炎病毒S基因(包括PreS)和C基因在重组痘苗病毒中同时表达被引量：1
- 1993年
- 用重组痘苗病毒作载体,在11k、7.5k启动子控制下表达乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)大蛋白、核心抗原(HBcAg)和e抗原(HBeAg)。S和C基因的同时表达与单独表达其表达水平基本接近。大蛋白不分泌,存在于细胞浆内,SDS-PAGE检测未发现中蛋白和主蛋白。核心抗原亦不分泌,但e抗原可分泌,并且表达量大大高于核心抗原。家兔一次性接种重组病毒后,50％以上能产生有关抗体。
- 张帆田淑芳阮力强东朱既明
- 关键词：乙型肝炎病毒痘苗病毒核心抗原
- 聚合酶链反应检测沅江县牛尿中的钩端螺旋体DNA
- 1996年
- 本研究应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物的凝胶电泳及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ，检测湖南４３份牛尿标本中的钩端螺旋体ＤＮＡ，前法阳性率为９．３％，后法为１４％，表明牛群具有较高的带菌率，是钩端螺旋体的主要宿主，是钩端螺旋体病的重要传染源。
- 梁中兴时曼华李庆俊张立新李俊华余少华张帆
- 关键词：钩端螺旋体聚合酶链反应传染源钩端螺旋体病
- 利用脊髓灰质炎病毒5'NCR和RNA聚合酶基因可提高外源基因表达
- 2000年
- 将含脊髓灰质炎病毒 (PV)RNA聚合酶的不同长度基因片段克隆到载体 pSG5质粒上 ,分别构建了 4个表达RNA聚合酶的质粒。体外转录实验证明 ,pSG5 POL1 99和 pSG5 POL2 0 3质粒转染细胞的提取物促进了特异的RNA转录 ,表明两质粒可表达RNA聚合酶。将PV的 5'NCR序列插在载体 pGREENLANTERN 1的CMV启动子下游 ,构建了 pGREENLANTERN 1 5'NCR质粒 ;用 LacZ基因替换GFP基因分别插入到PGREENLANTERN 1和pGREENLANTERN 1 5'NCR质粒上 ,构建成 pLacZLANTERN 1和 pLacZLANTERN 1 5'NCR质粒。表达RNA聚合酶的质粒与 pLacZ 5'NCR调控表达报告基因的质粒共转染 ,明显提高了报告基因的表达水平 ,表明PV的表达调控元件和RNA聚合酶基因可用于构建外源基因高效表达载体。
- 谭明岐纪志武张帆李殿俊阮力
- 关键词：基因疫苗脊髓灰质炎病毒RNA聚合酶LACZ
- 非复制型多价重组痘苗病毒粘膜与细胞免疫效果被引量：8
- 1999年
- 对已构建的同时表达乙型肝炎病毒ＳＳ１、麻疹病毒ＨＡ和Ｆ以及ＩＬ２的非复制型重组痘苗病毒ＶＨＦＩＬ２ΔＣＫＳＳ１，及其相应的复制型重组病毒ＶＨＦＩＬ２ＳＳ１，进行了兔皮内毒力、粘膜免疫和细胞免疫效果的比较研究。发现ＶＨＦＩＬ２ΔＣＫＳＳ１在兔皮内的毒力明显低于ＶＨＦＩＬ２ＳＳ１。ＶＨＦＩＬ２ΔＣＫＳＳ１经空肠内免疫家兔４周后，可在肠粘膜表面诱发特异性ＩｇＡ抗体，在血液中诱发特异性的ＩｇＧ抗体，其抗ＳＳ１和抗麻疹病毒ＩｇＡ和ＩｇＧ的抗体滴度与ＶＨＦＩＬ２ＳＳ１免疫组相同，抗痘苗病毒ＩｇＧ抗体比ＶＨＦＩＬ２ＳＳ１免疫组低１６倍。ＶＨＦＩＬ２ΔＣＫＳＳ１经腹腔注射免疫４周的小鼠脾细胞，可在体外刺激产生高水平的麻疹病毒及痘苗病毒特异性ＣＴＬ，与ＶＨＦＩＬ２ＳＳ１无显著性差异。这些结果初步证实了非复制型痘苗病毒载体作为多价疫苗载体的有效性及安全性。
- 马海伦郭斐孙朝晖陆柔剑张帆阮力
- 关键词：毒力粘膜免疫
- 同时表达多种外源基因的非复制型重组痘苗病毒的构建被引量：18
- 1999年
- 利用非复制型痘苗病毒载体，构建了能同时表达乙型肝炎（乙肝）病毒ＳＳ１、麻疹病毒ＨＡ和Ｆ及白细胞介素２（ＩＬ２）的非复制型重组痘苗病毒ＶＨＦＩＬ２ΔＣＫＳＳ１，及其相应的复制型重组痘苗病毒ＶＨＦＩＬ２ＳＳ１。这两株重组病毒在ＣＥＦ细胞上连续传至第２５代，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ证实，两株病毒均在Ａ２４、Ａ２７间稳定整合有ＳＳ１基因，非复制型重组病毒Ｃ、Ｋ间基因稳定缺失。经ＲＩＡ、ＥＬＩＳＡ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法检测，这两株病毒均可稳定分泌表达ＳＳ１蛋白，其分泌表达的ＳＳ１蛋白与ＣＨＯ细胞表达的ＳＳ１蛋白性质相近，接近于天然。经免疫打点检测，两株病毒均可稳定表达麻疹病毒的ＨＡ与Ｆ蛋白以及ＩＬ２。而且ＶＨＦＩＬ２ΔＣＫＳＳ１与ＶＨＦＩＬ２ＳＳ１表达多种外源抗原的水平无显著性差异。ＶＨＦＩＬ２ΔＣＫＳＳ１经皮内注射免疫家兔，４周后可诱发抗乙肝病毒ＳＳ１、抗麻疹病毒及抗痘苗病毒的特异性ＩｇＧ抗体；加强免疫２周后，特异性抗体滴度可上升４～１６倍，与其初始病毒ＶＨＦＩＬ２ΔＣＫ诱发的抗体水平相同，比ＶＨＦＩＬ２ＳＳ１诱发的抗体滴度低０～４倍。非复制型多价重组痘苗病毒的构建，为评价非复制型痘苗病毒载体作为多价疫苗载?
- 马海伦孙朝晖陆柔剑娄元梅郭斐张帆阮力
- 关键词：多价疫苗痘苗病毒载体免疫效果
- 霍乱毒素作为口服-粘膜免疫佐剂的研究
- 1996年
- 近年来,随着分子生物学和免疫学的迅速发展,对病毒和其他微生物蛋白的结构基因及其表达产物在免疫反应中的作用有了更深入的了解。DNA 重组及多肽合成技术使我们能获得纯度更高和定义更明确的抗原决定簇和抗原,从而诱导有针对性的保护性反应。
- 张帆阮力
- 关键词：粘膜免疫佐剂霍乱毒素霍乱
