张春
- 作品数：50 被引量：174H指数：8
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- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 重组腺病毒载体对大鼠胶质瘤细胞转染效率的影响
- 2013年
- 目的研究转染复数(MOI)和转染时间对重组腺病毒载体转染大鼠胶质瘤细胞转染效率的影响。方法体外培养大鼠胶质瘤细胞(C6细胞),用携带有rHSG基因的重组腺病毒载体(Adv-rHSG-GFP)转染C6细胞。根据MOI将细胞分为:A组MOI=0、B组MOI=10、C组MOI=50、D组MOI=80、E组MOI=100,转染Adv-rHSG-GFP 24h后分别收集每组细胞,采用Western Blot和免疫细胞化学法检测rHSG蛋白的表达,并通过流式细胞仪和倒置荧光显微镜观察GFP阳性表达来评价重组腺病毒载体的转染效率。用MOI为100的Adv-rHSG-GFP转染C6细胞不同时间后(12、24、36和48h),同法收集细胞并检测rHSG蛋白的表达及评价重组腺病毒载体的转染效率。结果 Adv-rHSG-GFP转染C6细胞24h后,rHSG蛋白的相对表达量和绿色荧光蛋白表达随MOI值的增高而增多;用MOI为100的Adv-rHSG-GFP转染C6细胞后,12h即可观察到绿色荧光蛋白的表达,且在24h内随时间的变化而增高,在24~36h绿色荧光蛋白表达无变化,48h有所降低(P<0.01);rHSG蛋白相对表达量在12~48h内随时间的变化而增高,于48h达到最大值(P<0.01)。结论重组腺病毒载体能够有效转染C6细胞,且在MOI值为100,24h时有最高转染效率。
- 高鹏张春赵巍沈冰
- 关键词：腺病毒转染
- 大黄素抑制Lovo细胞迁移与黏附的作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨大黄素对lovo细胞与内皮细胞迁移和黏附的影响。方法采用MTT法检测大黄素对Lovo细胞和HUVECs增殖的影响,分光光度法检测大黄素对Lovo细胞与HUVECs黏附的影响,Transwell双层小室观察大黄素对Lovo细胞迁移穿过单层HUVECs的影响。结果与对照组比较,10～40μmol/L大黄素对Lovo细胞和HUVECs增殖无显著性影响(P>0.05);与对照组比较,大黄素能够降低Lovo细胞与内皮细胞的黏附(P<0.05),并显著减少迁移与穿过单层HUVECs的Lovo细胞数目(P<0.05)。结论大黄素具有抑制肿瘤细胞与内皮细胞的黏附以及肿瘤细胞迁移穿过内皮细胞的作用,提示其具有抗肿瘤转移的潜能。
- 张春韩丽君董海影李智勇常星兴桂华
- 关键词：大黄素肿瘤转移迁移
- 分散人绒毛膜滋养层细胞及细胞培养
- 2004年
- 目的 获取人绒毛膜滋养层细胞。方法 应用胰酶 /DNA酶法进行消化后进行培养。经光镜和电镜观察。结果 我们获取了人绒毛滋养层细胞并成功培养。结论 取人妊娠 4 5～ 5 5D刮宫术后的绒毛组织 ,经胰酶。
- 张春柏艳红周丽
- 关键词：人绒毛膜滋养层细胞DNA酶细胞培养胰酶刮宫术绒毛组织
- Orexin A减轻谷氨酸诱导的HT22神经元损伤
- 2019年
- 目的探讨Orexin A对谷氨酸诱导小鼠海马神经元细胞系(HT22)细胞损伤的保护作用。方法培养HT22细胞,建立谷氨酸诱导HT22细胞损伤模型,CCK-8法检测Orexin A对谷氨酸诱导HT22细胞的存活率的影响,流式细胞技术检测Orexin A对谷氨酸诱导HT22细胞的凋亡的影响,蛋白印迹法检测ERK1/2磷酸化水平。结果确定30 mmol·L^-1谷氨酸浓度为本实验谷氨酸诱导HT22神经元损伤模型的实验条件;在实验浓度范围内,Orexin A本身对HT22细胞存活率无明显影响;与模型组细胞相比,100 nmol·L^-1和1000 nmol·L^-1 Orexin A干预组的细胞存活率上升(P<0.05);Orexin A干预组细胞凋亡比例相对减少(P<0.05),而Orexin OX1受体拮抗剂(SB-334867)干预组细胞凋亡比例无改变(P>0.05)。Orexin A干预组ERK1/2磷酸化水平与模型组差异无统计学意义(P>0.05);与Orexin A干预组比较,SB-334867干预组ERK1/2磷酸化水平增加(P<0.05)。结论Orexin A对谷氨酸诱导的HT22神经元损伤具有保护作用。
- 和祯泉马康张春张瑞丁娜左娣孙涛牛建国
- 关键词：OREXIN谷氨酸小鼠
- 大黄素对人结肠癌Lovo细胞增殖周期影响的实验研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察大黄素对人结肠癌Lovo细胞增殖及周期的影响。方法采用MTT法检测大黄素不同浓度梯度(20、40、80μmol/L)和时间梯度(12、24、48h)处理后Lovo细胞的增殖活力;采用流式细胞仪检测Lovo细胞周期变化。结果大黄素对Lovo细胞的增殖抑制作用呈明显的浓度和时间依赖性,流式细胞仪分析发现在大黄素作用下Lovo细胞被阻滞于G0/G1期,阻止细胞进入S期,并成剂量依赖性。结论大黄素对结肠癌Lovo细胞增殖具有显著的抑制作用;且使Lovo细胞增殖周期停滞于G0/G1期,而阻止其进入S期,具有良好的结肠癌临床应用前景。
- 潘虹张春周丽
- 关键词：大黄素结肠癌细胞增殖细胞周期
- 低分子量姬松茸多糖对HT-29细胞与内皮细胞迁移、黏附的影响被引量：6
- 2009年
- 目的探讨低分子量姬松茸多糖(LMPAB)对肿瘤细胞与内皮细胞迁移和黏附的影响。方法采用MTT法检测LMPAB对人结肠癌细胞(HT-29)和HUVECs增生的影响。采用分光光度法检测LMPAB对HT-29细胞与HUVECs黏附的影响,采用transwell双层小室观察LPMPAB对HT-29迁移穿过单层HUVECs的影响。结果LMPAB对HT-29和HUVECs增生无显著性作用,LMPAB能够降低HT-29细胞与内皮细胞的黏附,并减少迁移和穿过单层内皮细胞的肿瘤细胞数目。结论低分子量姬松茸多糖通过抑制肿瘤细胞与内皮细胞的黏附以及肿瘤细胞迁移穿过内皮细胞而发挥其抗肿瘤转移作用。
- 张春隋薇王慧荣李学岩刘吉成
- 关键词：肿瘤转移迁移
- 低分子量姬松茸多糖抑制HT-29细胞与内皮细胞粘附作用及其机制
- 目的:以黏附为切入点,探讨LMPAB抗肿瘤转移的机制。方法:LMPAB分别以5ug.m1、10ug.ml、20ug.ml作用于HT-29细胞48h,MTT比色法检测细胞增殖活性,用Transwell小室检测LMPAB对肿...
- 张春牛英才刘吉成
- 文献传递
- 基于CRISPR/Cas9技术AEG-1基因敲除神经细胞系的构建及AEG-1基因敲除介导的神经细胞周期阻滞和细胞凋亡抑制被引量：2
- 2018年
- 星形胶质细胞上调基因-1(AEG-1)是近年来研究较多的癌基因,但在神经系统疾病方面研究尚少。AEG-1与神经退行性疾病有关,然而其具体作用机制尚不明确。本研究通过设计靶向AEG-1 sgRNA序列并合成相应寡核苷酸,将其克隆到GV392质粒中,构建sgRNA/Cas9二合一表达载体,并进行慢病毒包装纯化。用慢病毒感染小鼠海马神经元HT22细胞,进行药物筛选和sgRNA活性鉴定,建立稳定的AEG-1基因敲除的细胞系;并进一步观察神经元HT22细胞的增殖与凋亡能力。结果显示,成功构建了3种靶向AEG-1基因的sgRNA/Cas9二合一表达载体。所设计的sgRNA的插入序列和开放阅读框架完全正确,成功建立了AEG-1基因敲除的稳转神经细胞系。进一步研究表明,AEG-1敲除后的神经HT22细胞与正常神经HT22细胞相比,细胞突起数目减少,细胞周期阻滞,细胞凋亡率减少。以上结果为后续进一步研究AEG-1与神经系统疾病关系奠定了基础。
- 王斌刘昆梅郭乐张春和祯泉丁娜杨华孙之鹏王晓
- 关键词：细胞凋亡
- 树舌多糖对胃癌MGC-803细胞PTK活性的影响
- 2010年
- 目的研究树舌多糖(Ganoderma applanatum polysaccharides,GAPS)对MGC-803细胞增殖和PTK活性的影响,探讨树舌多糖抗肿瘤作用机制。方法 MTT法检测树舌多糖对胃癌细胞MGC-803增殖抑制作用;流式细胞术检测PTK活性。结果树舌多糖对胃癌MGC-803细胞具有增殖抑制作用,且呈时间及浓度依赖性。树舌多糖能下调PTK活性,与细胞对照组比较有差异(P<0.05)。结论树舌多糖能抑制胃癌MGC-803细胞的增殖,下调PTK活性。
- 潘洪明王玉郑丽红张春静许惠玉张英博张春李荣辉
- 关键词：树舌多糖MGC-803细胞
- 低分子量姬松茸多糖对树突细胞Th1型免疫反应的影响被引量：6
- 2014年
- 目的探讨姬松茸多糖(LMPAB)对树突细胞(DCs)Th1型免疫反应的影响。方法体外培养ICR小鼠骨髓来源的DCs。应用WST检测LMPAB增强DCs对T淋巴细胞的增殖作用,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测LMPAB对DCs分泌的干扰素(IFN-)γ与白细胞介素(IL)-12的影响。结果与正常组(4.84±0.21)比较,LMPAB+卵白蛋白(OVA)组(6.59±0.19)可以增强DCs对T淋巴细胞的增殖作用(P<0.05);与正常组IL-12〔(32.31±2.45)pg/ml〕、IFN-γ〔(657.34±43.41)pg/ml〕比较,LMPAB+OVA组IL-12〔(45.89±1.03)pg/ml、IFN-γ(854.42±35.06)pg/ml〕明显升高(P<0.05)。结论 LMPAB可以增强DCs Th1型免疫反应,可能具有免疫佐剂的调节作用。
- 董海影张春韩翠翠杨莹马立威牛英才刘吉成
- 关键词：姬松茸多糖树突细胞TH1型
