李岭
- 作品数：41 被引量：37H指数：4
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家科技基础性工作专项北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 鸭肠炎病毒gE、gI双基因缺失病毒株的构建及其应用
- 本发明涉及鸭肠炎病毒gE、gI双基因缺失病毒株的构建及其应用。其中涉及一种gE、gI双基因缺失、绿色荧光蛋白标记的重组鸭肠炎病毒，及其构建方法；本发明构建了缺失gI基因3’端的1068bp、gE基因5’端的510bp以及...
- 杨承槐李俊平李启红李岭曹明慧孙莹李慧姣
- 文献传递
- 伪狂犬病病毒双荧光标记5基因缺失株的构建
- 本发明涉及一种伪狂犬病病毒双荧光标记5基因缺失株的构建。该病毒株是以自行分离的一株伪狂犬病病毒(SX株)为母本，通过分子生物学手段，缺失伪狂犬病病毒的gE基因、gI基因、US9基因、UL49.5部分基因和TK基因，并以绿...
- 李俊平杨承槐陈晓春李慧姣孙莹张广川李启红曹明慧李岭
- 文献传递
- 鸭肠炎病毒强毒参考株在感染鸭体内的动态分布研究被引量：1
- 2014年
- 为研究鸭肠炎病毒(DEV)强毒株在感染鸭体内的动态分布规律,根据DEV的g D基因序列设计检测引物RT-g DF和RT-g DR,建立了特异性强、敏感性高、重复性好的检测DEV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。应用已建立的方法,对DEV强毒参考株感染鸭的组织脏器进行了定量检测。结果显示,接种后6 h即可在所有受检组织中检测到DEV DNA,随着病程发展,DNA拷贝数持续升高,直至接种5 d后感染鸭全部死亡。其中结肠病毒DNA拷贝数为最高,达到1013.26copies/g,法氏囊、肝脏和盲肠次之,约1012copies/g。证实了DEV强毒对感染鸭的免疫器官、神经组织和消化系统均具有广泛的嗜性。
- 文晶亮李俊平李启红李岭孙淼李慧姣杨承槐夏业才
- 关键词：鸭肠炎病毒
- H5亚型禽流感重组鸭肠炎病毒rDEVΔUL2-H5株的构建及其应用
- 本发明涉及H5亚型禽流感重组鸭肠炎病毒rDEVΔUL2-H5株的构建及其应用。本发明设计构建了一株重组鸭肠炎病毒rDEVΔ UL2-H5，该毒株是表达5亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的重组鸭肠炎病毒，可用于制备制备成活...
- 杨承槐李俊平侯力丹刘丹毛娅卿李岭李启红李慧姣王乐元
- 文献传递
- 鸡痘病毒活疫苗污染禽网状内皮组织增生症病毒的间接免疫荧光法检测研究被引量：4
- 2018年
- 通过向无外源病毒污染的鸡痘病毒活疫苗中添加不同剂量的禽网状内皮组织增生症病毒(REV),然后用间接免疫荧光法(IFA)进行检测,确定了该IFA方法的最低检出量为每500羽份疫苗中污染20 TCID_(50)的REV。使用该方法对国内16家企业生产的60批鸡痘病毒活疫苗进行了检验,结果显示2个企业生产的4批疫苗REV检测为阳性。随机选取5批IFA检测阴性样品和4批IFA检测阳性样品,按鸡检查法进行外源病毒检验,结果两种方法对REV污染的检测结果的符合率为100%。
- 孙淼李岭李启红夏业才李慧姣李俊平杨承槐
- 关键词：网状内皮组织增生症病毒间接免疫荧光法
- 鸡传染性贫血病毒VP1、VP2基因的表达及免疫原性研究
- 2015年
- 为探索鸡传染性贫血重组蛋白亚单位疫苗的可行性,将鸡传染性贫血病毒基因分别克隆到转移载体p Fast Bac HTA中,再将其分别转化DH10Bac感受态细胞得到相应的重组表达载体,转染昆虫细胞Sf21获得含有VP1、VP2基因的重组杆状病毒v Bac-VP1、v Bac-VP2,应用悬浮培养的Sf21细胞表达重组蛋白。SDS-PAGE及Western blotting结果证明,VP1、VP2基因在昆虫细胞中得到了表达,动物试验进一步证实,重组蛋白免疫SPF鸡可产生ELISA抗体,提示杆状病毒表达的VP1、VP2具有良好的免疫原性。
- 徐微李启红李岭孙淼李俊平杨承槐李慧姣
- 关键词：鸡传染性贫血病毒杆状病毒表达VP1VP2免疫原性
- 鸡减蛋综合征灭活抗原不同保存方式的分析比较
- 2017年
- 为比较不同保存方式对鸡减蛋综合征灭活抗原的影响,采用禽腺病毒京911株(CVCC AV70)经尿囊腔接种易感鸭胚,收获感染鸭胚液,经β-丙内酯灭活后,对该抗原的保存条件及其稳定性等方面进行优化。冻干抗原与未冻干抗原在相同温度下,冻干抗原HA效价下降较慢。冻干抗原在2~8℃和-15℃以下保存,HA效价没有明显差异。因此,生产的鸡减蛋综合征灭活抗原要在冻干后保存在2~8℃最佳。保存条件的优化不仅可以减少经济损失,而且还有助于更好的控制禽腺病毒疫情的暴发。
- 王嘉顾庆云金红岩毛娅卿吴涛王哲孔冬妮李岭
- 关键词：鸡减蛋综合征禽腺病毒HA效价
- 牛布鲁氏菌病、结核、炭疽、口蹄疫、病毒性腹泻黏膜病、副流感、传染性鼻气管炎可视化基因芯片检测方法的建立被引量：14
- 2019年
- 针对现有牛病病原检测方法指标单一,操作复杂的现状,拟建立一种可高效检测牛布鲁氏菌病、结核、炭疽、口蹄疫、病毒性腹泻黏膜病、副流感、传染性鼻气管炎的基因芯片技术。根据已公布的各病原核酸序列,设计引物和探针。利用多重PCR方法扩增目的片段,扩增产物与探针特异性杂交,芯片反应显色后肉眼观察进行检测结果判定。优化反应条件、建立检测方法,同时对检测方法的灵敏度、可重复性、特异性、保存期等进行评价。结果显示,该基因芯片检测方法单一病原灵敏度检测可达1.0×10^(-6) ng/μL,混合病原灵敏度检测可达1.4×10^(-5) ng/μL;各病原间无交叉反应,检测健康牛血清、组织,牛流行性热病毒也均无响应;针对同一阳性质控品,芯片重复率达100%。保存期试验表明,芯片在2～8℃至少可保存6个月。检测30份临床样本,结果与标准方法结果一致。实验建立的方法具有高通量、高灵敏度、高特异性等特点,可在3 h内完成同时对七种牛重要疫病的检测,在牛群疫病诊断、净化及流行病学调查等方面有良好的应用前景。
- 魏春霞孙淼赵炜陈延飞刘怀东张敏李岭陈建才学鹏曾巧英薛青红
- 关键词：牛布鲁氏菌病炭疽副流感传染性鼻气管炎
- 一种对多种牛的疫病进行联检的基因芯片以及试剂盒
- 本发明涉及一种核酸序列，以及用于对牛的疫病进行检测的基因芯片，其包括反应孔板，其中在每个反应孔中点样针对多种牛的疫病的核酸序列、阳性对照、阴性对照和空白对照；本发明另外涉及包括该基因芯片的检测试剂盒。
- 薛青红孙淼才学鹏陈建陈延飞李岭
- 文献传递
- 鸭肠炎病毒囊膜糖蛋白gE基因序列分析及真核表达载体的构建被引量：1
- 2014年
- 为探索鸭肠炎病毒（DEV）囊膜糖蛋白gE基因的相关特性和功能，应用PCR扩增了DEV的gE基因，全长1473bp，编码490个氨基酸，其中1～22位氨基酸为信号肽。gE基因与国内分离强毒CHv株、国内疫苗株同源性均为100％，与德国分离强毒2085株同源性达到99％，显示其高度保守。将gE基因完整开放阅读框（gE）和去信号肽的gE基因（gE’）分别克隆至真核表达载体pCDNA3．1．获得重组质粒pCDNA3．1-gE、pCDNA3．1-gE，然后应用脂质体法转染vero细胞。RT—PCR扩增证实gE、gE’均在细胞内进行了转录，而间接免疫荧光试验证实只有gE’基因在veto细胞中获得了表达，h研究gE蛋白的功能及研制鸭瘟抗体检测试剂盒奠定了基础。
- 文晶亮李启红李俊平刘丹李岭杨承槐李慧姣夏业才
- 关键词：鸭肠炎病毒真核表达
