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杨承槐: 作品数：125 被引量：192H指数：7; 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>; 发文基金：国家科技基础性工作专项国家科技重大专项北京市自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>

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国内外生产用传代细胞系致瘤性检验方法的比较与分析被引量：1: 2020年; 2013年WHO生物制品标准化专家委员会发布了最新版的动物细胞基质生产生物医药产品和细胞库特性的评价建议(Recommendations for the Evaluation of Animal Cell Culture as Substrates for the Manufacture of Biological Medicinal Products and for the Characterization,简称技术指南),该技术指南对我国药品管理机构制定关于生产用细胞库的检定与特性描述的相关技术要求具有很好的参考意义。对发布WHO技术指南及我国现行版《中华人民共和国兽药典》三部中涉及的细胞致瘤性检验相关要求进行介绍、梳理和比较,并从检验方法要求和内容的完善、体外替代方法等方面进行探讨。; 王磊杨承槐刘莹; 关键词：致瘤性生物制品

不同处理方式对外源病毒检测中FAdV-I检出限量的影响: 2022年; 据报道Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-I)在禽活疫苗中的污染是其可能的传播途径之一,加强对活疫苗中FAdV-I检测至关重要。为探索建立FAdV-I检测标准,本研究参照《中华人民共和国兽药典》中外源病毒检测相关疫苗处理措施,对不同方式处理后FAdV-I检测的影响进行了摸索。结果显示:当离心力不大于8000×g时,4℃离心10 min不会引起FAdV-I病毒含量下降,10000×g和12000×g分别离心10 min,病毒含量分别下降50%和68%,8000×g离心后再经0.45、0.22μm滤膜各滤过一次,病毒含量下降68%;8000×g离心后0.45、0.22、0.1μm滤膜各滤过1次后,病毒含量下降90%,12000×g离心后0.45、0.22、0.1μm滤膜各滤过1次后,病毒含量下降95%;SPF鸡血清及检验中常用的抗血清中和疫苗过程中在4℃或37℃作用1 h均不会引起FAdV-I病毒含量降低。上述指标为疫苗中FAdV-I污染的检测方法建立提供了参考数据。; 侯力丹刘丹刘丹薛麒翟天舒李俊平李俊平陈晓春; 关键词：活疫苗外源病毒

传染性法氏囊病病毒BC6/85株全基因组克隆及其序列分析: 以传染性法氏囊病病毒(IBDV)BC6／85株基因组RNA为模板，采用RT-PCR方法扩增并克隆了IBDV BC6／85株基因组全长cDNA。序列测定结果表明：A节段全长共3260个核苷酸，与IM株的同源性最高为97.4...; 于雷杨承槐李俊平李启红刘丹黄建华李慧姣; 关键词：传染性法氏囊病病毒基因克隆

鸭瘟病毒强毒株在感染鸭体内的动态分布研究: 为了研究鸭瘟强毒CSC株在感染鸭胸腺、脾脏、法氏囊、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、十二指肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、大脑、三又神经节、血清和泄殖腔拭子中的动态分布规律,根据Gene Bank中鸭瘟CSC株的gD基因...; 文晶亮李俊平李启红李岭孙淼李慧姣杨承槐夏业才; 关键词：实时荧光定量PCR

表达绿色荧光蛋白重组鸭肠炎病毒构建被引量：3: 2016年; 【目的】鸭肠炎病毒(duck enteritis virus,DEV)不同毒株间存在明显差异,DEV疫苗株的UL2基因在195bp后连续缺失528bp,导致第65位氨基酸后连续缺失176aa^([1])。将绿色荧光蛋白(GFP)基因插入DEV UL2基因中,获得表达绿色荧光蛋白的重组病毒,以研究UL2基因对DEV生物特性的影响和探讨DEV作为载体表达外源基因的可行性。【方法】以实验室保存的DEV细胞适应株DNA为模板,利用PCR技术扩增出病毒UL2基因上下游序列并克隆入pMD-18T载体;以UL2基因作为外源基因插入靶点及同源重组臂,将CMV启动子控制的含有GFP-gpt基因表达盒克隆入DEV UL2基因中,构建含GFP基因的转移质粒载体pT-UL2-GFP-gpt;用脂质体将其与DEV细胞适应株共转染CEF细胞,待80%细胞出现病变后,冻融3次,接种到新鲜CEF细胞单层的6孔培养板中,用含5%血清、1%双抗、1%琼脂的M199培养液覆盖,在荧光显微镜下挑取单个有绿色荧光的蚀斑,再接到新的细胞上,重复蚀斑筛选、纯化表达绿色荧光蛋白的重组病毒;利用PCR、基因测序技术鉴定重组病毒;重组病毒接种CEF(moi=0.01),每12h取出1瓶接毒细胞,分别收集上清和细胞,测量其病毒含量,绘制一步生长曲线;重组病毒在CEF中连续传代20次,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况,并用PCR检测GFP的传代稳定性;重组病毒免疫4周龄SPF鸭后14d,肌肉注射接种DEV强毒(CVCC AV1221),观察免疫保护情况。【结果】经双酶切鉴定,成功构建了含绿色荧光蛋白报告基因的转移质粒载体p T-UL2-GFP-gpt,将其与DEV共转染CEF细胞后8h,即可见转染细胞中有带有绿色荧光的梭形细胞,经过8轮蚀斑筛选,获得纯化的重组病毒rDEV-△UL2-GFP-gpt;PCR鉴定及基因测序结果显示,GFP标记基因成功地插入到DEV基因组中,替换了DEV UL2基因的196—723位核苷酸;一步生长曲线结果显示,重组病毒在细胞和上清中的病毒含量分别在36h和72h达到峰值,为10^(6.; 孙莹李俊平黄小洁李岭曹明慧李启红李慧姣杨承槐; 关键词：鸭肠炎病毒绿色荧光蛋白重组病毒

猪链球菌Ⅱ型四川分离株对抗菌药的敏感性分析被引量：12: 2005年; 对四川省不同地区链球菌病病死猪体内分离的7株链球菌Ⅱ型进行抗菌药敏感性试验,用链球菌兰氏D群C55914作为对照,比对菌为肺炎链球菌质控菌株ATCC49619。在32种抗菌药中,选择29种药物进行纸片法药敏试验。试验结果表明:7株链球菌耐药谱非常相似,对青霉素、氨苄西林、阿莫西林、奥格门丁、卡那霉素、红霉素、壮观霉素、氯霉素、氟苯尼考、头孢氨苄、头孢拉定、头孢他定、头孢呋辛、头孢曲松、环丙沙星、氧氟沙星、二氟沙星、沙拉沙星、达氟沙星、恩诺沙星、复方新诺明、万古霉素、亚安培南均敏感;对阿米卡星、新霉素、庆大霉素3株敏感,4株中敏;对四环素和多西环素2株中敏,5株耐药;对链霉素1株中敏,6株耐药。用21种药物进行最小抑菌浓度(M IC)测定,结果7株均对青霉素、氨苄西林、卡那霉素、红霉素、头孢他定、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻呋、环丙沙星、达氟沙星、氧氟沙星、二氟沙星、沙拉沙星、恩诺沙星、磺胺六甲氧嘧啶敏感,1株对新霉素和阿米卡星中敏,2株耐药;所有菌株对四环素、土霉素、多西环素、链霉素均耐药。两种方法总体结果一致。; 宋立高光宁宜宝杨承槐万仁玲张秀英石谦张东; 关键词：耐药性测定

鸡传染性支气管炎病毒H120株和H52株种毒的制备与鉴定: 2019年; 鸡传染性支气管炎病毒H120株、H52株种毒由中国兽医药品监察所制备和供应,种毒的保存期为10年,为了保证种毒的质量和供应,需要定期制备种毒。将H120株、H52株毒种接种SPF鸡胚进行传代培养,收获鸡胚尿囊液,与50 g/L牛乳蔗糖溶液等体积混匀,进行分装和冷冻真空干燥。对其进行剩余水分测定、真空度测定、病毒含量、安全性、免疫原性、纯净(无菌检验、支原体检验、外源病毒)和特异性检验,检验结果表明,各项检验均符合规定。同时为了区分H120株、H52株种毒,用实验室已建立的RT-PCR和酶切方法对两种种毒进行鉴别检验,结果表明能准确区分H120株和H52株种毒。试验结果为疫苗生产提供了能长期保存且稳定性好、高滴度的生产用种毒,也可为其他禽源病毒种毒的制备提供借鉴。; 孔冬妮侯力丹刘丹李启红杨承槐黄小洁; 关键词：鸡传染性支气管炎病毒种毒

新城疫浓缩灭活疫苗的初步研究: 以103.0、104.0和105.0EID503个不同剂量接种非免疫鸡胚，收获鸡胚液，病毒含量测定结果显示以103.0～104.0EID50剂量接种的鸡胚收获的抗原含量高。用该优化方法繁殖了一批新城疫抗原，采用截留分子量...; 李俊平李启红杨承槐刘丹李慧姣蒋桃珍黄建华; 关键词：肉鸡新城疫病毒灭活疫苗

鸡新城疫-鸡传染性支气管炎-禽流感-产蛋下降综合征四联灭活油乳剂疫苗的研制与免疫试验被引量：6: 2005年; 用鸡新城疫LaSota株,鸡传染性支气管炎H120株,产蛋下降综合征127株和禽流感病毒HB1(H9N2)株做为抗原制成油乳剂灭活联苗,并对其进行了物理性状、纯净、安全性、灭活效果、保存期和免疫效力等方面的检验。证明所制备疫苗完全符合质量标准;鸡体对该疫苗4种抗原均产生了良好的免疫应答;攻毒试验证明,免疫鸡能良好地抵抗同种强毒的攻击;所制备疫苗于2～8℃保存12个月后,其免疫效力没有下降。; 亢文华郝俊峰张仲秋宁宜宝宋立韩剑锋杨承槐赵德明; 关键词：鸡传染性支气管炎产蛋下降综合征鸡新城疫灭活油乳剂疫苗免疫试验联苗

禽呼肠孤病毒(ZJS株)种毒免疫原性研究: 为确定禽呼肠孤病毒(ZJS株)种毒最高使用代次，将禽呼肠孤病毒C4-C7、C10和c15共6个代次种毒进行了对雏鸡的免疫攻毒保护试验，结果所有使用代次的种毒免疫攻毒后的保护率均达到80%以上，各代次之间没有明显差异，最高...; 李慧姣李俊平李启红杨承槐吴涛王哲黄建华; 关键词：禽呼肠孤病毒疫苗免疫种毒免疫原性

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