李晓晓
- 作品数：14 被引量：39H指数：3
- 供职机构：首都医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 产后抑郁大鼠子宫组织中氧化应激指标、炎性因子及雌激素受体表达分析
- 2023年
- 目的利用孕期束缚应激诱导产后抑郁(PPD)大鼠模型,探索产后抑郁对子宫组织形态学特点、氧化应激指标、炎性因子及雌激素受体α(ERα)等的影响。方法选择2~3月龄雌、雄性SD大鼠合笼,怀孕雌鼠随机分为对照组和PPD组,每组各6只。PPD组通过孕期束缚应激诱导构建PPD模型。两组大鼠在产后4~6 d,通过糖水偏好和强迫游泳实验检测抑郁样行为,采集血液检测血浆雌激素(E_(2))水平,通过HE染色观察子宫内膜形态,采用ELISA法检测子宫组织氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)]及炎性因子白介素-1β(IL-1β)水平,实时荧光定量PCR法检测IL-1β及ERαmRNA表达水平,蛋白免疫印迹方法(Western blotting)检测ERα蛋白表达水平。结果与对照组比较,PPD组大鼠糖水消耗率显著降低、强迫游泳不动时间显著延长(P均<0.01)。与对照组比较,PPD组大鼠血浆E_(2)水平显著降低(P<0.01),子宫指数显著降低(P<0.01),内膜萎缩变薄,细胞缩小,间质部分纤维组织增生。与对照组比较,PPD组子宫组织中MDA含量显著增加、SOD活性显著降低(P均<0.01),炎性因子IL-1β表达量显著增加(P<0.05),ERαmRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。结论孕期束缚应激可成功建立PPD大鼠模型;PPD可导致大鼠子宫发生相应的病理改变,如形态学变化、氧化应激水平及炎性因子、ERα表达增加等;但这些变化的具体机制尚需进一步探讨。
- 李晓晓吴文星白云飞石翠格徐志卿李慧
- 关键词：产后抑郁子宫氧化应激炎性因子雌激素受体Α
- 小鼠甘丙肽1型受体在HEK293A细胞中的表达和内化
- 2011年
- 目的:克隆小鼠甘丙肽1型受体(mGalR1)基因,构建其真核表达载体,并观察该基因在HEK293A细胞中的表达和内化。方法:应用RT-PCR方法,以小鼠下丘脑RNA为模板,扩增获得甘丙肽I型受体(mGalR1)基因并定向克隆到pEGFP-N1真核表达载体;mGalR1-pEGFP表达载体瞬时转染HEK293A细胞,利用激光共聚焦显微技术观察mGalR1在给予甘丙肽(10-7mol/L)0、5、10、15min刺激时的内化情况。结果:克隆得到正确的mGalR1基因全长序列,其cDNA为1 047bp,共编码348个氨基酸;共聚焦显微镜结果表明mGalR1主要在膜上表达,经甘丙肽刺激5～15min后受体下膜进入胞浆。结论:成功构建真核表达载体mGalR1-pEGFP并在HEK293A中表达;在甘丙肽刺激下小鼠甘丙肽1型受体存在内化现象。
- 李晓晓徐舒李慧宫夏霓徐志卿
- 关键词：真核表达载体内在化
- NPY受体在急性束缚应激大鼠mPFC和下丘脑中的表达及其与炎性因子的相关性
- 2021年
- 目的观察神经肽Y(NPY)受体及炎性因子在急性束缚应激(RES)大鼠前额叶内侧皮层(mPFC)和下丘脑中的表达,探讨NPY受体Y5R在急性RES大鼠mPFC中可能的作用机制。方法将SD雄性大鼠随机分为对照组(CTL组)和模型组(RES组)。采用专业大鼠固定器束缚RES组大鼠2 h制备急性RES模型,CTL组不进行处理。造模结束后处死大鼠,实时定量PCR检测各组大鼠mPFC及下丘脑NPY受体及炎性因子mRNA表达情况;蛋白质印迹检测NPY受体Y5R及炎性因子IL-1β的蛋白表达情况;免疫荧光染色检测NPY受体Y5R及小胶质细胞标志物Iba-1的分布和定位。结果与CTL组相比,RES组大鼠mPFC NPY受体Y5R的mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);炎性因子mRNA水平显著升高(P<0.05),蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05)。RES组大鼠下丘脑NPY受体Y5R及炎性因子mRNA和蛋白水平与CTL组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光染色检测结果显示NPY受体Y5R及小胶质细胞标志物Iba-1不存在共定位。结论NPY受体Y5R参与了急性束缚应激大鼠mPFC的病理过程,但其作用机制与小胶质细胞神经炎性反应无相关性。
- 李晓晓于倩陈家豪王文娇李慧徐志卿
- 关键词：炎性因子小胶质细胞
- 大鼠细胞外信号调节激酶1基因3'非编码区双荧光素酶报告载体的构建及rno-miR-15b-5p对其活性的影响
- 2017年
- 目的以大鼠细胞外信号调节激酶1(ERK1)基因3'非编码区(UTR)为研究对象,构建含有ERK1基因3'UTR区的野生型以及突变型重组双荧光素酶报告载体,通过分析双荧光素酶报告载体的活性,明确rno-miR-15b-5p对报告载体的调节作用。方法采用miRNeasy Mini Kit提取大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的总RNA,以PC12细胞的c DNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)将ERK1基因3'UTR克隆到pmiR-RB-Report^(TM) vector中。利用重叠延伸PCR,将ERK1基因3'UTR中的rno-miR-15b-5p潜在的靶序列TGCTGCT分别突变成CGAACGT和GTACACG,并将突变的ERK1基因3'UTR克隆到pmiR-RB-Report^(TM) vector中。结果成功构建了包含ERK1基因3'UTR区的野生型报告载体pmiR-ERK1 3'UTR和突变型报告载体pmiR-ERK1-mut 3'UTR。利用荧光素酶活性检测系统,发现rno-miR-15b-5p mimic可以降低野生型报告载体的活性(P<0.001),但不影响突变型报告载体的活性。结论成功构建ERK1基因3'UTR区野生型和突变型双荧光素酶报告载体,初步证明ERK1基因3'UTR区是rno-miR-15b-5p的结合靶点。
- 罗汉将徐云峰李晓晓杨予涛徐志卿
- 关键词：细胞外信号调节激酶1
- GalR2过表达转基因小鼠脑内Gal及其受体mRNA的表达水平
- 目的建立在血小板源性生长因子B（PDGF-B）启动子驱动的甘丙肽受体2（GalR2）-绿色荧光蛋白（GFP）（GalR2-EGFP）过表达的转基因小鼠,观察GalR2过表达转基因小鼠和野生型同胞仔小鼠脑内甘丙肽（Gal）...
- 王鹏孙静李晓晓杨予涛徐志卿
- 关键词：甘丙肽大脑皮层实时定量PCR
- 文献传递
- 三种人全血基因组DNA提取方法的比较被引量：13
- 2013年
- 目的:比较改良酚-氯仿抽提法、盐析法、试剂盒法从人全血中提取基因组DNA的效果,以期建立一种快速、经济的提取高质量基因组DNA的方法。方法:分别用上述三种方法从人全血中提取基因组DNA,通过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳、聚合酶链式反应(PCR)、限制性内切酶酶切检测提取的基因组DNA的产量、纯度和质量。结果:改良酚-氯仿抽提法与试剂盒法提取的基因组DNA相比,DNA的产量有统计学差异,DNA的纯度无统计学差异,但试剂盒法提取的基因组DNA有较明显的降解现象;盐析法与改良酚-氯仿抽提法、试剂盒法相比,基因组DNA的产量和纯度都存在统计学差异,并且基因组DNA聚合酶链式反应(PCR)扩增的稳定性也明显劣于另外两种方法;三种方法提取基因组DNA均能进行限制性内切核酸消化。结论:改良酚-氯仿抽提取法是一种经济、快速、高效、稳定提取人全血基因组DNA的方法,适用于批量临床标本处理。
- 李晓晓赵焕英杨云廷徐舒徐志卿
- 关键词：基因组DNA盐析法PCR
- 基于数据挖掘探讨燕京中医肿瘤医家秦厚生治疗乳腺癌用药规律被引量：5
- 2020年
- 目的探讨燕京中医肿瘤医家秦厚生治疗乳腺癌的用药规律。方法自首都医科大学北京中医医院病案室名老中医案卷中,筛选秦厚生治疗乳腺癌诊疗医案,采集医案的西医诊断及治疗、中医症状、组方用药信息等建立数据库,并进行描述统计分析或聚类分析。结果共纳入有效数据135条,西医诊断IV期82例,手术治疗97例,涉及药物135味。出现频次前4位的症状分别为憋喘(40次)、疼痛(31次)、上肢水肿(26次)、咳嗽(24次);使用频次前3位的药物分别为沙参(83次)、桔梗(66次)、麦冬(54次);使用频次前3位的药物类别是补虚类(343次)、化痰类(236次)、祛湿通络类(227次);药物归经以肺(65次)、肝(58次)、脾(49次)、胃(42次)、肾(38次);药味以甘(73次)、苦(65次)、辛(49次)为主;药性以温(49次)为主。对所有药物进行K-均值聚类分析,选出20味药,在对其进行系统聚类分析。结论秦厚生教授在治疗乳腺癌时以扶正补虚、疏肝解郁、健脾补肾、祛痰化瘀、疏通经络为治则,对放射性肺炎常用药对为沙参、麦冬,针对水肿常用药对为路路通、络石藤、丝瓜络。
- 张佳慧念家云王笑民马云飞马婷婷李晓晓
- 关键词：乳腺癌用药规律数据挖掘
- 雌激素对围绝经期抑郁大鼠的神经保护作用及可能机制被引量：15
- 2018年
- 目的探讨雌激素对围绝经期抑郁症模型大鼠行为的影响及作用机制。方法通过双侧卵巢切除加慢性温和应激建立围绝经期抑郁症大鼠模型,实验分为正常对照组、卵巢切除组、模型组(卵巢切除+慢应激)、雌激素(雌二醇,E2)治疗组、西酞普兰治疗组和卵巢切除+雌激素共6组。采用旷场和糖水偏好实验检测大鼠抑郁样行为;尼氏染色观察海马齿状回(DG)区神经元数量变化;高效液相检测海马5-HT、5-H1AA、去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)含量;酶联免疫法检测下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴相关指标的含量。结果 E2治疗可逆转模型组导致的大鼠水平、垂直运动得分降低、糖水偏好率减少及海马DG区神经元数量减少;且可逆转减少的海马单胺递质和HPA轴亢进状态。结论雌激素可通过改善海马神经元损伤、增加脑组织单胺类递质含量及缓解HPA轴的亢进发挥抗围绝经期抑郁作用。
- 李晓晓李慧王宁徐志卿石翠格
- 关键词：雌激素围绝经期抑郁单胺递质
- 甘丙肽2型受体在HEK293细胞中的表达及内化过程被引量：3
- 2010年
- 构建了在甘丙肽2型受体(GalR2)N端带myc表位标签的真核表达载体,并将其转染到HEK293细胞,进而应用免疫荧光细胞化学方法结合激光扫描共聚焦显微技术观察GalR2蛋白的亚细胞分布和膜转运过程。Western blot结果发现转染组myc-GalR2蛋白水平呈高表达。myc-GalR2主要分布在细胞膜上,少量分布于胞浆中。当给予甘丙肽(10-7mol/L)刺激后,5min时可见细胞膜上myc-GalR2明显减少,胞浆内myc-GalR2增多,15min时膜上myc-GalR2几乎全部消失。表明GalR2受体与配体结合后发生内化,且受体蛋白内化为时间依赖性的转运过程,证实在HEK293细胞GalR2会出现配体依赖性内化。同时,以已知膜蛋白5-HT1AR的内化作为对照,可见在给予甘丙肽刺激以后,5-HT1AR没有发生内化,受体蛋白仍然表达在膜上。此外,通过测定胞内钙水平激活情况来检测其信号通路激活情况,表明myc对GalR2功能没有明显影响。
- 吕琼金艳燕吴波路雅静李晓晓赵春礼徐志卿
- 关键词：HEK293细胞
- 5羟色胺1A受体亚型的内在化研究
- 目的 5-羟色胺是脑内一类重要的单胺类神经递质。目前的研究认为,5-羟色胺通过与不同受体亚型结合,发挥各种生理及病理作用,参与了对情绪、焦虑、睡眠、体温、食欲、性行为、运动、心血管功能、痛觉等功能的调制。5羟色胺1A型受...
- 金艳燕李晓晓吕琼徐志卿
- 关键词：G蛋白偶联受体内在化
- 文献传递
