李晶
- 作品数：15 被引量：42H指数：4
- 供职机构：湖南农业大学更多>>
- 发文基金：湖南省科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学经济管理生物学医药卫生更多>>
- 猪巨细胞病毒囊膜糖蛋白B重组抗原的研制及应用
- 猪巨细胞病毒感染(porcine cytomegalovirus infection,PCMVI)是由疱疹病毒科β疱疹病毒亚科的猪巨细胞病毒(porcine cytomegalovirus,PCMV)引起的一种条件性传染...
- 李晶
- 关键词：GB基因克隆表达
- 文献传递
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病RT-PCR快速鉴别诊断方法的建立与临床应用被引量：18
- 2008年
- 根据高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2基因的缺失信息,设计了3条特异性引物,以含高致病性PRRSVNsp2基因的质粒pMDNSP2及普通PRRSVVR2332株RNA为模板,建立了快速诊断高致病性PRRSVRT-PCR方法。通过对临床组织病料的总RNA进行不同稀释倍数检测,结果表明该方法能从0.265pg的总RNA中检测到PRRSV的基因,说明敏感性高。用该方法对猪瘟病毒(CSFV)、Ⅱ型圆环病毒(PCV-2)、伪狂犬病病毒(PRV)、链球菌(Streptococcus)、副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis)和大肠杆菌(Escherichiacoli)同条件检测,结果都为阴性。进一步对36份疑似高致病性PRRSV临床组织病料细胞培养物、2株PRRSV商品活疫苗以及52个猪场所送检的184份临床样品进行了检测应用,结果36份疑似高致病性PRRSV临床组织病料的细胞培养物有5份样品为阳性且都为高致病性PRRSV,2株PRRSV商品活疫苗为普通PRRSV,52个猪场中有42个猪场(123份样品)呈阳性,其中只有1份为普通PRRSV。实验表明该方法能够准确地鉴别诊断高致病性PRRSV和普通PRRSV,且具有快速、敏感和特异的特点,具有临床实用性。
- 刘忠华余兴龙李润成黄泽彬廖立珊白霞李晶向卫军汪镇南丁建
- 三种亚群PCV-2感染性克隆的构建及体内外感染性试验
- 本研究通过PCR扩增出猪圆环病毒2(PCV-2)三个亚群(1A、1B和1C)毒株的全基因组DNA序列,并分别克隆入pMD-18T载体,获得含有PCV-2全基因组的3个重组质粒,分别命名为RP8、P0、P4-1,将重组质粒...
- 李薇李晶余兴龙罗维白霞李润成黎满香葛猛王亚向卫军
- 关键词：感染性克隆PCR扩增
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型ORF2基因的改造及在大肠杆菌中的高效可溶性表达
- PCV2-ORF2为702或705bp，编码病毒的衣壳蛋白(Cap)，与PCV2的复制以及抗原性密切相关，是进行PCV2疫苗研究以及免疫活性研究的首选。最初衣壳蛋白在杆状病毒表达系统中成功表达并用于检测PCV2特异性抗体...
- 葛猛余兴龙李润成罗维李微李晶王亚向卫军
- 关键词：ORF2基因大肠杆菌可溶性表达基因改造
- 文献传递
- 猪巨细胞病毒gB蛋白抗原表位富集区的表达和抗原性的分析被引量：5
- 2010年
- 为表达猪巨细胞病毒(PCMV)gB基因,本研究根据GenBank登录的PCMV gB基因序列设计1对引物,以感染PCMV猪肺细胞总DNA为模板,采用PCR扩增得到gB基因片段,克隆于pMD-18T并进行核苷酸序列测定。利用DNAStar分析gB蛋白的抗原表位,选择抗原表位富集的2个基因片段(命名为PCMVgB1和PCMVgB2)分别克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组表达质粒并转化Rosetta(DE3)宿主菌。结果显示:扩增的gB基因与GenBank登录的PCMV gB基因的核苷酸同源性在97.6%～98.9%之间,推导的氨基酸同源性在97%～98.6%之间。经IPTG诱导的含pET-gB1和pET-gB2重组质粒的宿主菌可表达重组gB1和gB2蛋白,SDS-PAGE显示分子量约为62ku和36ku。Western blot和间接ELISA结果表明,重组gB1和gB2蛋白均具有反应原性。
- 李晶余兴龙李润成黄泽彬葛猛向卫军李薇王亚
- 关键词：GB基因间接ELISA
- 猪巨细胞病毒抗体ELISA检测方法的初步构建及应用
- 为确定猪巨细胞病毒（PCMV）重组gB1蛋白作为检测抗原的实用性,将已构建成功的重组质粒pETPCMVgB1转入Rosetta（DE3）宿主菌进行诱导表达,以纯化的重组gB1蛋白作为包被抗原,建立了检测猪巨细胞病毒抗体的...
- 李晶余兴龙李润成
- 关键词：诊断抗原间接ELISA
- 文献传递
- 丘陵山地区村庄整理模式研究——以醴陵市白兔潭镇为例被引量：3
- 2010年
- 对白兔潭镇村庄用地现状存在的问题进行了初步研究,结合丘陵山地区特有的自然环境条件和当地社会经济发展水平提出了适合丘陵山地区村庄整理的模式,为确保村庄整理模式的顺利实现,进一步提出了相应的对策措施。
- 卢小红关欣李晶黄纯
- 关键词：村庄整理土地利用
- 县级公立医院医务人员激励机制满意度研究——以岳阳县R医院为例
- 自2012年县级公立医院综合改革试点启动以来,各试点县(市)积极响应实施改革并取得了明显进展。但县级公立医院作为基层医疗机构,由于经济发展水平、医疗资源分配及政策落实等原因使得综合改革依然是一项长期而艰巨的任务。本文的目...
- 李晶
- 关键词：薪酬激励机制医护人员
- 文献传递
- 微旅视角下休闲农业发展模式研究
- 中国是一个历史悠久的农业大国,地域辽阔,自然风景优美,农业文化丰富,民俗风情多姿多彩。休闲农业具有得天独厚的发展优势、巨大的发展潜力和广阔的发展空间。实践证明,休闲农业的发展不但可以利用农业资源调整和优化产业结构,延伸农...
- 李晶
- 关键词：休闲农业
- 文献传递
- 猪巨细胞病毒的PCR检测及其gB基因特征分析被引量：9
- 2009年
- 根据GenBank登录的猪巨细胞病毒(PCMV)gB基因序列设计检测引物和全长gB基因引物,对来自湖南浏阳和江西景德镇不同养殖场的猪鼻拭子样品(51份)进行PCR检测,60.78%(31/51)的鼻拭子样品扩增出了260bp的特异性条带.再以阳性样品为模板扩增全长gB基因,并将其克隆到pMD18-T载体,核苷酸序列测定和结果分析表明,所获得PCMVgB基因序列全长2580bp,编码860个氨基酸,与国外PCMV分离株的核苷酸同源性为97.6%～98.9%,氨基酸同源性为97.0%～98.6%,且PCMV可分为2个群:一群为中国湖南株、英国株和德国株,命名为A群;另一群为日本株、瑞士株和西班牙株,命名为B群.抗原表位优势、亲水性、表面可及性预测分析表明,PCMVgB蛋白是理想的免疫学抗原候选蛋白.
- 李晶余兴龙李润成罗维向卫军李薇王亚葛猛
- 关键词：PCRGB基因
