李玉恒
- 作品数：25 被引量：52H指数：5
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划黑龙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 谷氨酰胺和L-肉碱对低温下肉羊瘤胃纤维分解菌的影响被引量：8
- 2011年
- 本试验研究了饲粮中添加谷氨酰胺和L-肉碱对低温下肉羊瘤胃纤维素分解菌的影响,旨在了解谷氨酰胺和L-肉碱在减缓低温应激中的作用,为生产实践中应用抗应激剂提供理论依据和参考。试验选用9只健康东北细毛羊×德国肉用美利奴杂交肉羊,采用L9(34)正交试验设计,设3个谷氨酰胺水平(0、0.6%、1.2%)与3个L-肉碱水平(0、75、150m g/kg)。试验羊在低于正常饲养温度(由10℃降至0℃)条件下,饲喂添加不同水平谷氨酰胺和L-肉碱的饲粮。结果表明,谷氨酰胺有降低瘤胃白色瘤胃球菌相对含量的趋势(P>0.05),L-肉碱能显著降低瘤胃白色瘤胃球菌的相对含量(P<0.05),二者复合使用有缓解瘤胃白色瘤胃球菌相对含量下降的趋势;谷氨酰胺能显著提高瘤胃黄化瘤胃球菌相对含量(P<0.05),L-肉碱有提高瘤胃黄化瘤胃球菌相对含量的趋势(P>0.05),二者复合使用能进一步提高瘤胃黄化瘤胃球菌的相对含量(P>0.05);谷氨酰胺和L-肉碱有降低瘤胃产琥珀酸丝状杆菌相对含量的趋势(P>0.05),但二者复合使用有缓解瘤胃产琥珀酸丝状杆菌相对含量下降的趋势。结果提示:谷氨酰胺和L-肉碱在低温下复合使用能缓解瘤胃白色瘤胃球菌、产琥珀酸丝状杆菌相对含量的下降,提高瘤胃黄化瘤胃球菌相对含量。经比较分析,低温环境下肉羊饲粮谷氨酰胺和L-肉碱的添加量分别为1.2%和75mg/kg时可有效改变瘤胃微生物菌群,提高机体抵抗冷应激的能力。
- 李士泽高福久杨玉英姜宁赵雅楠李玉恒杨焕民计红
- 关键词：谷氨酰胺L-肉碱
- Western blot方法检测不同强度冷刺激大鼠心脏、肺脏、大脑和睾丸四种组织中CIRP的表达
- ＜正＞为探讨免疫印迹技术（Western-blot）在不同强度冷刺激后Wistar大鼠心脏、肺脏、大脑和睾丸中是否存在CIRP的表达。本实验采用SDS-PAGE电泳和Western-blot方法从蛋白质水平检测-10℃、...
- 赵雅楠高福久李玉恒林增杨焕民计红李鹏李士泽
- 文献传递
- 慢病毒载体介导的CIRP过表达体系的构建
- 慢病毒既可以感染分裂期细胞,又可以感染分裂缓慢或非分裂期的细胞,并且慢病毒携带的基因可整合入宿主基因组,目的基因可以在宿主细胞中得到长期稳定的表达,免疫反应很小。因此,为了得到有效的基因过表达效果,本实验中应用慢病毒载体...
- 李玉恒李静林增孟宇孙智峰李俭刘从李鹏沈冰蕾李士泽
- 文献传递
- 冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)过表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2015年
- 为构建携带冷诱导RNA结合蛋白(Cold inducible RNA-binding protein,CIRP)的过表达载体,首先从4℃条件下冷处理8 h的SD大鼠睾丸组织中获得CIRP基因的c DNA序列,然后扩增CIRP基因的编码区,将其克隆到真核表达载体p Lenti6/V5中,酶切鉴定并测序.将克隆成功的质粒转染HEK293T细胞,用Western blot检测CIRP的表达水平.成功扩增CIRP编码区,并将其克隆至载体p Lenti6/V5中;当将CIRP过表达载体转染HEK293T细胞后,Western blot检测结果显示CIRP蛋白表达水平明显增加(P<0.01).本研究成功构建了CIRP过表达载体,为进一步研究CIRP的作用机制提供了基础工具.
- 李静辉孟宇李玉恒李昌盛杨焕民李士泽
- 关键词：过表达质粒冷应激
- 慢病毒载体介导的CIRP过表达体系的构建
- 2012年
- 慢病毒既可以感染分裂期细胞,又可以感染分裂缓慢或非分裂期的细胞,并且慢病毒携带的基因可整合入宿主基因组,目的基因可以在宿主细胞中得到长期稳定的表达,免疫反应很小。因此,为了得到有效的基因过表达效果,本实验中应用慢病毒载体的介导构建CIRP过表达体系。利用Invitrogen公司的Gateway Lentiviral载体系统。
- 李玉恒李静林增孟宇孙智峰李俭刘从李鹏沈冰蕾李士泽
- 关键词：慢病毒载体病毒载体介导免疫反应目的基因
- 谷氨酰胺和L-肉碱对低温下肉羊抗氧化性能的影响被引量：9
- 2012年
- 试验旨在研究谷氨酰胺和L-肉碱对寒冷刺激所引起的肉羊机体抗氧化的作用。试验采用L9(34)正交试验设计,3水平谷氨酰胺[A1(0%)、A2(0.6%)、A3(1.2%)]与3水平L-肉碱[B1(0mg/kg)、B2(75mg/kg)、B3(150mg/kg)]。将9只肉羊随机分成3组,每组3个重复,对照组饲喂基础日粮,不添加任何添加剂,试验组羊由饲养环境温度10℃暴露于0℃环境温度下,各试验组分别添加不同水平的谷氨酰胺和L-肉碱。预试期7 d,试验期2 d(间隔10 d)后,测定各组肉羊血清中SOD、MDA、T-AOC活性。结果表明:谷氨酰胺和L-肉碱在低温下复合使用能提高机体血清SOD水平,降低血清MDA水平,提高机体总抗氧化能力。经比较分析,低温环境下肉羊日粮谷氨酰胺和L-肉碱的添加量分别为1.2%、150 mg/kg时可以提高血清SOD水平;低温环境下肉羊日粮谷氨酰胺和L-肉碱的添加量分别为0.6%、150 mg/kg时可以提高血清T-AOC水平,因此,在本试验条件下日粮添加谷氨酰胺和L-肉碱可以提高机体抵抗冷应激的能力。
- 李士泽李玲高福久李俭赵雅楠姜宁杨焕民李玉恒林增
- 关键词：谷氨酰胺L-肉碱抗氧化性能
- 长白猪RBM3基因及其重组慢病毒载体的构建和应用
- 本发明涉及一种长白猪RBM3基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了含有该基因的重组慢病毒载体和构建方法以及在提高猪的抗寒能力中的应用。本发明成功的构建了含RBM3基因的慢病毒载体plenti6/v...
- 李士泽李俭杨玉英杨焕民计红李玉恒孟宇李静辉张雪李云龙
- 文献传递
- RBM3重组慢病毒载体的构建、包装和鉴定被引量：1
- 2014年
- 构建含有冷休克蛋白RNA结合基序蛋白3(RBM3)基因的慢病毒表达载体,产毒感染ST细胞,以评价重组慢病毒载体提高RBM3蛋白表达的效果.应用分子生物学技术提取仔猪脾脏组织的总RNA,通过反转录方法扩增RBM3基因,将其连入慢病毒载体Plenti6/v5-DEST中,在感受态细胞DH5α中扩增培养,并进行RBM3基因的测序鉴定,将重组的慢病毒质粒转染293T细胞,收获病毒液,感染293T细胞并提取细胞RNA,用逆转录PCR方法检测RBM3 mRNA在感染病毒的293T细胞中的表达,用含有慢病毒空载体pLenti6/V5-DEST的病毒液、含有重组慢病毒载体pLenti6/V5-RBM3的病毒液和无菌去离子水分别感染ST细胞后通过Western blot方法检测RBM3蛋白在感染病毒的ST细胞中的表达.结果表明:构建的慢病毒载体Plenti6/v5-RBM3经测序分析证实基因序列正确.包装后的慢病毒滴度为107 PFU/mL.逆转录PCR方法检测到感染病毒的293T细胞中,RBM3基因在转录水平上有表达,Western blot方法检测到感染病毒的ST细胞中,空载体组与空白对照组相比,RBM3蛋白表达量接近相同(分别为0.312±0.022和0.282±0.028);过表达组与空白对照组相比,RBM3蛋白表达量(0.568±0.045)显著增加(P<0.05),RBM3蛋白在翻译水平有表达.因此,本研究构建的携带RBM3基因的重组慢病毒能够感染ST细胞,并使其RBM3蛋白表达量增加.
- 李俭杨玉英李玉恒郭景茹计红郭丽李鹏杨焕民李士泽
- 关键词：冷休克蛋白慢病毒载体WESTERNBLOT
- 利用梯度PCR和降落PCR扩增CIRP基因的比较被引量：12
- 2011年
- 提取SD大鼠总RNA,同时应用降落PCR和梯度PCR在常规PCR反应体系和低模板浓度PCR反应体系中扩增CIRP基因片段,对两种方法的扩增效果进行比较。结果表明:降落PCR法可以通过一次反应即顺利扩增出CIRP基因特异性条带,并且在模板浓度降低后也能扩增出产物;梯度PCR法扩增结果不稳定,不但有非特异性条带出现而且不能检测出低浓度模板的存在。结论:降落PCR省略了梯度PCR摸索最适退火温度的过程,并且其灵敏度和特异性均高于梯度PCR。
- 李玉恒赵明慧赵紫阳李峥袁雪李昌盛林增胡婧李俭李士泽
- 关键词：降落PCR退火温度
- 冬季奶牛饲养管理要点被引量：14
- 2010年
- 我国大部分地区,冬季寒冷干燥,气温低导致奶牛的热消耗增加,如果饲养管理不当,加之青绿饲料匮乏,极易导致奶牛产奶量下降,甚至影响奶牛的正常生长发育,而且会引发多种疾病,因此冬季应当加强对奶牛的饲养管理来增强奶牛体质,提高产奶量,
- 高福久丁向阳赵雅楠林增李玉恒李士泽
- 关键词：刷拭块根饲料青绿多汁饲料舍内温度乳头药浴
