杨啸燕
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
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- 亲和纯化抗Na+/Ca2+交换体α-1138-177抗体对大鼠离体心功能及心室肌细胞离子通道电流的影响
- 目的： 观察1-103nmol/LProteinA纯化抗钠-钙交换体(NCX)α-1(138-177)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响;在使用抗原亲和纯化方法进一步纯化抗心肌Na/Ca交换体α-1(138-177)抗体的基...
- 杨啸燕
- 关键词：抗体心功能全细胞膜片钳
- 文献传递
- 亲和纯化抗Na+/Ca2+交换体α-1(138-177)抗体对大鼠离体心功能及心肌细胞离子通道电流的影响
- 目的：
观察1-103nmol/LProtein A纯化抗钠-钙交换体(NCX)α-1(138-177)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响;在使用抗原亲和纯化方法进一步纯化抗心肌Na+/Ca2+交换体α-1(138-1...
- 杨啸燕
- 关键词：全细胞膜片钳心肌细胞
- 抗钠-钙交换体α-2_(807-844)抗体对Langendorff灌流大鼠离体心功能的影响
- 2012年
- 目的观察1～103 nmol/L抗钠-钙交换体(NCX)α-2(807-844)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响。方法化学合成的NCXα-2(807-844)肽段主动免疫新西兰大耳白兔制备并纯化抗体,采用Langendorff离体心脏灌流系统观察对大鼠离体心功能的影响。结果主动免疫后兔体内抗α-2(807-844)抗血清滴度明显升高,经Protein A纯化后获得浓度为7.21mg/mL的抗体;与对照组比较,1～10nmol/Lα-2抗体可明显增加大鼠离体心脏左室发展压(LVDP)及左室压最大上升速率(+dP/dtmax,P<0.01),且使左室压最大下降速率(-dP/dtmax)减小(P<0.01);然而,102～103 nmol/Lα-2抗体则可不同程度地降低正常大鼠离体心脏LVDP、±dP/dtmax(P<0.01)。结论抗钠-钙交换体α-2(807-844)肽段抗体对离体大鼠心功能的作用与其浓度有关。在低浓度时,α-2抗体可使心肌收缩增强;而较高浓度的α-2抗体可同时抑制心肌收缩和舒张。
- 杨啸燕封启龙吴博威
- 关键词：抗体心功能离体心脏灌流
- Na^+/Ca^(2+)交换体α-2(807-844)抗体的制备及其对大鼠心肌细胞Na^+/Ca^(2+)交换电流的抑制作用
- 2012年
- 目的在制备和纯化抗心肌Na+/Ca2+交换体α-2(807-844)肽段抗体的基础上,观察抗体对大鼠心肌细胞Na+/Ca2+交换电流及L型钙电流(ICa)、瞬时外向钾电流(Ito)和内向整流钾电流(Ik1)的影响。方法利用人工合成的α-2(807-844)多肽免疫兔制备抗α-2(807-844)抗体,抗血清经Protein A亲和柱纯化,利用全细胞膜片钳技术观察纯化后抗体对心肌细胞Na+/Ca2+交换电流(INa/Ca)、L型钙电流(ICa)、瞬时外向钾电流(Ito)和内向整流钾电流(Ik1)的影响。结果经主动免疫,抗Na+/Ca2+交换体α-2(840-877)抗血清效价达1∶243 000,纯化后抗α-2(840-877)抗体浓度为7.21mg/mL。纯化后的抗体在SDS-PAGE时出现清晰的2条带,其分子量分别为25kD和50kD左右。在1nmol/L～104nmol/L浓度范围内,抗α-2抗体对成年大鼠心肌细胞外向和内向Na+/Ca2+交换电流均表现为剂量依赖性的抑制作用;对Ito和Ik1则均未见明显影响。此外,104nmol/L该抗体对L型钙电流亦具有抑制作用。通过氨基酸序列比对发现,α-2(807-844)肽段与L型钙通道第2结构域孔环(697～730位氨基酸)序列相似度为23.7%,可能是抗体对L型钙通道出现交叉反应的原因。结论在1nmol/L～103nmol/L浓度范围内,抗心肌Na+/Ca2+交换体α-2(807-844)抗体可特异性抑制大鼠心肌Na+/Ca2+交换活动;对L型钙通道电流、瞬时外向钾通道电流和内向整流钾通道电流均未见明显影响。
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- 关键词：心肌抗体膜片钳技术离子通道
- 抗钠-钙交换体α-1(106-145)抗体对大鼠离体心功能的影响及其机制被引量：2
- 2012年
- 目的观察1～103nmol·L-1抗钠-钙交换体(NCX)α-1(106-145)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响并分析其作用机制。方法用化学合成的NCXα-1(106-145)肽段主动免疫新西兰大耳白兔制备并纯化抗体,利用Langendorff离体灌流系统观察其对大鼠离体心功能的影响;利用全细胞膜片钳技术观察其对心肌细胞钠-钙交换电流、L-型钙电流、瞬时外向钾电流和内向整流钾电流的影响。结果经主动免疫后兔体内抗α-1(106-145)抗血清滴度明显升高,Protein A纯化后抗体浓度为13.1 g.L-1。与对照组相比,1～10 nmol·L-1α-1抗体可使大鼠离体心脏左室发展压(LVDP)和左室压最大上升速率(+dp/dtmax)明显增加(P<0.01),并使左室压最大下降速率(-dp/dtmax)减小(P<0.01),且KB-R7943(2μmol·L-1)可使α-1抗体(1 nmol·L-1)的上述效应进一步增强。然而,102～103nmol·L-1α-1抗体则可使大鼠离体心脏LVDP、±dp/dtmax呈不同程度地下降(P<0.01)。全细胞膜片钳实验结果表明,在1～103nmol·L-1浓度范围内,抗α-1抗体对大鼠心肌细胞外向和内向Na+/Ca2+交换电流均表现出剂量依赖性的抑制效应,对瞬时外向钾电流和内向整流钾电流均无明显影响。此外,102～103nmol·L-1α-1抗体对L-型钙电流也具有抑制作用。结论低浓度α-1抗体(1～10 nmol·L-1)可明显增强心肌收缩,这一效应与其在低浓度时专一性抑制Na+/Ca2+交换电流有关;高浓度α-1抗体(102～103nmol·L-1)则可同时抑制心肌收缩和舒张,该作用与其同时抑制Na+/Ca2+交换电流和L-型钙电流有关。
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- 关键词：抗体心功能全细胞膜片钳L型钙电流离体心脏
