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杨宇峰: 作品数：11 被引量：18H指数：3; 供职机构：上海生物制品研究所更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划上海市科委重大科技攻关项目上海-SK研究与发展基金更多>>; 相关领域：医药卫生化学工程生物学轻工技术与工程更多>>

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水蛭素-RGD序列融合蛋白基因在枯草芽孢杆菌中的克隆及表达被引量：3: 2005年; 水蛭素是从医用水蛭唾液腺中分离纯化的一种多肽,分子量约为7 kD.它是天然存在的最专一有效的凝血酶抑制剂,无明显毒副作用,用量低,因此可作为抗栓药物用于治疗血栓性疾病[1～2].RGD序列是纤维蛋白原等粘附因子上以Arg-Gly-Asp为核心的小肽序列[3],通过与活化血小板上纤维蛋白原受体GPⅡb/Ⅲa结合而导致血小板聚集.因此外源RGD序列可通过竞争性结合该受体而阻断血小板的聚集,抑制血栓的形成[4].RGD序列与水蛭素融合可获得同时具有抗凝血酶和抗血小板聚集双功能的新型抗栓剂.本文首次报道重组水蛭素HV3与RGD序列融合蛋白基因克隆并在枯草芽孢杆菌中表达的结果.; 杨宇峰周建耿旭董亚芳吴自荣; 关键词：RGD序列重组水蛭素枯草芽孢杆菌融合蛋白基因凝血酶抑制剂

水蛭素-RGD序列融合基因在枯草芽孢杆菌中的克隆和表达: 水蛭素是从医用水蛭唾液腺中分离纯化的一种多肽,它是天然存在的最有效和专一的凝血酶抑制剂,可作为抗栓药物用于治疗血栓性疾病。它由多种含有的～66个氨基酸的单链类系物组成,分子量约为7000Da,主要分为HV1、HV2、HV...; 杨宇峰周建耿旭吴自荣; 文献传递

干扰素的剂型研究及其应用研究进展: 本文对近年来国内外干扰素的剂型开发及其应用的研究进展做了简要综述.主要包括了注射剂、口含制剂、呼吸道给药系统、皮肤局部外用、滴眼剂、缓释给药系统和长效干扰素等.; 杨宇峰; 关键词：干扰素剂型研究; 文献传递

聚乙二醇修饰重组人干扰素α1b的制备及其性质被引量：8: 2010年; 目的制备聚乙二醇(PEG)修饰的重组人干扰素α1b(rhIFNα1b),并分析其部分性质。方法采用PEG修饰rhIFNα1b,通过离子交换层析分离纯化修饰混合物,单点修饰产物经超滤浓缩后,经Lowry法检测蛋白的浓度,SDS-PAGE和RP-HPLC检测蛋白的纯度,等电聚焦电泳检测蛋白的等电点,质谱法检测蛋白的相对分子质量,细胞病变抑制法检测蛋白的体外活性,ELISA法检测蛋白的抗原性。结果单点修饰产物的蛋白得率为33%;SDS-PAGE分析纯度为96.1%,RP-HPLC分析纯度为98.1%;等电点为6.22;相对分子质量为39946;比活为1.28×106IU/mg,活性保留率为14.4%;抗原性至少降至原来的1/625。结论制备的单点修饰rhIFNα1b药学性质获得改善,有望开发为安全、长效的新型干扰素。; 杨宇峰路煜石玮马相虎秦洁朱威楼觉人; 关键词：聚乙二醇基因修饰重组人干扰素Α

聚乙二醇化学修饰重组人干扰素α-1b的初步研究: 目的：对聚乙二醇(PEG)衍生物化学修饰重组人干扰素α-1b(rhIFNα-1b)进行研究。方法：以几种不同的第二代PEG衍生物对rhIFNα-1b进行修饰，并对反应pH值、温度、时间、修饰剂用量等修饰条件进...; 杨宇峰黄静徐帆洪吴腾捷吴自荣楼觉人; 关键词：聚乙二醇重组人干扰素Α-1B 化学修饰衍生物电泳生物制品; 文献传递

胰高血糖素样肽-1衍生物的聚乙二醇定点修饰及其产物性质分析: 2021年; 目的用马来酰亚胺活化的相对分子质量40000的聚乙二醇(MAL-PEG40K)定点修饰胰高血糖素样肽-1衍生物(glucagon like peptide-1analogue,GLP-1a),并分析修饰产物部分性质。方法采用MAL-PEG40K定点修饰GLP-1a,强阳离子交换层析分离纯化修饰混合物,SDS-PAGE及反相高压液相色谱法(RP-HPLC)检测修饰产物MAL-PEG40KGLP-1a纯度,报告基因法检测其体外活性,动物急性降血糖试验检测其体内生物学活性。结果MAL-PEG40K-GLP-1a经SDS-PAGE及RP-HPLC分析,纯度分别为95%和98.1%,体外活性保留率为22.9%,体内具有显著降血糖作用且药效时间明显延长。结论制备的MAL-PEG40K-GLP-1a药学性质获得显著改善,有望开发为安全、长效的新型GLP-1受体激动剂。; 秦荣浦田石华江筠刘敏何成杨宇峰楼觉人; 关键词：报告基因生物学活性

聚乙二醇修饰蛋白的快速分离与纯化被引量：1: 2009年; 【目的】建立聚乙二醇修饰蛋白的快速分离纯化方法。【方法】以4种聚乙二醇化药用蛋白为研究对象,采用阳离子交换树脂进行纯化。纯化条件：Hiprep 16/10 CM Sepharose FF（1 mL）预装柱;流动相：A液为20mmol/L pH4.0的醋酸缓冲液;B液为A液中加入1 mol/L NaCl;B液以0-100%离子强度线性梯度洗脱100 min,流速0.2 mL/min,波长280 nm检测,收集各洗脱峰。【结果】一步纯化可将单点修饰产物与聚乙二醇、多点修饰产物以及未修饰蛋白分离开来,单点修饰产物经SDS-PAGE检测呈单一条带,经质谱检测其相对分子质量与预期相符。【结论】所建立的纯化方法可快速分离纯化聚乙二醇修饰蛋白。; 黄静杨宇峰卞慧芳郁正艳徐进吴自荣; 关键词：聚乙二醇药用蛋白

长效重组人干扰素α1b的临床前研究: 楼觉人吴自荣徐帆洪黄静杨宇峰吴腾捷赵春女易正芳金明飞胡荣章叶海峰王月红; 干扰素具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节功能，是目前公认的最为有效抗病毒药物之一。但是干扰素在体内半衰期较短，约为1.5-2.8h，治疗疾病需反复长期注射给药。PEG修饰，就是应用一种线性、亲水惰性高分子聚乙二醇(PEG)...; 关键词：; 关键词：重组人干扰素Α1B 临床前研究

血小板生成素在枯草杆菌中的表达分泌及前肽作用被引量：2: 2005年; 利用PCR方法扩增得到枯草杆菌本身的表达调控序列SP(含有信号肽)和Pro序列(包含信号肽和前肽).分别与血小板生成素(TPO)结构基因及枯草杆菌载体片段连接,构建两个重组TPO枯草杆菌表达载体,转化受体菌,得到DB403(SP-TPO)和DB403(Pro-TPO)重组克隆, 比较有无前肽对其表达分泌的作用.用ELISA和Western Blot检测TPO的表达分泌,发现DB403(Pro-TPO)能够表达分泌TPO,而DB403(SP-TPO)未发现TPO的分泌.对小鼠腹腔注射DB403(Pro-TPO)发酵浓缩液,发现能够明显增加血小板数目.与自身对照相比增加84.2%, 与生理盐水对照比较增加99.7%.以上实验说明Pro-TPO能够表达分泌有明显活性的TPO蛋白,而且前肽对外源蛋白的分泌是必要的.; 张美华周建杨宇峰吴自荣; 关键词：血小板生成素枯草杆菌分泌前肽

聚乙二醇4化蛋白的快速分离纯化: 本文对聚乙二醇4化蛋白的快速分离纯化进行了研究。文章采用Hiprep16/10CMSepharoeFF(1mL)预装柱,流动相:A液:20mmol/LpH4.0的醋酸缓冲液;B液:A液中加入1mol/LNaCl,B液从0...; 黄静杨宇峰卞慧芳郁正艳吴自荣; 关键词：生物制药聚乙二醇药用蛋白蛋白纯化; 文献传递