杨爱琼
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
- 供职机构：川北医学院附属医院更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目四川省教育厅自然科学科研项目四川省青年科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 结核杆菌多价核酸疫苗在小鼠体内的免疫保护效应研究被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨结核杆菌Ag85A/ESAT-6/CFP-10多价核酸疫苗的动物免疫保护效应。方法:将24只BALB/c小鼠随机分成4组,多价核酸疫苗免疫组每只小鼠股四头肌肌肉注射重组质粒VR1020-85A、VR1020-E6和VR1020-P10各25μg(溶于100μL灭菌生理盐水中)进行免疫接种,3周后加强免疫1次。其余3组均为对照组,分别是生理盐水注射组、空白质粒VR1020免疫组和卡介苗(mycobacterium bovis bacillus calmette-guérin,BCG)免疫组。每只小鼠于初次免疫6周后经腹腔注射结核杆菌H37Rv(菌落数为1×105)进行攻击,攻击实验28 d后取小鼠肺组织作结核杆菌培养和病理形态学检测。结果:多价核酸疫苗免疫组小鼠肺组织结核杆菌培养带菌量明显低于生理盐水注射组和空白质粒免疫组(P<0.05),但明显高于BCG免疫组(P<0.05)。多价核酸疫苗免疫组小鼠肺组织病变明显轻于生理盐水注射组和空白质粒免疫组,但明显重于BCG免疫组。结论:结核杆菌Ag85A/ESAT-6/CFP-10多价核酸疫苗免疫小鼠后能产生一定程度的抗结核免疫保护效应,但其免疫保护效应不及BCG。
- 杨爱琼谢勇恩
- 关键词：结核杆菌免疫保护性
- 利用反义技术抑制大肠杆菌β-内酰胺酶基因表达的实验研究
- 2009年
- 目的探讨利用反义表达质粒抑制细菌耐药基因表达的可行性。方法根据GenBank中β-内酰胺酶TEM-1基因序列设计一对寡核苷酸5J物，通过PCR扩增获取TEM-1基因，将其反向克隆入质粒pBK—CMV的多克隆位点构建反义表达质粒，将此反义表达质粒导入携带TEM-1型β-内酰胺酶的大肠杆菌，Western—blotting检测TEM-1表达情况。结果成功构建了TEM—1基因的反义表达质粒，将其导入携带TEM-1型β-内酰胺酶的大肠杆菌后，Western—blotting检测发现TEM-1表达显著下调。结论利用反义表达质粒可抑制大肠杆菌β-内酰胺酶TEM-1基因表达。
- 杨爱琼谢勇恩
- 关键词：大肠杆菌TEM-1基因
- 抗结核重组BCG疫苗研究进展被引量：2
- 2015年
- 结核病仍是严重威胁人类健康的传染病之一,卡介苗(mycobacterium bovis bacillus calmette-guérin,BCG)是唯一被批准用于结核病预防的疫苗,但近年来的研究发现其免疫保护效果极不稳定,构建重组BCG成为目前新型抗结核疫苗研究的重要方向之一。本文概括性地介绍了抗结核重组BCG疫苗研究的必要性、抗结核重组BCG的研究策略与研究进展以及存在的问题和未来展望。
- 杨爱琼谢勇恩
- 关键词：结核疫苗重组BCG免疫原性免疫保护性
- 结核杆菌Ag85A蛋白与日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶的融合表达与纯化被引量：1
- 2005年
- 目的 对结核杆菌Ag85A抗原基因进行克隆、表达与纯化 ,为研制新型结核杆菌血清学诊断试剂奠定基础。方法 以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板 ,经PCR扩增Ag85A抗原基因成熟肽编码区 ,定向克隆入原核表达载体pGEX1 λT中日本血吸虫谷胱苷肽硫转移酶 (GST)编码区下游构建重组质粒 ,经DNA测序鉴定后 ,转化大肠杆菌JM10 9株 ,IPTG诱导表达 ,采用GST蛋白纯化试剂盒进行重组融合蛋白纯化 ,SDS -PAGE和Westernblot鉴定重组表达产物。结果 PCR扩增获得了约 90 0bp的目的基因片断 ,定向克隆入原核表达载体pGEX1 -λT后 ,对重组质粒进行DNA测序发现 ,插入片段与GenBank中结核杆菌Ag85A抗原基因成熟肽编码区同源性为 99 .8%。重组质粒转化大肠杆菌后 ,经IPTG诱导表达 ,纯化的融合蛋白相对分子质量为 5 80 0 0 ,Westernblot检测该融合蛋白能与兔抗结核杆菌多价抗血清发生反应。结论 本研究为研制结核杆菌血清学检测试剂盒及相关分子免疫学研究奠定了基础。
- 杨爱琼谢勇恩
- 关键词：结核杆菌AG85A日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶A抗原IPTG
- 小干扰RNA抑制bcl-xL表达对食管癌细胞化疗敏感性的影响
- 2011年
- 目的探讨凋亡抑制分子bcl-xL表达下调对食管癌细胞化疗敏感性的影响。方法根据人bcl-xL基因序列设计和合成3对小干扰RNA,将其转染于体外培养的人食管癌细胞株Eca-109,通过RT-PCR和Western-blotting检测bcl-xL的表达情况,筛选出对bcl-xL表达抑制作用最强的小干扰RNA,通过MTT法检测小干扰RNA转染细胞和对照细胞在不同浓度顺铂和紫杉醇作用下的细胞增殖抑制率,计算出半数抑制浓度IC50值并进行对比分析。结果食管癌细胞转染靶向bcl-xL的3种小干扰RNA后,bcl-xL mRNA和蛋白表达均显示出不同程度下调,其中siRNA1对癌细胞bcl-xL表达的抑制作用最强。siRNA1转染食管癌细胞后可使顺铂和紫杉醇对癌细胞的IC50值由转染前的(31.4±4.3)μmol/L和(35.3±6.1)μmol/L下降至转染后的(8.4±3.3)μmol/L和(15.1±4.7)μmol/L(P<0.01)。结论小干扰RNA抑制bcl-xL表达可增强食管癌细胞对顺铂和紫杉醇化疗的敏感性。
- 杨爱琼王朝莉李雪婷谢勇恩
- 关键词：BCL-XL化疗敏感性
- 利用反义技术抑制大肠杆菌β-内酰胺酶基因表达的实验研究
- 2009年
- 目的探讨利用反义表达质粒抑制细菌耐药基因表达的可行性。方法根据GenBank中β-内酰胺酶TEM-1基因序列设计一对寡核苷酸引物，通过PCR扩增获取TEM—1基因，将其反向克隆入质粒pBK—CMV的多克隆位点构建反义表达质粒，将此反义表达质粒导入携带TEM-1型β-内酰胺酶的大肠杆菌，Western—blotting检测TEM-1表达情况。结果成功构建了TEM-1基因的反义表达质粒，将其导入携带TEM-1型β-内酰胺酶的大肠杆菌后，Western-blotting检测发现TEM-1表达显著下调。结论利用反义表达质粒可抑制大肠杆菌β-内酰胺酶TEM-1基因表达。
- 杨爱琼谢勇恩
- 关键词：大肠杆菌TEM-1基因
