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小鼠精原细胞的分离纯化被引量：1: 2015年; 目的建立一种高效、简便的分离纯化小鼠精原细胞的方法。方法利用胶原酶IV／脱氧核糖核酸酶I（DNaseI）／分散酶（dispase）组合酶消化法和差异性贴壁原理，从新生小鼠睾丸中分离、纯化精原细胞。经细胞形态学观察、视黄酸激活基因8（Stra8）免疫化学鉴定精原细胞并进行纯度分析。结果分离到的细胞经Stra8检测呈阳性，精原细胞纯度可达86％。结论该方法可高效地分离和纯化小鼠精原细胞。; 李玉华段斐周小羽李扬李润生; 关键词：小鼠精原细胞纯化

提高动物出生雄性比例的方法及其动物模型的建立: 本发明提供了提高动物出生雄性比例的方法及其动物模型的建立。本发明人将化合物双酚A施用于雄性小鼠，其产生子代出生雄性别比升高，即有更多的雄性子代。该动物模型可用于筛选预防出生性别比失调的药物及效果评价。; 李润生李玉华王健刘媛媛段斐; 文献传递

环境剂量的双酚A暴露对雄性小鼠生殖功能的影响被引量：4: 2015年; 目的:研究环境剂量的双酚A(BPA)暴露对雄性小鼠生殖功能的影响及可能的分子机制。方法:84只3周龄C57BL/6J雄性小鼠按体质量随机分为3组,分别为5μg/kg BPA组、50μg/kg BPA组、乙醇溶剂对照组,每组28只。每日灌胃给药1次,连续给药5周后,检测生殖器官脏器指数、附睾尾精子数量、睾丸组织学形态;同期与正常雌性小鼠配种检测雄鼠的生育力。应用MBDq PCR方法检测睾丸中Tnnt2、Tectb基因的甲基化水平变化。结果:1 BPA暴露组与对照组间的生殖系统脏器指数无统计学差异(P>0.05)。2 50μg/kg BPA暴露组附睾尾精子数量下降20.1%;睾丸曲细精管管腔中有生精细胞脱落等病理现象。3 BPA暴露组与对照组间的生育率无统计学差异(P>0.05),但50μg/kg BPA暴露组每胎平均产仔数下降。4 BPA组睾丸中Tnnt2、Tectb基因的甲基化水平下降(P<0.01)。结论:环境剂量的BPA暴露对雄鼠生殖器官脏器指数没有影响,50μg/kg BPA能引起小鼠生精功能下降,睾丸Tnnt2、Tectb基因的甲基化水平下降。; 李玉华周小羽段斐杨芬潘鸿捷李扬李润生; 关键词：生殖 DNA甲基化

硫磺在制备抑制肿瘤的组合物中的用途: 本发明属于生物技术领域，涉及硫磺在制备抑制肿瘤的组合物中的用途。本发明首次揭示了硫磺可以显著抑制肿瘤，特别是结肠癌或前列腺癌，可使得增殖速率显著降低，因此硫磺可以作为抗肿瘤治疗的有效药物成分。; 李润生陈海林李玉华段斐陈良康陈建兴; 文献传递

双酚A对小鼠精原干细胞C18-4的增殖及表观遗传机制的影响被引量：1: 2015年; 目的：研究不同剂量的双酚A（BPA）暴露对小鼠精原干细胞C18-4的增殖及表观遗传机制的影响。方法：C18-4细胞暴露于不同浓度的BPA（10-9-10-4 mol/L）96 h,用CCK-8方法测定细胞的增殖;通过点杂交、Real-time PCR、Western blotting方法检测10-5 mol/L BPA、10-9 mol/L BPA对DNA甲基化水平、组蛋白甲基转移酶基因、组蛋白H3K27Me3、H3K36Me3水平的变化。结果：110-9-10-6 mol/L BPA促进C18-4细胞增殖;10-5 mol/L BPA抑制细胞增殖,促进细胞凋亡;10-4 mol/L BPA导致细胞死亡。210-5 mol/L高剂量BPA引起C18-4细胞DNA整体甲基化水平下降（P〈0.01）。3 10-5 mol/L高剂量BPA能引起H3K27Me3、H3K36Me3水平下降（P〈0.01）。结论：BPA能干扰小鼠精原干细胞C18-4的细胞增殖;高剂量BPA能引起DNA甲基化水平和组蛋白甲基化水平的下降。; 李玉华周小羽段斐潘鸿捷李扬李润生; 关键词：精原细胞 DNA甲基化组蛋白甲基化

MEST基因在正常人前列腺移行带和外周带基质成纤维细胞中的mRNA表达差异及其与DNA甲基化水平的关系: 2013年; 目的:探讨正常人的前列腺移行带(PZ)和外周带(TZ)基质成纤维细胞中MEST(mesoderm specific transcript)基因的甲基化水平变化和表达差异,及DNA甲基化抑制剂(5-Aza-CdR)对其表达水平的影响。方法:用硫化测序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)和实时荧光定量PCR方法分别检测5-Aza-CdR处理前、后在前列腺PZ和TZ原代成纤维细胞中MEST基因的甲基化水平和相应的mRNA表达。结果:MEST基因在PZ成纤维细胞中为低甲基化高表达,在TZ成纤维细胞中为高甲基化低表达。加入5-Aza-CdR后,MEST在PZ和TZ成纤维细胞中都为去甲基化,而表达水平上升,但是TZ成纤维细胞表达水平的改变比PZ成纤维细胞大。结论:MEST基因的DNA甲基化差异可能是前列腺外周带和移行带成纤维细胞生物学行为差异的分子基础。; 周小羽李玉华段斐彭御冰李天琦李润生; 关键词：前列腺基质细胞 DNA甲基化

青春期雄性小鼠双酚A暴露对生殖功能及子代性别比的影响被引量：3: 2015年; 目的:研究双酚A(BPA)暴露对青春期雄性小鼠成年后生殖功能及对子代的影响。方法:21日龄C57BL/6J雄性小鼠每日腹腔注射BPA 50 mg/kg连续7 d,35 d后检测成年后雄鼠附睾尾精子数量、精子畸形率、睾丸组织学变化;与正常雌性小鼠配种,观测生育力指标以及仔鼠的出生情况。结果:BPA暴露能引起小鼠附睾尾精子数量下降20.6%(P<0.01);精子畸形率增加9.65%(P<0.05);睾丸组织结构异常;BPA暴露对雄性小鼠成年后的生育力没有明显影响;但能引起子代雄∶雌出生性别比升高。结论:青春期雄鼠BPA暴露能引起成年雄鼠生精功能下降,仔小鼠雄性比例增加。; 李玉华段斐杨芬周小羽潘鸿捷李扬李润生; 关键词：生殖功能性别比

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段斐