沈海萍
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 供职机构：大连工业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 混菌发酵中不同分子量代谢产物对非酿酒酵母胞内蛋白及酒体有机酸的影响被引量：6
- 2011年
- 本研究采用透析袋发酵法研究了酿酒酵母产生的不同分子量代谢产物对非酿酒酵母胞内蛋白和酒体有机酸的影响。当截留分子量为3.5 kD和10.0 kD时非酿酒酵母的存活时间分别延长至18 d和22 d,表明通过改变菌种之间物质的交换可以调节非酿酒酵母的存活时间。蛋白质解析发现共有65个蛋白质斑点表达出现差异,占蛋白质总数的13%,经质谱鉴定表明与这些蛋白同类固醇、赖氨酸、有机酸和ATP的生物合成有关。与截留分子量为10 kD的透析袋发酵相比,在截留分子量为3.5 kD的混菌发酵中,酒石酸含量升高5.1%、醋酸含量下降44.3%,说明通过限定菌体间代谢产物的沟通可以调整酒的滴定酸度和挥发酸度。
- 翟明昌朴永哲王祥余夏先锋沈海萍赵爽赵长新
- 关键词：双向电泳混菌发酵
- β-葡聚糖酶产生菌的选育及培养基初步优化被引量：4
- 2011年
- 麦芽的皮层和胚乳糊粉层中都残存有内源酶无法完全降解的β-葡聚糖,进而影响浸出率和麦汁粘度、过滤难度和啤酒胶体稳定性。在啤酒生产中,添加外源β-葡聚糖酶可以有效解决这些问题。采用刚果红营养平板法(GCN平板法)从衡水老白干和老龙口酒曲中筛选了3株β-葡聚糖酶活力较高且生产周期短的菌株(分别标记为4#、8#、12#),通过液态发酵,测得酶活分别为0.362U/mL、0.542U/mL、0.511U/mL。并对发酵培养基进行了优化,得到8#初始菌株最佳酶活为0.556U/mL。对该菌株进行紫外诱变,得到突变株酶活为:0.879U/mL。
- 沈海萍吴晓刚王晓丹赵长新
- 关键词：Β-葡聚糖酶菌株筛选紫外诱变
- 大麦和麦芽水溶性蛋白提取方案的优化及双向电泳图谱的建立被引量：5
- 2012年
- 为了建立一套适用于大麦和麦芽的双向电泳分析方法,得到更加清晰、全面的双向电泳图谱。以高产优质大麦品种Gairdner为材料,对提取方法以及提取过程中所用的试剂的种类、用量和处理时间等进行比较分析和优化,运用蛋白定量法测定提取样品的蛋白质含量,摸索出一套完整的用于双向电泳分析的大麦蛋白提取和样品制备方法。大麦或麦芽经研磨,缓冲液-苯酚提取,醇洗,冻干后得到的蛋白质样品,双向电泳分离,硝酸银染色,PDQuest分析,图谱结果显示大麦检测到700个蛋白质点,麦芽检测到500个蛋白质点。这一方法的构建可作为大麦蛋白质组研究的重要工具,为今后大麦蛋白质组学以及对大麦品质改良的研究奠定了一定的基础。
- 夏先锋朴永哲沈海萍翟明昌成建国赵长新
- 关键词：大麦麦芽双向电泳
- 酿酒酵母拮抗作用的蛋白组分析
- 2012年
- 为研究混菌发酵过程中酿酒酵母胞外蛋白对克鲁维酵母的拮抗作用并初步分离毒蛋白,采用超滤法提取酿酒酵母纯培养及透析培养的胞外蛋白,分别加入克鲁维酵母纯培养液中,通过平板菌落计数法,动态观测酿酒酵母胞外蛋白对克鲁维酵母生长的影响;双向电泳结合PDQuest软件分离解析酿酒酵母两种培养条件下的胞外蛋白图谱。实验结果表明,纯培养下的酿酒酵母胞外蛋白对克鲁维酵母无拮抗作用,而透析培养得到的酿酒酵母胞外蛋白可以导致克鲁维酵母提前死亡;纯培养图谱共79个蛋白点;透析培养图谱共109个蛋白点,比纯培养的新增30个蛋白点。由此推断:酿酒酵母可以分泌导致克鲁维酵母提前死亡的分子量大于10ku的蛋白类毒素,并且这种毒素的分泌不是自发的,而是在克鲁维酵母分子量小于10ku分泌物的诱导作用下才会产生。这30个新增蛋白点包括对克鲁维酵母的拮抗蛋白。
- 沈海萍朴永哲祖国仁夏先锋赵长新
- 关键词：酵母胞外蛋白拮抗作用双向电泳
- 葡萄酒酿酒酵母拮抗作用的蛋白组分析
- 葡萄酒的酿造过程，是在多种微生物共同作用下完成的。在实验条件下及生产实践中，人们均发现：虽然酿酒酵母在发酵初期并不占菌群优势，但随着发酵的进行，非酿酒酵母提前死亡，酿酒酵母成为直到发酵后期稳定的优势菌群。对于这一现象，过...
- 沈海萍
- 关键词：酵母拮抗双向电泳
- 文献传递
- 剩余污泥生态稳定化过程中细菌群落的多样性分析被引量：3
- 2012年
- 为了描述污泥生态稳定化过程中微生物多样性的变化趋势,应用变形梯度凝胶电泳技术(PCR-DGGE)分析了不同时期、不同取样位置的细菌群落变化。通过对图谱的聚类分析了不同样品的相似度。计算得出香农-威纳(Shannon-Wiener)指数分别为1.93、1.89、1.80、1.98、1.91、1.83、2.41、2.38、2.32,均度指数(Pielou)分别为0.62、0.58、0.65、0.62、0.67、0.68、0.74、0.78、0.72,其从3月到9月均在上升,即稳定化过程中生物多样性及均匀度都在提高。利用测序后得到的序列进行亲缘性比对,并结合优势种属的变化分析污泥样品细菌群落的演替。结果表明,污泥不同位置的微生物群落相似度较高,不同时期的生物群落有一定的差异,推测污泥中生物种群与优势种属主要随生态稳定化不同时期而改变。序列分析以及亲缘性分析表明,优势菌株主要为放线菌门和变形菌门,有5种放线菌、5种变形菌和2种古细菌共12种属。其中拜叶林克氏菌和红球菌上升有利于对有机质的降解转化,假诺卡氏菌等致病菌的减少说明生态稳定化具有良好的作用。生态稳定化可能对致病菌的降低以及有机质的转化等具有一定的作用。
- 曹阳朴永哲崔玉波沈海萍郭敏丽周华成
- 关键词：环境工程学稳定化生物多样性变性梯度凝胶电泳
