王德解
- 作品数：11 被引量：85H指数：7
- 供职机构：江西科技师范学院生命科学学院更多>>
- 发文基金：江西省教育厅科学技术研究项目国家高技术研究发展计划教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 关中驴线粒体DNA D-loop多态性分析被引量：23
- 2004年
- 本文对 6头关中驴线粒体DNAD loop区 399bp的核苷酸序列进行了分析。结果发现 ,关中驴的D loop区核苷酸变异只有转换 1种形式。 6头关中驴D loop区的核苷酸序列组成 3种单倍型 ,单倍型比例为 5 0 .0 0 % ,说明关中驴mtDNA遗传多样性正逐步丧失 ,需要加强驴种质资源保护。以欧洲驴D loop序列为对照 ,关中驴 3种单倍型的核苷酸变异率分别为 4 .2 1%、4 .5 1%和 0 .2 5 %。在获得的 399bpD loop碱基序列中 ,共检测出核苷酸多态位点18个 ,多态位点比例为 4 .5 1%。从D loop区核苷酸序列的 3种单倍型分析 ,发现关中驴可能有
- 雷初朝陈宏王德解杨公社孙维斌
- 关键词：关中驴线粒体DNAD-LOOP多态性分析核苷酸序列分析
- 甲状旁腺激素和转铁蛋白N端半分子融合蛋白在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2005年
- 利用重叠PCR技术将PTH(parathyroidhormone,甲状旁腺激素)基因与TFN(transferrinN_terminalhalf_molecule,转铁蛋白N端半分子)基因在体外融合,融合基因克隆至真核表达载体pPIC9中,转化毕赤酵母GS115。转化子经甲醇诱导后,融合蛋白得到了表达并分泌到发酵上清液中。经SPSepharoseFF阳离子交换层析、PhenylSepharoseFastFlow疏水层析纯化获得了纯度大于95%的PTH_TFN样品。Westernblot分析及腺苷酸环化酶实验证明融合蛋白中的PTH具有与抗PTH抗体结合能力及刺激腺苷酸环化酶的活性,铁饱和实验证明融合蛋白中的TFN和单独的TFN具有相同铁结合能力。因而TFN可望作为PTH的天然运输载体。
- 张豪李晓静王德解陈璟李彦英李玉玲沈明山方宏清陈惠鹏
- 关键词：甲状旁腺激素毕赤酵母基因表达腺苷酸环化酶
- 鼠羧肽酶原B在毕赤酵母中的表达、纯化与鉴定被引量：7
- 2007年
- 为了在毕赤酵母中表达鼠羧肽酶原B(procarboxypeptidaseB,proCPB)蛋白,以RT-PCR法从SD鼠胰腺细胞中克隆了proCPB基因,将其插入pPIC9载体,PEG1000介导转入毕赤酵母GS115细胞,在甲醇的诱导下,实现了proCPB在毕赤酵母中的成功表达。通过发酵条件的优化,使用BMGY(pH6·0)培养基,添加0·5%的酪蛋白水解物,于28℃,在起始OD600达10·0时,每隔12h补加0·5%的甲醇,重组酵母GS115-proCPB表达的产物量可达到最高(500mg/L),表达时间可达120h,表达的目的蛋白占总蛋白的94%以上。通过纯化条件的优化,采用两步疏水层析,可使目的蛋白的纯度达96%以上,蛋白得率达38%,重组proCPB活化后所得CPB的比活力可达110u/mg(CPB标准品为180u/mg)。相对分子量测定表明重组蛋白的分子量与理论值极相近,N-端氨基酸测序进一步表明proCPB基因在毕赤酵母中得到了正确的表达和翻译后加工修饰。
- 王德解苗林陈宏李彦英陈惠鹏方宏清
- 关键词：羧肽酶B毕赤酵母蛋白纯化
- 碱性电解功能水对动物细胞的调控及其在医疗中的应用被引量：8
- 2006年
- 活性氧自由基是引起生物大分子氧化损伤,导致许多疾病发生和老化的重要原因。水源污染促进疾病和老化的进程,危害人类健康,人们开始注意具有生理功能的活性水。电解功能水是通过电解方法得到的工程化水,包括酸性水、碱性水、臭氧和次氯酸溶液。本文就近年来国内外对电解碱性功能水在动物细胞机能调控及其在医疗中的最新研究做一概要性论述,并指出功能水的研发具有广阔的前景。
- 李玉萍喻小念周春丽苏虎许杨王德解
- 关键词：动物细胞活性氧自由基疾病
- 大鼠羧肽酶原B在毕赤酵母中的表达与培养条件优化被引量：2
- 2005年
- 目的:利用毕赤酵母表达系统,表达大鼠羧肽酶原B(procarboxypeptidaseB,proCPB)蛋白,同时探讨最优表达条件,为规模化发酵生产羧肽酶B奠定基础。方法:以RTPCR法从SD大鼠胰腺细胞中克隆了proCPB基因,将其插入pPIC9载体,转入毕赤酵母Gs115细胞,在甲醇的诱导下表达目的蛋白。结果与结论:首次实现了proCPB在毕赤酵母中的成功表达;通过表达条件的优化,使用BMGY(pH6.0)培养基,添加0.5%(体积比体积)的酪蛋白水解物和3mmol/L的PMSF,于28℃,每隔12h补加0.5%(体积比体积)的甲醇,重组酵母Gs115proCPB表达的重组蛋白可达500mg/L,表达的目的蛋白占总蛋白的94%,活化后的重组CPB相对分子质量为35.1×103,与理论值(35.2×103)极相近。活性测定表明,重组proCPB活化后的CPB的比活力可达110U/mg(CPB参照品为180U/mg)。
- 王德解李彦英陈宏方宏清陈惠鹏
- 关键词：羧肽酶B毕赤酵母发酵培养
- 羧肽酶B在毕赤酵母中的表达、纯化与活性鉴定
- 羧肽酶B(CPB)是一类水解蛋白或多肽底物C-端Lys或Arg的金属蛋白酶。当前，羧肽酶B已广泛应用于蛋白质、多肽的末端修饰，急性胰腺炎及胰腺植皮排斥的血清标记，尤其在胰岛素原活化为胰岛素的过程中，羧肽酶B是不可缺少的双...
- 王德解
- 关键词：毕赤酵母纯化偏爱密码子胰凝乳蛋白酶酪蛋白水解物
- 文献传递
- 羧肽酶B在毕酵母中的表达、纯化与活性鉴定
- 羧肽酶B(carboxypeptidase B,CPB)是一类水解蛋白或多肽底物C-端Lys 或Arg的金属蛋白酶。当前,羧肽酶B 已广泛应用于蛋白质、多肽的末端修饰,急性胰腺炎及胰腺植皮排斥的血清标记,尤其在胰岛素原活...
- 王德解
- 关键词：羧肽酶B毕赤酵母发酵培养蛋白纯化
- 马齿苋多糖抗糖尿病作用的实验研究被引量：17
- 2008年
- 为了观察马齿苋多糖的抗糖尿病作用,本实验用四氧嘧啶诱导糖尿病模型小鼠,观察了马齿苋多糖液灌胃后5、10和15d的空腹血糖浓度的改变,以及糖负荷30、60、120min后葡萄糖耐量变化。结果表明,马齿苋多糖可显著降低糖尿病模型小鼠的血糖和改善其糖耐量异常,且与处理浓度和时间呈正相关性。上述指标显示马齿苋多糖具有抗糖尿病作用。
- 李玉萍刘志勇谢国秀苏虎周春丽王德解
- 关键词：马齿苋多糖糖尿病血糖糖耐量
- 马齿苋有效成分的提取及定量分析被引量：14
- 2008年
- 目的提取马齿苋中多糖、生物碱、多不饱和脂肪酸和黄酮有效成分及定量,为研制治疗糖尿病的功能性食品提供依据。方法分别采用不同有机溶剂提取方法提取有效成分。结果几种有效物质的含量由大到小依次为多糖、生物碱、黄酮、多不饱和脂肪酸。结论南昌地区马齿苋中含有以上4种有效成分且生物碱含量比其他地区稍高。
- 周春丽苏虎王德解李玉萍
- 关键词：马齿苋
- 羧肽酶A/B亚家族被引量：9
- 2005年
- 羧肽酶A/B是一类水解蛋白质或多肽C 端氨基酸残基的外肽酶。众多学者对其特性、结构及功能进行了深入的研究,最近的研究显示羧肽酶A/B具有一些新的功能。此文拟对羧肽酶A/B亚家族成员的特性、结构特征。
- 王德解方宏清陈宏陈惠鹏
- 关键词：羧肽酶
