王海滨 作品数:20 被引量:141 H指数:7 供职机构: 西北农林科技大学 更多>> 发文基金: 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 国家高技术研究发展计划 陕西省科学技术研究发展计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 生物学 更多>>
西农萨能山羊锌指蛋白基因Ubi-d4的筛选、克隆和生物信息学分析 被引量:1 2008年 【目的】克隆西农萨能山羊泌乳中期和后期乳腺组织差异表达基因Ubi-d4并进行生物信息学分析,为进一步研究该基因的功能以及乳腺退化的分子机制提供信息。【方法】以西农萨能羊乳腺组织为材料,利用抑制性消减杂交技术筛选泌乳中期和后期乳腺组织差异表达基因,用RT-PCR克隆Ubi-d4基因,用实时定量PCR分析Ubi-d4基因的表达水平变化,用生物信息学方法对Ubi-d4基因进行结构和功能域预测。【结果】山羊乳腺Ubi-d4基因开放读码框全长1176bp,编码391个氨基酸,GenBank登陆号为EF105410;与牛(XM_881516)、人(NM_006268.3)、鼠(NM_011262)、兔(XM_341998)对应基因的核苷酸和氨基酸同源性分别为98%、90%、93%、90%和99%、99%、99%、98%,泌乳后期乳腺组织中mRNA表达水平是泌乳中期的6.10倍;氨基酸序列中含有一个C2H2型锌指结构,一个PHD型锌指结构,没有信号肽和跨摸结构。【结论】筛选到西农萨能山羊乳腺泌乳后期高水平表达基因Ubi-d4,克隆了它的开放读码框(1176bp,GenBank No:EF105410);生物信息学分析推测它是乳腺退化过程中的重要功能基因。 武会娟 罗军 张丽娟 杨宝进 韩雪峰 王海滨关键词:萨能山羊 乳腺组织 抑制性消减杂交 奶山羊乳腺脂肪酸代谢相关基因的筛选与克隆鉴定 罗军 武会娟 韩雪峰 王海滨 祁昱 张丽娟 曹艳红 杨宝进 刘俊霞 以中国优秀的奶山羊品种-西农萨能奶山羊为材料,通过分析山羊羊奶脂肪酸组成,研究脂肪酸含量的变化规律以及和膻味的关系;在前期构建奶山羊乳腺及肌肉组织cDNA文库、抑制消减杂交技术筛选山羊不同泌乳期乳腺以及山羊和奶牛乳腺之间...关键词:关键词:山羊 顶空进样气质联用法分析公山羊气味的挥发性成分 2008年 以西北农林科技大学萨能羊原种场的西农萨能种公羊为试验材料,利用Therm o Finnigan TR AC E D SQ气相色谱-质谱联用仪,Finnigan H S 2000顶空进样器,D B-5M S(30 m×0.25 m m×0.25μm)色谱柱,采用静态顶空方法对公山羊气味中的挥发性成分进行测定。结果共鉴定出16种挥发性物质,占总挥发性物质的93.55%,包括酮类5种、酯类3种、烷烃类3种、苯类3种、醛类2种,含量分别为4.16%、1.16%、85.82%、0.97%、1.44%。在发现的所有气味成分中,主要为C 6及部分低碳数的醛、酮和酯(包括饱和及不饱和化合物)等化合物,这些物质成分可能是低碳链脂肪酸合成的前体或代谢产物。 王海滨 陈艳瑞 郭家中 罗军关键词:气相色谱-质谱联用 静态顶空 共轭亚油酸对奶山羊公羔肉用性能及肌肉和脂肪中脂肪酸组成的影响 被引量:7 2011年 研究旨在探讨日粮中添加不同水平的共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)对奶山羊公羔肉用性能以及肌肉和脂肪中脂肪酸组成的影响。选择28只健康、体重相近(25.46±4.37kg)的关中奶山羊公羔,按随机区组试验设计原则等分为4组。每组7个重复,每个重复1只。对照组(C组)饲喂基础日粮,试验组分别饲喂添加1%(CLA1组)、2%(CLA2组)和3%(CLA3组)CLA油的试验日粮。试验期12周。结果表明:日粮中CLA添加水平对奶山羊公羔生长性能无显著影响(P>0.05);除CLA1组的胴体胸深显著高于CLA2组(P<0.05)、CLA1组的胸肌厚度显著高于对照组和CLA3组(P<0.05)外,其他肉用性能指标在各组间差异均不显著(P>0.05);肌肉和脂肪中顺-9,反-11-CLA、反-10,顺-12-CLA和总CLA的含量随日粮CLA添加水平的升高显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01)。由此得出,日粮添加CLA可以提高肌肉和脂肪中CLA含量,改善羊肉品质。 罗军 单翠燕 王海滨 滕炎玲 崔志宇 余刚 张宁关键词:奶山羊公羔 共轭亚油酸 肉用性能 脂肪酸组成 西农萨能羊乳腺脂肪酸合酶(FAS)基因及其启动子的克隆、测序与分析 脂肪酸合酶/(Fatty acid synthase, FAS;EC 2.3.1.85/)在哺乳动物的脂肪酸合成过程中具有重要作用,它利用乙酰-CoA、丙二酸单酰-CoA和NADPH催化饱和脂肪酸的合成。山羊乳腺短、中链... 王海滨关键词:启动子 克隆 实时定量PCR 文献传递 奶山羊初乳短、中链脂肪酸组成研究 被引量:5 2006年 以西北农林科技大学西农萨能羊原种场的产奶母羊为研究对象,采集35只2.5 ̄5岁母羊分娩后1 ̄5d的初乳和第5周常乳乳样,用气相色谱仪对乳中的短、中链脂肪酸组成含量进行测定。结果表明,初乳1 ̄5d中,丁酸(C4:0)、己酸(C6:0)、辛酸(C8:0)、癸酸(C10:0)、月桂酸(C12:0)、肉豆蔻酸(C14:0)的含量存在极显著差异(P<0.01),棕榈酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、油酸(C18:1)和亚油酸(C18:2)的含量差异显著(P<0.05);而初乳与常乳中,辛酸(C8:0)、癸酸(C10:0)、月桂酸(C12:0)的含量差异极显著(P<0.01),丁酸(C4:0)、棕榈酸(C16:0)含量差异显著(P<0.05),其余脂肪酸含量差异均不显著(P>0.05)。羊初乳中丁酸(C4:0)含量受产奶量影响不显著,处于相对稳定状态;其他短链脂肪酸和中链脂肪酸中棕榈酸(C16:0)的含量随产奶量增加而减少,长链脂肪酸随产奶量增加而增加。 曹艳红 罗军 王海滨 单翠燕关键词:羊初乳 产奶量 西农萨能羊乳腺脂肪酸合酶基因exon 9-15的克隆与序列分析 被引量:7 2008年 【目的】山羊FAS基因exon 9-15编码的乙酰/丙二酸单酰基转移酶(acetyl-CoA and malonyl-CoA transacylases,AT/MT)区域对山羊乳短、中链脂肪酸的合成起重要调控作用。本研究针对西农萨能羊乳腺FAS基因exon 9-15进行克隆和序列分析。【方法】以处于泌乳期28d的西农萨能羊乳腺组织mRNA反转录的cDNA为模板,通过RT-PCR方法首次扩增出西农萨能羊乳腺FAS基因exon 9-15的cDNA序列全长及exon 8的3′端和exon 16的5′端部分cDNA序列(GenBank收录号为DQ915966),并对其进行了同源性分析和功能预测。【结果】克隆片段全长1449bp,其中包括exon 9-15共1388bp、exon 8的3′端9bp和exon 16的5′端52bp,编码483个氨基酸,包含编码的AT/MT区域951bp(454~1404nt);西农萨能羊乳腺FAS基因exon 9-15与牛(NM_001012669),人(NM_004104),大鼠(NM_017332)和鸡(NM_205155)核苷酸序列相似度分别为95%、85.7%、82.7%、73.2%,氨基酸相似度分别为92.9%、77.7%、82.3%、64.7%;exon 10较其它物种缺失1个氨基酸。【结论】克隆获得西农萨能羊FAS基因片段全长1449bp,外显子9-15大小分别为463、185、190、95、135、204和116bp;核苷酸及氨基酸序列与牛相应序列的同源性均高于其它物种;AT/MT区域的活性位点在各物种间均为高度保守的丝氨酸,但西农萨能羊exon 10较其它物种缺失1个氨基酸,这可能对AT/MT区域的空间构象及其生理功能产生重要影响。本研究为西农萨能羊FAS基因cDNA全长克隆以及基因功能研究奠定了重要基础。 王海滨 罗军 武会娟 韩雪峰 单翠燕 张宁关键词:山羊 乳腺组织 EXON 西农萨能羊两个泌乳阶段差异表达基因SAA3的克隆和序列分析 2007年 为了研究不同泌乳期乳腺组织中差异表达基因,利用抑制性削减杂交技术构建西农萨能羊泌乳60 d乳腺组织及泌乳28 d乳腺组织中差异表达基因文库,用Real-Time PCR技术验证阳性克隆血清淀粉样蛋白A 3(SAA3)基因,通过RT-PCR方法克隆西农萨能羊乳腺组织SAA3,并进行序列比对和功能预测。结果成功构建了西农萨能羊不同泌乳期乳腺组织中差异表达基因文库,筛选克隆了乳腺组织SAA3基因,GenBank登录号为:DQ839400,编码区长度为396 bp,含有131个氨基酸。西农萨能羊乳腺组织中SAA3与牛(GenBank:NM_181016)、兔(GenBank:M64696.1)、人(GenBank:BC020795)、鼠(GenBank:NM_011315)核苷酸同源性分别为95%、84.3%、81.3%和81.9%,氨基酸同源性为93%、76%、72%、72%;在编码区261-287位较人、兔、鼠SAA编码区多27个碱基,连续大于5个氨基酸的保守区域有6个,较人SAA多3个潜在功能基序。 武会娟 罗军 张丽娟 韩雪峰 杨宝进 王海滨 单翠燕 张宁 余刚关键词:乳腺组织 不同胎次西农萨能羊鲜乳中链和短链脂肪酸组成的初步研究 被引量:25 2005年 以陕西省千阳县萨能羊种羊场的产奶羊群为研究对象,共采集5个胎次87只产奶羊的新鲜乳样,用气相色谱仪和乳成分测定仪分别测定了鲜乳的中、短链脂肪酸组成和乳成分含量。结果表明,不同胎次间丁酸(C4∶0)、己酸(C6∶0)、辛酸(C8∶0)和葵酸(C10∶0)的含量差异不显著(P>0.05);但胎次对月桂酸(C12∶0)和肉豆蔻酸(C14∶0)含量的影响作用达显著水平(P<0.05);长链脂肪酸中除亚油酸(C18∶2)含量在胎次间无显著差异(P>0.05)外,棕榈酸(C16∶0)、硬脂酸(C18∶0)和油酸(C18∶1)含量均存在显著差异(P<0.05)。乳成分中乳糖含量在不同胎次间差异不显著(P>0.05),而乳脂含量、乳蛋白含量、乳中干物质含量、乳中非脂固形物含量在不同胎次间均表现出显著差异(P<0.05)。 罗军 单翠燕 刘拉平 王海滨 孙小琴 王学清 武会娟关键词:脂肪酸组分 胎次 共轭亚油酸对奶山羊公羔肉用性能以及肌肉和脂肪中脂肪酸组成的影响 被引量:10 2010年 本研究旨在探讨日粮中添加不同水平的共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)对奶山羊公羔肉用性能以及肌肉和脂肪中脂肪酸组成的影响。选择28只健康、体重相近[(25.46±4.37)kg]的关中奶山羊公羔,按随机区组试验设计原则等分为4组。每组7个重复,每个重复1只。对照组(C组)饲喂基础日粮,试验组分别饲喂添加1%(CLA1组)、2%(CLA2组)和3%(CLA3组)CLA油的试验日粮。试验期12周。结果表明:日粮中CLA添加水平对奶山羊公羔生长性能无显著影响(P>0.05);除CLA1组的胴体胸深显著高于CLA2组(P<0.05)、CLA1组的胸肌厚度显著高于C组和CLA3组(P<0.05)外,其他肉用性能指标在各组间差异均不显著(P>0.05);肌肉和脂肪中cis-9,trans-11-CLA、trans-10,cis-12-CLA和总CLA的含量随日粮CLA添加水平的升高显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01)。由此得出,日粮添加CLA可以提高肌肉和脂肪中CLA含量,改善羊肉品质。 罗军 单翠燕 王海滨 滕炎玲 崔志宇 余刚 张宁关键词:奶山羊公羔 共轭亚油酸 肉用性能 脂肪酸组成