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程小峰: 作品数：16 被引量：39H指数：4; 供职机构：厦门大学附属成功医院更多>>; 发文基金：厦门市科技计划项目南京军区医学科技创新课题福建省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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Fas胞外区基因的构建、表达、纯化及多克隆抗体的制备被引量：3: 2010年; 目的构建Fas胞外区(eFas)基因的表达载体,表达纯化重组蛋白,进行多克隆抗体的制备,为进一步功能研究奠定基础。方法通过重叠PCR获得eFas基因的编码序列,构建pET-22b(+)/eFas表达载体,转化大肠杆菌Rosetta-gami,IPTG诱导表达,Ni-NTA柱亲和纯化,SDS-PAGE鉴定重组蛋白的纯度。将纯化的eFas融合蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,通过ELISA方法检测多克隆抗体的效价。结果获得了eFas的编码序列与表达载体,目的蛋白主要在包涵体中表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上,纯化的重组蛋白纯度达95%以上。结论eFas融合蛋白基因的构建、表达、纯化以及多克隆抗体的制备,为进一步研究Fas提供了材料。; 张佳锴孟庆宇程小峰刘瑞振庄国洪; 关键词：FAS 细胞凋亡多克隆抗体

抗人死亡受体5单链抗体特性分析被引量：3: 2011年; 目的探究抗人死亡受体5(DR5)单链抗体(aDR5ScFv)的特异性。方法 ELISA检测aDR5ScFv的效价、亲和力和表位分析。Western blotting检测单链抗体的特异性。MTT检测aDR5ScFv对结肠癌细胞SW480的生长抑制。结果 ELISA显示抗人死亡受体5单链抗体抗体效价为1.2×104。通过间接ELISA证实aDR5ScFv与aDR5mAb识别DR5胞外段(eDR5,系本实验室自己构建)的同一个位点。aDR5ScFv的亲和力常数为2.12×10-2。eDR5与aDR5ScFv能够特异结合。MTT检测结果显示,aDR5ScFv抑制SW480细胞生长呈剂量依赖性,aDR5ScFv终质量浓度分别为0.225 mg/ml、0.45 mg/ml、0.9 mg/ml、1.2 mg/ml。200μl时,SW480细胞的存活率分别为97.7%,70.9%、70.1%、23.6%。结论 aDR5ScFv能与eDR5特异性结合,并有较强的活性。; 程小峰张佳锴孟庆宇黄小平范鑫庄国洪; 关键词：DR5 单链抗体特异性 SW480

肝癌发展中FasL及其受体Fas/DcR3的表达分析被引量：7: 2010年; 目的研究小鼠肿瘤发生早期肿瘤坏死因子超家族成员FasL及其受体的表达特点,及其与免疫调节相关分子表达的时空关系,探讨其在诱导肿瘤免疫耐受中的作用。方法建立小鼠实体瘤模型,采用RT-PCR方法检测肿瘤组织中可溶型FasL、Fas及DcR3、TGF-β、IL-10在肿瘤发生不同时相的表达,同时,应用ELISA方法定量检测血清中TGF-β、IL-10的表达。结果在早期的肿瘤组织中,Fas的表达先于DcR3,其后DcR3大量表达,而Fas的表达则下调直至丢失,DcR3、FasL同时表达并上调,TGF-β和IL-10也随肿瘤的表达而上调。TGF-β同DcR3的表达具有空间位置的一致性。FasL、DcR3、TGF-β和IL-10的表达水平同肿瘤的生长呈正相关。结论随着肿瘤不断的生长,肿瘤局部的免疫应答逐渐趋向于负调节,FasL、DcR3在诱导肿瘤免疫耐受的过程中可能发挥着重要作用。; 刘忠臣罗芳洪陈彩霞杨东海范鑫程小峰庄国洪; 关键词：FASL DCR3 FAS 肝癌

红景天对免疫调节的研究概述被引量：9: 2013年; 红景天药用历史悠久,祖国医学将其列为"草本上品",能"祛邪恶气,补诸不足"。肿瘤是因虚而得病,因虚而致实,是一种全身属虚,局部属实的疾病,中医治疗原则为"扶正祛邪,标本兼治"。红景天可用于治疗肿瘤符合中医理论。现代大量体外研究发现其具有广泛的药理作用,"抗肿瘤、调节免疫力"为其功效之一,临床应用颇多,但在此方面的临床疗效评价甚少。; 程小峰赖国祥; 关键词：红景天肿瘤免疫

抗人DR5单链抗体诱导HepG2细胞凋亡的实验研究被引量：3: 2010年; 目的探究抗人DR5单链抗体(scFv)ZF1对肝癌细胞株HepG-2的凋亡作用及机制。方法 MTT法检测ZF1对HepG-2的细胞毒效应;流式细胞术检测ZF1诱导HepG2的凋亡率;荧光显微镜观察经ANNEXIN-V/PI双染的HepG-2细胞;DNA Ladder检测HepG-2细胞的DNA特点;Western blotting检测Bcl-2、PARP蛋白的表达。结果 MTT结果显示ZF1抑制HepG-2细胞生长呈剂量依赖性,ZF1终浓度分别为0.225、0.45、0.9mg/ml、1.2mg/ml200μl时,HepG-2细胞的生长抑制率分别为28.8%、52.3%、65.3%、89.8%;流式细胞仪检测结果显示,终浓度分别为0.225、0.45、1.2mg/ml2ml作用HepG-2细胞4h,凋亡率分别为32.9%、56%、83.2%;荧光显微镜下可见早期凋亡细胞,细胞膜呈绿色荧光,细胞内有凋亡小体的形成,伴有核结构的变化;DNALadder出现明显的彗星尾状条带;Western blotting检测到ZF1诱导凋亡的细胞内Bcl-2、PARP蛋白表达上调。结论 ZF1可诱导HepG2细胞株凋亡,这种作用与HepG2细胞株表达Bcl-2、PARP蛋白蛋白表达上调相关。; 孟庆宇程小峰张佳锴黄小平庄国洪; 关键词：DR5 单链抗体 HEPG2细胞株凋亡

临床药师对1例围产期心肌病患者的药学服务: 目的探讨临床药师在围产期心肌病患者中药物治疗中的作用。方法临床药师通过参与1例围产期心肌病患者的救治，根据患者的尿量、心率、血压及临床症状等指标，配合医师为病人提供最适宜的药物治疗方案。; 胡涛桃程小峰王岩黄美艳赵军礼李晓宇席宇飞; 关键词：围产期心肌病药学服务 Β受体阻滞剂辅酶Q10

重组人血管内皮抑素和长春瑞滨对人肺腺癌裸鼠移植瘤放射增敏作用的实验研究: 2014年; 目的探讨重组人血管内皮抑素(Endostar)和长春瑞滨(Vinorelbine)单独或联合应用对人肺腺癌裸鼠移植瘤的放射增敏作用。方法建立人肺腺癌裸鼠转移瘤模型。荷瘤裸鼠随机分为6组:对照组、单照组、重组人血管内皮抑素组、长春瑞滨组、重组人血管内皮抑素和长春瑞滨联合照射组、重组人血管内皮抑素联合照射组。采用6MV-X线进行照射。照射剂量为10 Gy。隔日测量移植瘤的最大径及垂直径。计算肿瘤体积及延缓天数等。获得增敏系数(EF)。利用增敏系数评价重组人血管内皮抑素和长春瑞滨的放射增敏作用。结果重组人血管内皮抑素给药第1天照射。重组人血管内皮抑素EF值为1.1。重组人血管内皮抑素和长春瑞滨联合治疗的增敏系数为0.1;第7天照射。重组人血管内皮抑素的EF值为2。重组人血管内皮抑素和长春瑞滨联合治疗的增敏系数为1。结论重组人血管内皮抑素联合长春瑞滨均不具有放射增敏作用。机制有待进一步研究。; 程小峰张蓓蓓高春玲叶性景张雅雅丁园章志勇; 关键词：肺腺癌拮抗作用放射增敏

抗人NRP-1单克隆抗体对肝癌HepG2细胞株的生长抑制作用及机制初探被引量：1: 2016年; 目的研究抗人神经纤毛蛋白-1(Neuropilin1,NRP-1)单克隆抗体对肝癌Hep G2细胞的生长抑制作用及其机制。方法小鼠腹水法制备抗NRP-1单克隆抗体(NRP-1 m Ab)并用r Protein A亲和柱纯化抗体,间接ELISA检测抗体的滴度水平。Western blot检测NRP-1 m Ab对Hep G2细胞的特异性,细胞免疫荧光和流式细胞术检测NRP-1蛋白在肝癌细胞株Hep G2上的表达,MTT法检测NRP-1 m Ab对Hep G2的生长抑制作用,Western blot检测ERK1/2、P-ERK1/2、Akt、P-Akt蛋白的表达水平。结果 SDS-PAGE和间接ELISA检测纯化的NRP-1 m Ab纯度为95%以上,效价为1×10^(-6);Western blot检测结果显示NRP-1 m Ab可与Hep G2细胞膜上的NRP-1蛋白特异性结合。细胞免疫荧光染色结果显示NRP-1定位于Hep G2细胞膜,流式细胞术结果显示NRP-1蛋白在Hep G2细胞上表达水平较高;MTT法检测结果显示NRP-1 m Ab对Hep G2细胞有生长抑制作用。Western blot检测到在不同浓度NRP-1 m Ab作用下,Hep G2细胞裂解液P-ERK1/2、P-Akt蛋白的条带信号逐渐减弱。结论纯化的NRP-1m Ab能抑制Hep G2细胞的生长,其抑制作用是通过EGF和HGF信号通路实现的。; 谈文娟高春玲颜江华程小峰张蓓蓓王笑良; 关键词：肝癌

重组人血管内皮抑素对肺腺癌放射增敏作用的动物实验研究: 2014年; 目的研究重组人血管内皮抑素(恩度)对肺腺癌的放射增敏作用。方法建立人肺腺癌裸鼠移植瘤模型;将荷瘤裸鼠分4组:空白对照组,单照组,联合治疗组,单药组,每组各8只裸鼠;采用腹腔注射的给药方法,恩度用药浓度为2 mg/kg;采用6 MV-X线照射,单次照射15 Gy;每两天测量移植瘤最长径(A)、垂直径(B)以及瘤的高度(C),记录荷瘤裸鼠体重及进食、活动情况的变化,通过肿瘤体积计算肿瘤生长延缓天数等,利用增敏系数(EF)评价恩度放射增敏效果。结果从肿瘤生长曲线来看,相较于空白对照组,单药组、单放组、联合治疗组肿瘤的生长都受到不同程度抑制,其中联合治疗组较其他组更明显。联合治疗组重组人血管内皮抑素的增敏系数(EF)为1.9>1.0。结论重组人血管内皮抑素联合放射治疗明显抑制了肺腺癌肿瘤的生长,重组人血管内皮抑素对放疗具有放射增敏效应。; 张蓓蓓高春玲程小峰王笑良陈玉强吴晓安章志勇; 关键词：肺腺癌重组人血管内皮抑素

抗人死亡受体5单链抗体的构建表达纯化及活性分析: 2012年; 目的构建、表达、纯化抗人死亡受体5(DR5)单链抗体,并检测其诱导肿瘤细胞凋亡的活性。方法采用RT-PCR获取鼠源性抗人DR5单克隆抗体重链和轻链可变区基因序列,以一柔性连接肽连接二者,转入表达载体,以大肠杆菌表达融合蛋白,亲和色谱纯化后用MTT实验和凋亡检测试剂盒检测其凋亡诱导活性。结果获得的序列经比对为抗体重链和轻链可变区基因,表达纯化后的重组蛋白具有接近完整抗体的肿瘤细胞凋亡诱导活性。结论抗人DR5 scFv可作为诱导肿瘤细胞凋亡的候选药物,为肿瘤免疫学研究提供材料。; 张佳锴程小峰庄国洪; 关键词：死亡受体5 单克隆抗体 SCFV

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