童允洁
- 作品数：14 被引量：15H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- VEGF硫代反义寡核苷酸抑制U937细胞VEGF的表达被引量：4
- 2004年
- 为研究硫代磷酸化修饰的血管内皮生长因子反义脱氧寡核苷酸 (VEGF ASODN)对急性单核细胞白血病细胞系U937VEGF表达的影响 ,将终浓度分别为 10 ,2 0 ,30 μmol/L的VEGF ASODN和错义序列与U937细胞分别孵育 2 4 ,4 8,72小时 ,采用RT PCR检测VEGFmRNA的表达 ,Westernblot检测VEGF蛋白的表达。结果显示 ,VEGF ASODN对U937细胞的VEGF的表达有明显的抑制作用 ,与错义序列组和空白对照组相比有显著差异 (P<0 .0 5 ) ;错义序列组与空白对照组VEGF的表达无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 :VEGFASODN可下调白血病细胞株U937的VEGFmRNA和蛋白的表达水平。
- 童允洁张敏邹萍郭荣
- 关键词：VEGF反义脱氧寡核苷酸U937细胞
- 调控CD_(95)的锤头状核酶抑制小鼠T细胞凋亡及杀伤活性的作用研究
- 2005年
- 张敏游泳童允洁陈智超刘陵波邹萍
- 关键词：T细胞凋亡杀伤活性移植物抗白血病小鼠GVL效应
- VEGF反义寡核苷酸对淋巴瘤新生血管生成的抑制作用
- 2007年
- 目的研究硫代磷酸化修饰的血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(ASODN)对裸鼠淋巴瘤血管生成的作用。方法将终浓度为20μmol/L的VEGFASODN、错义序列及PBS分别与人淋巴瘤细胞系Namal-wa细胞孵育24h,裸鼠随机分为VEGFASODN组、错义序列组和对照组,将上述处理的Namalwa细胞(5×106溶于PBS液20μl)接种于裸鼠皮下,4周后处死全部裸鼠,测定肿瘤大小,标本采用链酶菌抗生素蛋白-过氧化酶免疫组化法(SP法)检测肿瘤组织微血管密度(MVD)。结果第28天VEGFASODN组、错义序列组和PBS组肿瘤体积的大小分别为(212.6±196.5)、(468.2±161.3)和(473.1±166.7)mm3。VEGFASODN组微血管密度(12.26±0.78)较对照组(24.13±1.21)显著减少。结论VEGFASODN对裸鼠淋巴瘤的生长及其新生血管的生成有明显的抑制作用。
- 童允洁邹萍张敏郭荣
- 关键词：血管内皮生长因子反义寡核苷酸淋巴瘤微血管密度
- 反义寡核苷酸抑制Namalwa细胞血管内皮生长因子表达
- 2005年
- 童允洁张敏邹萍郭荣袁永辉
- 关键词：A细胞VEGF反义寡核苷酸外套细胞淋巴瘤ASODN低度恶性恶性度
- CⅡTA锤头状核酶抑制Jukart细胞MHCⅡ类抗原的表达被引量：1
- 2003年
- 目的 针对同种异体细胞移植的免疫反应主要是由主要组织相容性复合物Ⅱ (majorhistocompatibilitycomplex ,MHC Ⅱ ,人类中亦称HLA Ⅱ )类抗原介导 ,而MHCⅡ类分子转录激活因子 (MHCclassⅡtransactivator ,CⅡTA)对MHCⅡ分子的表达起严格且专一性的调控作用 ,拟通过抗CⅡTA锤头状核酶 (ribozyme,Rz)抑制细胞表面MHCⅡ分子的表达。 方法 设计并合成针对人类CⅡTA基因第 134、2 18、4 6 4位点的一组核酶 ,分别命名为Rz134、Rz2 18、Rz4 6 4。通过体外制备和活性鉴定 ,筛选出活性较高的核酶———Rz4 6 4。将Rz4 6 4克隆到含有核糖体内进入位点及增强型绿色荧光蛋白的表达载体 (internalribosomeentrysite enhancedgreenfluorescentprotein ,pIRES2 EGFP) ,简称为 pRz4 6 4 ,并稳定转染Jukart细胞株 (pRz4 6 4 J) ,流式细胞术检测经典的MHCⅡ (HLA DR、DP、DQ)抗原表达 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测CⅡTAmRNA水平。结果 pRz4 6 4 J与无关核酶组比较 ,HLA DR、DP、DQ抗原诱导型表达分别降低了 73 2 7%、88 93%、5 8 82 % ;同时CⅡTA的诱导性mRNA含量明显减少 (P <0 0 1)。结论 抗CⅡTA锤头状核酶可抑制CⅡ ATmRNA的表达 ,从而阻止其调控的相应基因———MHCⅡ分子的表达 ,为进一步探讨免疫?
- 郭荣邹萍宋永平马军陆华中曹谊林童允洁
- 关键词：免疫反应
- 血管内皮生长因子反义寡核苷酸对裸鼠淋巴瘤血管生成的影响
- 第一部分:目的:研究硫代磷酸化修饰的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN...
- 童允洁
- 关键词：血管内皮生长因子反义寡核苷酸RT-PCR淋巴瘤微血管密度
- 文献传递
- 反义寡核苷酸对人淋巴瘤细胞系Namalwa细胞血管内皮生长因子表达影响的体外研究(英文)
- 2007年
- 为了研究硫代磷酸化修饰的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对人淋巴瘤细胞系Namalwa细胞VEGF表达的影响,将终浓度分别为5、10、20μmol/L的VEGFASODN和错义序列与人淋巴瘤细胞系Namalwa细胞分别孵育24、48小时,采用RT-PCR检测VEGFmRNA的表达,采用链酶菌抗生素蛋白-过氧化酶免疫组织化学法(streptavidin/peroxidase,SP法)检测VEGF的表达。结果表明:VEGFASODN3个浓度组(5、10和20μmol/L)处理的Namalwa细胞VEGFmRNA的表达分别为1.38、0.96、0.57,错义序列组和对照组分别为1.79、1.84。当加入20μmol/LVEGFASODN作用48小时后,细胞内VEGF蛋白水平显著减少,而错义序列组Namalwa细胞VEGF蛋白水平未见明显改变。结论:VEGFASODN在体外能够抑制Namalwa细胞VEGF的表达。
- 黎纬明张敏邹菁童允洁邹萍
- 关键词：血管内皮生长因子反义寡核苷酸淋巴瘤
- 血管内皮生长因子反义寡核苷酸对裸鼠淋巴瘤血管生成的影响被引量：4
- 2005年
- 背景与目的:研究表明,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)与淋巴瘤从低度向高度恶性的进展有关,且VEGF表达高的淋巴瘤易发生早期远处转移。目前,VEGF反义脱氧寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)对淋巴瘤血管生成影响的研究尚少。本课题拟通过体内、体外实验探讨硫代磷酸化修饰的VEGFASODN对淋巴瘤血管生成的影响。方法:将终浓度分别为10、20、30μmol/L的VEGFASODN和错义序列与人淋巴瘤细胞系Namalwa细胞分别孵育24h、48h,采用RT-PCR检测VEGFmRNA的表达,采用链酶菌抗生素蛋白鄄过氧化酶免疫组化法(streptavidin/peroxidase,SP法)检测VEGF蛋白的表达。用VEGFASODN处理的Namalwa细胞注射入裸鼠,监测裸鼠肿瘤的大小,并采用SP法分析淋巴瘤中微血管密度(microvesseldensity,MVD)。结果:凝胶图像分析表明VEGFASODN3个浓度组(10、20、30μmol/L)处理的Namalwa细胞VEGFmRNA的表达分别为1.28、0.86和0.47,错义序列组和对照组分别为1.79和1.84。VEGFASODN组、错义序列组和对照组VEGF蛋白的表达分别为23.3%、46.9%和47.8%。VEGFASODN组、错义组、PBS组的细胞接种裸鼠,其新生血管的数目分别为12.26±0.78、23.92±1.14和24.13±1.21。
- 童允洁张敏邹萍郭荣袁永辉
- 关键词：VEGF反义脱氧寡核苷酸淋巴瘤
- VEGF反义寡核苷酸对K562细胞VEGF表达的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 研究硫代磷酸化修饰的血管内皮生长因子 (VEGF)反义寡核苷酸 (ASODN)对慢性红白血病细胞K 5 62VEGF表达的影响。方法 将终浓度分别为 10、2 0、3 0 μmol·L-1的VEGFASODN和错义序列与K 5 62细胞分别孵育 2 4、48h ,另设空白对照组。采用RT PCR检测VEGFmRNA的表达 ,免疫组织化学方法检测VEGF蛋白的表达。结果 VEGFA SODN对K 5 62细胞VEGF表达有明显的抑制作用 ,与错义序列组和空白对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。错义序列组与空白对照组比较VEGF的表达无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 VEGFASODN可下调慢性红白血病细胞K 5
- 童允洁邹萍张敏伍晓菲袁永辉
- 关键词：血管内皮生长因子反义寡核苷酸K562细胞基因表达
- 锤头状核酶降低小鼠胰岛细胞经CD95途径的凋亡被引量：1
- 2005年
- 目的研究锤头状核酶通过调控CD95的表达,对小鼠胰岛细胞凋亡的影响;探索提高胰岛移植物存活率的新途径。方法体外构建针对CD95mRNA93位点的锤头状核酶(pU6-Rz93)和突变型核酶(pU6-dRz93)。采用Ⅴ型胶原酶消化法分离小鼠胰岛细胞,通过干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素1α(IL-1α)诱导其高表达CD95后,经钠米载体-Effectene将核酶转染至该细胞。通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹检测(Westernblot)法检测胰岛细胞CD95的表达。胰岛细胞经抗CD95的抗体(JO2)作用后,以Caspase-3活性检测试剂盒检测转染前后细胞Caspase-3活性的变化;MTT法测细胞的增殖;Annexin-Ⅴ凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡,并观察了各组细胞对细胞毒T淋巴细胞(CTL)杀伤的反应能力。结果细胞因子可诱导小鼠胰岛细胞高表达CD95分子。转染pU6-Rz93组的胰岛细胞CD95的表达与转染空载体组和转染pU6-dRz93组相比,明显下降。经JO2处理后,转染pU6-Rz93组胰岛细胞的Caspase-3活性和凋亡率明显降低,细胞增殖活性和抵抗CTL杀伤的能力显著增强。结论针对FasmRNA93位点的锤头状核酶能显著抑制小鼠胰岛细胞CD95的表达,使其免于CD95途径的凋亡;为提高胰岛移植物的存活率提供了实验基础。
- 张敏刘芳刘陵波童允洁肖娟仲照东邹萍
- 关键词：锤头状核酶CD95小鼠白细胞介素1Α胰岛移植物胶原酶消化法
