胡志刚
- 作品数：3 被引量：22H指数：2
- 供职机构：江苏大学生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 荧光定量PCR检测家蚕核型多角体病毒在其宿主体内的增殖动态被引量：18
- 2005年
- 为了研究家蚕核型多角体病毒(Bombyx morinuclear polyhedrosis virus,BmNPV)在其宿主幼虫体内不同组织中的增殖动态,对敏感性家蚕品种306幼虫进行经口定量滴注病毒。在接种后9个时间点,对中肠、血淋巴和脂肪体进行取样。以BmNPVDNA聚合酶基因(dnapol)指示病毒拷贝数,同时以家蚕细胞质肌动蛋白A3(actin A3)基因作为参比基因,用荧光定量PCR的方法分别检测各个时间点的中肠、血淋巴和脂肪体中病毒的拷贝数。结果表明经口感染2h,病毒进入中肠;12h,病毒已经到达血淋巴和脂肪体;再经过约12h的潜伏期,病毒在各组织中开始快速增殖,到84h各组织中病毒增殖达到平台期。
- 姚勤高路陈克平胡志刚
- 关键词：家蚕核型多角体病毒DNA聚合酶基因肌动蛋白基因荧光定量PCR
- 鳞翅目昆虫性信息素合成的分子机制研究进展被引量：4
- 2006年
- 信息素(pheromone)对昆虫的繁殖和种间隔离有重要作用。对鳞翅目昆虫雌性信息素的生物合成途径、性信息素成分比例调节、信息素生物合成激活肽(pheromone biosynthesis activating neuropeptide,PBAN)在性信息素合成中的调节作用,以及鳞翅目昆虫性信息素合成相关脱饱和酶的分类和作用等研究进展进行了综述。从NCBI上搜索了鳞翅目昆虫现有的脱饱和酶基因,利用DNAstar软件对各种脱饱和酶基因进行了系统发育树构建和分析,发现脱饱和酶基因的聚类不是由物种决定的,而是由其自身的复制需要和脱饱和酶的作用功能决定的。
- 赵远胡志刚陈克平
- 关键词：鳞翅目昆虫性信息素生物合成分子机制
- 家蚕瘫痪肽结合蛋白基因克隆与分析(英文)
- 2006年
- ENF肽家族具有保守的N末端结构(Glu-Asn-Phe-)。该家族成员肽大多具有重叠功能活性,在鳞翅目昆虫的免疫反应,生长调控和自体调节等方面都发挥着重要的作用。在昆虫的免疫反应中,血细胞尤其是淋巴液的黏附性是针对外来侵入物的免疫应答过程中的重要因素。家蚕瘫痪肽(paralyticpeptide)是ENF肽家族的一种,其具有多种的生物学活性,包括致瘫痪性及在家蚕血细胞免疫反应中的促吞噬细胞扩散活性。ENF肽家族的另一成员,粘虫(Pseudaletiaseparata)的生长阻抑肽(Growth-blockingpeptide),同家蚕瘫痪肽一样能够在粘虫的血细胞免疫反应中起到调节吞噬细胞的功能。目前,关于昆虫细胞免疫应答的终端调控分子机制的研究还比较少,有文献报道粘虫的生长阻抑肽结合蛋白(GBP-BP)能够起到沉默生长阻抑肽活性的功能,从而可能参与调节细胞免疫应答的终端调控。在本研究中,利用荧光差异显示技术(FDD)分析了家蚕感染BmNPV病毒后基因表达差异情况,在血淋巴中获得了一条差异条带G12782。通过5′-RACE技术,首次在家蚕中克隆得到了该基因的全长cDNA序列。通过同源性分析得知,该基因所编码的蛋白质与粘虫的生长阻抑肽结合蛋白具有很大的同源性,并被命名为家蚕瘫痪肽结合蛋白(B.moriparalyticpeptidebindingprotein,PP-BP)。通过RT-PCR研究发现,该蛋白基因在血淋巴中大量表达。同时,利用实时荧光定量PCR(Real-timequantitativePCR)技术分析了该基因在正常饲养家蚕与添食BmNPV病毒的家蚕中的表达差异,结果显示该基因在家蚕添食BmNPV病毒后的表达量大大增强,这就暗示该基因可能与BmNPV病毒刺激后所引起的家蚕血液细胞免疫反应相关。利用生物信息学方法对该基因的结构进行了分析,发现该基因具有两个外显子和一个内含子。这个基因已经登入GenBank数据库,收入号为DQ306881。
- 胡志刚陈克平姚勤高贵田徐家萍陈慧卿
- 关键词：细胞免疫生物信息学定量PCR
