蒋国润
- 作品数：26 被引量：20H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划云南省科技厅科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- HIV1型C/B亚型DNA、MVA疫苗免疫原性和免疫策略研究
- 研究背景:HIV的基因组中含有gag、pol和env等基因,gag基因为组成病毒核心的核酸核蛋白的编码,pol基因为复制逆转录酶的编码,其编码的蛋白是联接包膜与核心的跨膜蛋白,这些基因编码蛋白在各种类型的艾滋病毒中是一致...
- 孙明蒋国润周东霞王玺李冰香黄小琴史荔褚嘉祐
- 文献传递
- 一种重组蛋白K-S及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种重组蛋白K‑S及其制备方法和应用，属于生物技术领域，方案包括在所述S1蛋白的核苷酸序列上，对6个关键位点进行突变，突变位点及碱基分别为：G1251T，T1355G，G1450C，A1501T，A1841G...
- 李琦涵范胜涛徐兴丽李丹丹赵恒于丽蒋国润廖芸张莹王丽春张晶晶段素琴高扬曾烽原徐祥雄
- 文献传递
- HIV-1 C/B’亚型多价重组MVA病毒疫苗免疫原性的研究
- 2008年
- 目的:检测人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)C/B’亚型与痘苗病毒安卡拉株(MVA)的多价重组疫苗的免疫原性,此疫苗中包含HIV-1C/B’CRF株的5个基因,分别是env,gag,pol,nef,tat。方法:设105pfu/ml,106pfu/ml,107pfu/mlADMVA3个剂量组,用ELISPOT方法检测细胞免疫反应。同时,以Gag蛋白作为包被抗原,使用间接ELISA的方法检测体液免疫反应。结果:免疫后的小鼠对插入基因env,gag,pol和nef所表达蛋白均产生了特异性细胞免疫应答,且免疫效果与免疫剂量呈正相关。ELISA结果表明,MVA重组疫苗免疫诱导产生了特异性体液免疫,抗HIV-1Gag的抗体滴度与免疫次数和免疫剂量都存在正相关性。结论:多价MVA重组疫苗能有效地诱导小鼠产生特异的细胞免疫和体液免疫反应。
- 高燕孙明蒋国润张银川王玺李冰香黄小琴陈丹周东霞褚嘉祐
- 关键词：HIV-1免疫原性
- 甲型肝炎减毒活疫苗生产中病毒释放的最佳方法探索被引量：2
- 2001年
- 目的 探索甲型肝炎减毒活疫苗 (简称甲肝活疫苗 )生产中感染细胞释放病毒的最佳方法。方法 采用超声波细胞粉碎仪、- 70℃及液氮冻融 3种方法粉碎细胞 ,对细胞破碎情况、病毒抗原滴度和感染性滴度进行了比较。结果 超声波连续粉碎 3次 (90秒 /次 )、- 70℃反复冻融粉碎 4次和液氮冻融粉碎 6次 ,细胞破碎率分别为 94%、82 %和 81% ;病毒抗原滴度和感染性滴度均达高峰 ;抗原滴度均为 1∶2 5 6 ,感染性滴度 (logCCID50 /ml)分别为 8 6 7、6 5和 6 0。继续超声和 -70℃冻融粉碎细胞 ,病毒抗原滴度和感染性滴度基本不变 ,而液氮冻融至第 10次时 ,抗原滴度无明显变化 ,感染性滴度下降2 0logCCID50 /ml。结论 超声波破碎率最高 ,细胞碎片最小 ,病毒充分释放 ,且不损伤病毒 ;- 70℃和液氮冻融破碎率较低 ,细胞碎片较大 ,病毒释放效率低 ,病毒损伤以液氮冻融为重。
- 杨净思胡云章蒋国润杨晓蕾柯华昕杨伟杨蓉
- 关键词：甲型肝炎减毒活疫苗超声波冻融
- 肠道病毒多抗原表位融合蛋白、基因、疫苗及其制备方法
- 本发明涉及疫苗制备技术领域，尤其涉及肠道病毒多抗原表位融合蛋白、基因、疫苗及其制备方法。本发明提供了一种肠道病毒多抗原表位融合蛋白，所述肠道病毒多抗原表位融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。本发明疫苗采用基...
- 刘龙丁郑惠文李恒赵鑫于丽蒋国润李丹丹赵恒张莹廖芸施海晶
- 悬浮吸附方法生产H_2株甲肝减毒活疫苗的产量质量及免疫效果被引量：3
- 2001年
- :目的 在生产规模条件下 ,对悬浮和单层吸附方法应用于H2 株甲肝减毒活疫苗生产进行了 5年产量质量及人体免疫效果的比较。方法 采用悬浮吸附方法和单层吸附方法并进行比较。结果 悬浮吸附方法HAV增殖高峰比单层吸附方法提前 4天 ,抗原滴度高一个稀释度 ,病毒繁殖全程细胞质量优于单层吸附方法 ,整个生产周期可缩短 9天。历年大规模对比生产和人体免疫效果观察结果表明 :悬浮吸附方法生产甲肝疫苗滴度略高于单层吸附方法 ,两者生产的疫苗在人体免疫效果方面无显著差异。结论 悬浮吸附方法更适宜H2 株甲肝减毒活疫苗工业化、规模化生产。
- 杨净思曹逸云王晓辉胡凝珠蒋国润柯华昕杨晓蕾王东宝董德祥
- 关键词：免疫效果
- 肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白在人支气管上皮细胞中对天然免疫相关信号分子的表达及T细胞免疫反应的影响被引量：2
- 2019年
- 目的探讨肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(coxsakievirus A 16,CA16)VP1蛋白在人支气管上皮细胞中对天然免疫相关信号分子的表达及T细胞免疫反应的影响。方法经RT-PCR法扩增EV71和CA16的VP1序列,插入至载体pcDNA3. 1(+),构建重组真核表达质粒pcDNA-EV71-VP1和pcDNA-CA16-VP1。分别转染人支气管上皮细胞16HBE,于转染后24、48和72 h收集样本,进行细胞内天然免疫相关信号分子表达的检测和刺激T细胞增殖的检测。结果经双酶切及测序鉴定,重组真核表达质粒pcDNA-EV71-VP1和pcDNA-CA16-VP1构建正确。与阴性对照组比较,EV71-VP1组IFNγ、OX40L、RANKL、TNF-α和IL-2的水平上调,而CA16-VP1组的上调幅度较小。EV71-VP1及CA16-VP1组16HBE细胞的胞内外提取物均可明显刺激分泌IFNγ的T细胞增殖(P <0. 05)。结论 EV71和CA16 VP1蛋白在人上皮细胞16HBE中表达后,可差异性诱导细胞中天然免疫信号分子表达及相似的非特异性刺激T细胞增殖能力。
- 李好张莹王丽春姜莉范胜涛杨二霞董承红蒋国润张小龙廉亚茹李琦涵
- 关键词：肠道病毒71型柯萨奇病毒A组16型获得性免疫
- 柯萨奇病毒A6型CVA6-KM-J33及应用
- 本发明公开了柯萨奇病毒A6型CVA6‑KM‑J33及应用，属于生物医药技术领域。本发明提供了一株柯萨奇病毒A6型CVA6‑KM‑J33，属于CVA6病毒。本发明所述毒株CVA6‑KM‑J33对KMB17细胞易感，能够获得...
- 于丽刘龙丁李丹丹赵恒蒋国润郑惠文张莹廖芸施海晶赵鑫李恒范胜涛纳锐雄杨槐鲁明何云龙王亚芳
- 埃可病毒6型对恒河猴树突状细胞的感染研究
- 2019年
- 目的:肠道病毒作为小核糖核酸病毒的成员之一,其病原特性已得到了广泛的研究,为进一步探讨其尚未完全清楚的病理学机理,利用来源于恒河猴的不同免疫细胞,对埃可病毒6型(Echovirus 6,Echo 6)毒株与树突状细胞的作用关系及其特征做了初步分析。方法:利用流式细胞仪及抗不同树突状细胞表面特征分子的抗体,从恒河猴外周血及骨髓分离未成熟树突状细胞,经体外诱导培养后,以Echo 6病毒在感染复数为0.1的条件下感染树突状细胞,并于感染后不同时间点收集细胞,检测病毒载量,绘制病毒增殖曲线,同时对上清中相关细胞因子含量做出动态检测。结果:源于恒河猴外周血PBMC分选出的树突状细胞以成熟期树突状细胞(CD11^+/CD83^+)居多;而源于骨髓的细胞经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)和重组人白细胞介素-4(recombinant human interleukin-4,rhIL-4)刺激培养后诱导分化的树突状细胞则以未成熟细胞为主。Echo 6型病毒分别对未成熟树突状细胞和成熟树突状细胞进行感染后显示,病毒在未成熟树突状细胞中有明显增殖的趋势而非在成熟树突状细胞中增殖。进一步检测病毒感染这些细胞后效应分子的表达情况发现,感染了Echo 6型病毒的未成熟树突状细胞出现肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)转录表达水平的明显上升,同时这些细胞的表面标记呈现CD11^+/CD83^+趋势。结论:Echo 6型病毒能够感染未成熟树突状细胞并在其中出现明显增殖趋势,并在上调细胞TNF-α和rh IL-6表达水平的同时,促进这些细胞转变为成熟树突状细胞。
- 曾洁媛杨盛然李琦涵王建斌王晶晶张小龙范胜涛冯敏廖芸王丽春蒋国润杨少杰余波张莹
- 关键词：树突状细胞肠道病毒肿瘤坏死因子白细胞介素-6
- 柯萨奇病毒A16型抗原与呼吸道黏膜上皮组织内先天淋巴细胞的相互关系及其疫苗应用价值被引量：5
- 2018年
- 柯萨奇病毒A16型(coxsakievirus A16,CA16)是引起手足口病的主要病原,但其发病及相关免疫机制尚不清楚,导致其疫苗研发面临诸多困难。众多研究表明,呼吸道黏膜上皮细胞及其相关免疫细胞尤其是天然淋巴细胞(innate lymphoid cell,ILC),在很大程度上促进病毒感染中天然免疫和适应性免疫反应的激活。然而,ILC在CA16感染诱导的免疫反应中如何发挥作用仍未知晓。为揭示CA16感染过程中ILC与病原的相互关系及发挥的作用,首先利用定量反转录-聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测CA16感染的人支气管上皮细胞16HBE和以特别配制的佐剂导入CA16灭活抗原的小鼠支气管上皮细胞CP-M175中对ILC具有激活效应的重要基因表达情况。然后,将特别配制的CA16灭活疫苗通过鼻腔免疫BALB/c小鼠,分析呼吸道黏膜组织中ILC与病毒抗原之间的相互关系。体内外实验结果均显示,CA16活病毒和灭活的病毒抗原能诱导ILC活化所需信号通路分子的表达增加,且ILC分泌的细胞因子表达增加。免疫荧光和共聚焦显微镜观察结果亦证实,病毒抗原与ILC1/ILC3分别存在共定位现象。比较4种途径/程序免疫的小鼠体内抗CA16中和抗体和特异性细胞免疫应答情况,发现采用特别配制的CA16灭活疫苗免疫小鼠能诱导产生较好的抗病毒免疫应答。结果提示,CA16抗原能通过激活ILC及其相关信号通路诱导产生有效的免疫反应。
- 王永蓉廉亚茹蒋国润范胜涛冯敏杨二霞姜莉董承红赵志梅王丽春廖芸张莹李琦涵
- 关键词：柯萨奇病毒A16型树突细胞呼吸道黏膜
